《济宁青山羊皮肤毛囊的发育性变化与mtr1a、igf1和tyr基因的差异表达研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《济宁青山羊皮肤毛囊的发育性变化与mtr1a、igf1和tyr基因的差异表达研究（62页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、疆 1 ；毓 多 关于学位论文原创性和使用授权的声明 ，+ 强，$ I。 l _ | ， 意7 露 ， j _ 小 ：? ，。 本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学 研究所取得的的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做 出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律 责任由本人承担。 本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规 定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸 质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大 学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学 位论文。 保密
2、论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名：誊彬 导师签名： 日 主袭 朔：加，o 毛f 中 ，。一_翌叫_o 囊， ，#9蝎 ，j；r 本研究由国家自然科学基金项目 ( 编号：3 0 6 714 9 8 ) 资助 F u n d e d b yN a t i o n a lN a t u r a lSc i e n t i f i c F o u n d a t i o no f C h i n a ( 3 0 6 714 9 8 ) 1 符号说明 ， j 目录 中文摘要1 A B S T R A C T 3 l 文献综述5 1 1 济宁青山羊的种质特性。5 1 2 哺乳动物皮肤和毛囊基本结构
3、概述一5 1 2 1 皮肤的基本结构5 1 2 2 毛囊的基本结构和细胞组成5 1 2 3 毛囊的发生：6 1 2 4 毛囊的分化和发育一6 1 2 4 1 初级毛囊的发育6 1 2 4 2 次级毛囊的发育7 1 2 4 3 毛囊干细胞。8 1 3 动物毛囊生长发育的周期性调控9 1 3 1 动物毛囊生长发育的周期性变化9 1 3 2 动物毛囊周期性变化的形态特征。9 1 3 3 初级毛囊与次级毛囊周期性形态特征9 1 3 4 动物毛囊生长发育与周期性变化的信号通路。1 0 1 4 毛色形成机制1 l 1 5 影响济宁青山羊猾子皮品质的调控因子1 2 1 5 1 褪黑素受体1 A 对毛发生长的
4、调节1 3 1 5 2 类胰岛素生长因子l 对毛发生长的调节1 4 1 5 3 酪氨酸酶对毛色的调节机制。1 5 1 6 本研究的目的和意义1 6 2 材料与方法。1 7 2 1 试验材料和样本采集1 7 2 2 主要仪器与试剂。1 7 2 2 1 试验仪器。1 7 2 2 2 组织切片试剂1 7 2 2 3 常规分子试剂1 8 2 2 4 细菌的转化和筛选阳性克隆所用试剂1 8 2 2 5 质粒提取用缓冲液和试剂1 8 2 2 6R T - P C R 和q R T - P C R 相关试剂1 9 2 2 7 引物设计与合成1 9 2 3 试验方法2 0 2 3 1 皮肤组织的石蜡切片与显微
5、观察2 0 2 3 2 青山羊皮肤组织总R N A 的提取、纯化与质量检测2 0 2 3 3 反转录合成e D N A 2 1 2 3 4P C R 扩增及其检测2 2 2 3 5 目的e D N A 片段的回收与纯化2 2 2 3 6 目的P C R 产物与载体的连接2 3 2 3 7 目的片段转化大肠杆菌2 3 2 3 8 荧光定量P C R 2 3 2 3 8 1 标准曲线和熔解曲线的建立2 3 2 3 8 2 荧光定量P C R 反应条件的优化2 4 2 3 9 实验数据的统计分析方法2 4 3 结果与分析2 5 3 1 济宁青山羊皮肤毛囊形态结构的发育性变化规律2 5 3 1 1 青
6、山羊皮肤组织的发育性交化规律2 6 3 1 2 成年羊皮肤不同部位的组织学变化2 6 3 1 3 青山羊毛囊的发育性变化规律2 7 3 1 4 成年羊皮肤不同部位毛囊的组织学形态2 8 3 2 青山羊皮肤M T R - I A 基因的差异表达与发育性变化2 9 3 2 1M T R - 1 A 基因的测序结果2 9 3 2 2M T R - 1 A 和G A P D H 基因的荧光定量标准曲线与熔解曲线。3 0 3 2 3 青山羊皮肤组织中M T R - 1 A 基因的差异表达与发育性变化3 0 3 2 4 成年青山羊皮肤不同部位M T R - 1 A 基因的差异表达。3 l 3 3 青山羊皮
7、肤I G F 1 基因的差异表达与发育性变化规律3 1 3 3 1 I G F 1 的荧光定量标准曲线与熔解曲线3 2 3 3 2 青山羊皮肤组织中I G F 1 基因的差异表达与发育性变化3 2 3 3 3 成年青山羊皮肤不同部位I G F 1 基因的差异表达。3 3 3 4 青山羊皮肤r 己基因的差异表达与发育性变化规律3 3 3 4 1r 豫基因的荧光定量标准曲线与熔解曲线。3 4 3 4 2 青山羊皮肤组织中n 依基因的差异表达与发育性变化3 4 3 4 3 成年青山羊皮肤不同部位T 己基因的差异表达3 5 3 5 成年羊皮肤I G F 1 和M T R - 1 A 的差异表达与羊毛细
8、度3 5 4 讨论3 6 4 1 济宁青山羊成年羊皮肤的组织学结构3 6 4 2 济宁青山羊毛囊的组织学结构和发育性变化规律3 6 4 3 关于不同发育阶段M T R - 1 A 基因的差异表达。3 7 4 4 关于不同发育阶段I G F 1 基因的差异表达3 7 4 5 关于不同发育阶段T Y R 基因的差异表达3 8 4 6 关于成年羊皮肤不同部位毛囊组织学与基因差异表达3 8 5 结论。3 9 5 1 济宁青山羊皮肤毛囊组织学特性与发育性变化3 9 5 2M T R - 1 A 在青山羊不同发育阶段皮肤组织中差异表达4 0 5 3I G F 1 在青山羊不同发育阶段皮肤组织中差异表达4
9、0 5 4n 瓜在青山羊不同发育阶段皮肤组织中差异表达4 1 5 5 成年羊皮肤I G F 1 和M T R - 1 A 的差异表达与羊毛细度4 l 5 6 济宁青山羊猾子皮的毛色和花纹4 1 参考文献。4 2 j 酵【谢5 l 攻读学位期间发表论文情况。5 2 I 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 为揭示济宁青山羊皮肤毛囊的发育性变化规律及其候选基因的差异 表达对皮肤毛囊生长和发育的影响，本研究采用组织学和实时荧光定量 P C R 等分子细胞生物学技术，对青山羊不同发育阶段皮肤毛囊的组织结构 及其发育性变化规律和皮肤组织中褪黑素受体l A ( M T R - l A ) 、类胰岛素 生长因
10、子1 ( I G F 1 ) 和酪氨酸酶( T Y R ) 基因的m R N A 差异表达量进行 了比较研究。主要研究结果如下： 一、采用组织学与显微观测技术，比较研究了济宁青山羊胎儿羊( 妊 娠8 0 。8 5 d ) 、小猾皮( 出生后3 d ) 、大猾皮( 出生后3 0 d ) 和l 龄成年羊皮 肤毛囊的组织学结构，以及成年羊皮肤不同部位的组织学差异，结果表明： ( 1 ) 胎儿羊( 妊娠8 0 8 5 d ) 胚胎性表皮分化为三层并增厚，真皮分化 为两层，交织分布着成纤维细胞。在表皮区可以发现次级毛囊毛基的发生。 ( 2 ) 小猾皮毛囊层中的胶原纤维平行纵横交错，与网状层相比排列较 为
11、紧密；而网状层中的胶原纤维呈水平走向，为平行交织状排列。毛囊层 内的弹性纤维细而弯曲，相互交织，纵横排列。网状层内无弹性纤维的分 布。小猾皮的毛囊组织间隙较大，密度较稀，初级毛囊发达，次级毛囊较 少。小猾皮每个毛囊群仅由2 3 个初级毛囊和1 2 个次级毛囊组成。 ( 3 ) 大猾皮毛囊层和网状层明显增厚，有粗大的胶原纤维束分布其中。 大猾皮的毛囊密度和毛囊群直径极显著地大于小猾皮。次级毛囊密集排列 在初级毛囊的周围。大猾皮毛囊群由1 5 个初级毛囊和若干个次级毛囊组 成，其中3 毛囊群最多，发达的毛囊群使大猾皮表面粗糙。 ( 4 ) 成年羊皮肤毛囊层的厚度超过网状层，毛囊层内含有较多的结缔 组织、胶原纤维和弹性纤维，形成致密的弹性纤维网。网状层中的胶原纤 维粗大，胶原纤维呈平行疏松排列。成年羊皮肤初级毛囊较粗长，具有皮 脂腺等附属结构，毛干有髓质；次级毛囊没有髓质且毛球较小，皮脂腺不 发达或缺如。成年羊毛囊群和大猾皮相似，3 毛囊群最多，占8 1 3 2 。 ( 5 ) 成年羊颈、背、腹和臀四个部位的皮肤厚度、表皮厚、真皮各层 厚均以颈部最厚，背部次之，腹部最薄，颈部与背部、腹部差异极显著， 济宁青山羊皮肤毛囊的发育性变化与M T R l A 、I G F l 和T Y R 基因的差异表达
