《氟化钾和高氟茶细胞及遗传毒性的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《氟化钾和高氟茶细胞及遗传毒性的实验研究（50页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、苏州大学 硕士学位论文 氟化钾和高氟茶细胞及遗传毒性的实验研究 姓名：高美伶 申请学位级别：硕士 专业：劳动卫生与环境卫生学 指导教师：周建华 20090501 氟化钾和高氟茶细胞及遗传毒性的实验研究 中文摘要 中文摘要 目的：氟是人体必需的微量元素，氟既是天然的致地球化学性疾病的病因，又 是工业生产和生活燃煤的重要污染物。氟与钙磷代谢有密切关系，过量摄入氟可 累及机体各组织器官，主要表现在对骨骼和牙齿的损害。随着工业生产的发展，人 群暴露于氟的机会愈来愈多，有关氟的毒性和茶叶的安全性问题引起了人们的关注， 尤其是潜在的遗传毒性的研究已经开始受至I j 重视。我们选择氟化钾和对环境中氟 有较强
2、富集作用的茶叶作为研究对象，旨在了解氟化钾和高氟茶的细胞毒性、致 突变性和D N A 损伤，试图探讨氟的遗传毒性，并为茶叶的安全饮用提供实验依据。 方法：用氟离子选择电极法测定绿茶A 、绿茶B 和对照茶浸提液中氟化物的 含量。通过台盼蓝拒染法和M T T 比色法检测氟化钾和不同浓度的茶叶浸提液对 V 7 9 细胞作用不同时间后细胞存活率的变化，了解浓度时间毒性效应关系；采用 鼠伤寒沙门菌回复突变试验( A m e s 试验) ，探讨氟化钾和2 种高氟茶的致突变性； 采用单细胞凝胶电泳技术研究氟化钾和高氟茶浸提液对V 7 9 细胞的D N A 损伤程度 及类型，比较含不同氟含量的茶汤对D N A
3、 损伤程度的差别。 结果：绿茶A 、绿茶B 和对照茶浸提液中氟化物的浓度分别为2 3 3 0 m g k g 、 1 3 9 0 m g k g 、7 5 3 m g k g 。绿茶A 、绿茶B 的氟含量超过了农业行业标准；在台盼 蓝拒染法和M T T 比色法都检测到：氟化钾、绿茶A 和绿茶B 茶汤对V 7 9 细胞活 性有抑制作用，并具有明显的时间效应和剂量效应关系；在台盼蓝拒染法试验中， 从4 h 和2 4 h 的半数抑制浓度知，氟化钾的I C 5 0 明显低于三种茶叶，且对照茶 绿 茶B 绿茶A ，在4 h ( 2 5 0 , - 一1 0 0 0 m g m L 剂量范围) 和2 4
4、h 作用后，氟化钾、绿茶A 和绿茶B 的细胞存活率明显低于对照茶( p 0 0 5 ) ，且绿茶A 的毒性大于绿茶 B ( p 0 0 5 ) 。在M T T 试验中，氟化钾和绿茶A 、绿茶B 的细胞存活率明显低于对照 茶( p 2 0 2 6 m g m L ( 绿茶A ) O 9 3m g m L ( 氟化钾) ；A m e s 实验发现 氟化钾和高氟茶绿茶A 和绿茶B 均无致突变性，但氟化钾在5 0 0 0 u g m I 剂量上对 T A 9 8 、T A l 0 0 、T A l 0 2 三菌株有明显的抑制作用：在单细胞凝胶电泳技术中，氟 化钾、绿茶A 和绿茶B 浸提液可引起V 7
5、9 细胞的D N A 损伤，且随着浓度的增加 氟化钾和高氟茶细胞及遗传毒性的实验研究中文摘要 而加重。氟化钾的D N A 损伤作用( p 绿茶A ( p 绿茶B ( p t h a to fg r e e nt e aA f r o mt h em e d i a np r o l i f e r a t i o ni n h i b i t i o nc o n c e n t r a t i o n s a t4 ha n d2 4 h T h ec e l ls u r v i v a lr a t eo ft h eg r e e nt e aA 、Ba n dK Fw e r es
6、i g n i f i c a n t l y l e s st h a nt h ec o n t r o lt e a ( p I O 0 5 ) ，t h ec e l ls u r v i v a lr a t eo ft h eg r e e nt e aBW a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a n t h e g r e e n t e aA ( p O 0 5 ) a tt h ec o n c e n t r a t i o no f 2 5 0 m g m L N l0 0 0 m g m Lf o r4 ha n dO
7、 6 3 - 10 0 0 m g m L f o r2 4 h I nM T Tt e s t ，t h ec e l l s u r v i v a lr a t e so ft h eg r e e nt e aA 、Ba n dK Fw e r es i g n i f i c a n t l yl e s st l ：a nt h ec o n t r o lt e a ( p 0 0 5 ) ，T h ec e l ls u r v i v a lr a t eo ft h eg r e e nt e aBw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h
8、e rt h a nt h a to f t h eg r e e nt e aA ( p O 0 5 ) f o r4 2 4 h A n a l y s i n gt h em e d i a nl e t h a lc o n c e m r a t i o n s ( I C s 0 ) o f K Fa n dt h r e e t e as o a k s ，t h e r ea r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e sb e t w e e nt h et h r e et e ag r o u p s a n dK F ( p
9、0 0 5 ) ，T h ea v e r a g eI C 5 0o fg r e e nt e aA 、g r e e nt e aB 、c o n t r o lt e aa n dK F w e r e2 0 3 6 、2 3 2 4 、2 8 1 8 、O 9 3 m g m lr e s p e c t i v e l y T h e r ew a sn om u t a g e n i c i t ya b o u t t h e s et w ok i n d so ft e as o a k sa n dK Fi nA m e st e s t T h ec o l o n
10、i e so f r A 9 8 ，T A l0 0a n d T A l 0 2s t r a i n sw e r el e s st h a nt h a to f t h ec o r r e s p o n d i n gn e g a t i v ec o n t r o lg r o u pQ O 0 1 ) a tt h ec o n c e n t r a t i o no f5 0 0 0 p , g d i s hi nt h ef l u o r i d ec o n t r o lg r o u p ( K F ) I ns i n g l ec e l lg e l
11、 e l e c t r o p l m r e s i s ( S C G E ) a s s a y ，K F 、g r e e nt e aA a n dg r e e nt e aBc o u l di n d u c eD N A d a m a g ei nV 7 9c e l l s D N Ad a m a g eo fK Fw a sl a r g e rt h a nt h a to fg r e e nt e aA 、 B ( p 0 0 5 ) ，a n dt h eD N Ad a m a g eo fg r e e nt e aA W a sl a r g e rt
12、 h a nt 1 1 a to fg r e e nt e a B Q 0 0 5 ) ，T h e r eW a Sn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c eb e t w e e nt h ec o n t r o lt e aa n dn e g a t i v e g r o u p C o n c l u s i o n s ：T h ef l u o r i d ec o n t e n to fg r e e nt e aA 、Be x c e e dt h ea g r i c u l t u r e p r o f e s s i
13、 o ns t a n d a r d 。K Fa n dt w ot e as o a k se o n t a i n gh i g hf l u o r i d ec o u l di n d u c ev i a b i l i t y i n h i b i t i o n 、) l ，i 也s i g n i f i c a n td o s e e f f e c tr e l a t i o n s h i pi nV 7 9c e l l s ，C y t o t o x i c i t yo fg r e e n t e aA 、Bw e r el a r g e rt h
14、 a nt h a to ft h ec o n t r o lt e a ( p 0 0 5 ) ，C y t o t o x i c i t yo fK Fw e r el a r g e r t h a nt h a to ft e as o a k sc o n t a i n i n gh i g hf l u o r i d ea ta tt h el o wc o n c e n t r a t i o n so nV 7 9c e l l s T h e r ew a sn om u t a g e n i c i t ya b o u tt h e s et w ok i n
15、 d so ft e as o a k sa n dK Fi nA m e st e s t K F 、g r e e nt e aA a n dg r e e nt e aBc o u l di n d u c eD N A d a m a g ei nV 7 9c e l l s D N Ad a m a g e o f K Fw a sl a r g e rt h a nt h a to f g r e e nt e a A 、B ( p O 0 5 ) ，a n dt h eD N Ad a m a g eo f g r e e nt e a I V Aw a sl a r g e rt h a nt h a to fg r e e nt e aB ( p 0 0 5 )
