《梅花花器官cdna文库的构建及其pmap3、pmpi、pmag基因的克隆(1)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《梅花花器官cdna文库的构建及其pmap3、pmpi、pmag基因的克隆(1)（72页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、分类号 华中农业大学硕士学位论文 I 王S 3 8 5 9 8 密级 梅花花器官c D N A 文库的构建及其P m A P s 、P m P I P m AG 基因的克隆 Co n s t r u c t i o no ff l o r a lo r g a nc D N AL i b r a r y a n dC l o n i n go fP m A P 3 ，P m P I ，P m AGG e n e s i np r u n u sm u m e 研究生：骆江伟 指导教师：包满珠教授 张俊卫副教授 专业：园林植物与观赏园艺研究方向：园林植物遗传育种 与生物技术 获得学位名称：农学硕
2、士获得学位时间：2 0 0 9 年6 月 华中农业大学园艺林学学院 二oo 九年六月 1 剃燃 华中农业大学学位论文独创性声明及使用伐仪吊 学位论文 失 如需保密，解密时间 幽，。年7 月，9 日 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名： 蔚泥f ，帚 时间
3、： w 一年6 月f 7 日 学位论文使用授权书 注：保密学位论文( 即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论 文) 在解密后适用于本授权书。 虢鲂以干锄鲐维；恕 蛳机口月I 7 日蛳期：叼幽炉 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间 L 梅花花器官c D N A 文库的构建及其P m A B 、舟行用、P m A G 基凶的克隆 目录 摘要I A B S T R A C T I I 缩略语表 第一章文献综述。1 lc D N A 文库研究进展l 1 I 基因文库l 1 2c D N A 文库一l 1 2 I 经典的c D N A 文库2 1 2 2 均一化c D N
4、A 文库2 1 2 3 差减c D N A 文库( S u b t r a c t i v ec D N Al i b r a r y ) 2 1 2 4c D N A 全长文库3 1 2 5 固相c D N A 文库构建4 1 3c D N A 文库的应用5 1 3 1 克隆分离目的基因5 1 3 2 进行E S T 的开发一5 1 3 3 开发S S R 引物5 I 3 4 基因的时空表达研究6 1 4 从c D N A 文库中分离获得全长基冈的方法6 I 4 IR A C E 法6 1 4 2 标记探针c D N A 文库筛选法6 1 4 3 反式P C R 7 1 4 4T A I L
5、 P C R 7 1 5c D N A 文库的缺陷7 2 花器官发育7 2 I 花发育A B C 模型及其发展8 2 1 1 经典的A B C 模型8 2 1 2A B C D 模型一8 2 1 3A B C D E 模型9 2 1 4 四聚体模型1 0 3M A D S b o x 基因的研究进展11 3 1M A D S - b o x 基因的起源、分类及结构一1 1 3 2 植物M A D S - b o x 基因的功能1 2 3 2 1 植物M A D S b o x 基因与花的发育1 2 3 2 2 控制开花时间早晚1 2 3 2 3 植物M A D S - b o x 基因参与胚珠
6、的发育一1 2 3 2 4 植物M A D S - b o x 基冈与果实发育1 2 3 2 5 植物M A D S b o x 基因与根的发育1 3 4 梅花的研究概况1 3 4 1 梅花品种选育一1 3 4 2 繁殖与栽培生理一1 4 4 2 1 营养繁殖1 4 4 2 2 花期调控1 4 华中农业大学硕士学位论文 4 2 3 梅花花色生理1 4 4 3 梅花分子标记研究1 4 5 研究目的及意义1 5 第二章梅花花器官e D N A 文库的构建1 6 l 材料与试剂1 6 1 1 植物材料1 6 1 2 主要试剂16 2 实验方法1 7 2 1 总R N A 的提取1 7 2 1 1B
7、i o z o l 法提取总R N A 1 7 2 1 2S D S 法提取总R N A 17 2 1 3C T A B 法提取总R N A 1 7 2 2m R N A 的分离1 8 2 3e D N A 文库构建1 9 2 3 1e D N A 第一链的合成1 9 2 3 2 第二链的合成1 9 2 3 3 蛋白酶K 消化2 0 2 3 4S f iI 酶消化2 0 2 3 5C H R O M AS P I N - 4 0 0C o l u m n s 层析柱分级分离e D N A 片段2 l 2 3 6e D N A 与k T r i p l E x 2 载体的连接2 2 2 3 7
8、连接产物的包装2 2 2 3 8X L - 1B l u e 菌株的培养2 2 2 3 9 非扩增文库滴度的测定2 3 2 3 1 0 噬菌体文库的扩增2 3 2 3 1 1 扩增文库滴度的测定2 4 2 3 1 2 非扩增文库噬菌体的环化2 4 2 3 1 3e D N A 文库插入片段的菌落P C R 检测2 5 2 3 1 4 有效E S T 的获得和基因功能分类2 5 3 结果与分析2 6 3 1 不同方法提取的总R N A 2 6 3 2m R N A 的分离一2 7 3 4d s c D N A 的分级同收2 8 3 5c D N A 文库的滴度和重组率2 8 3 6 文库插入片段大小的检测2 9 3 7 有效E S T 序列的获得和基因功能分类3 0 z I 讨论3 3 4 1 梅花总R N A 的提取3 3 4 2 全长c D N A 构建一3 3 4 3 有效E S T 序列的获得和基因功能分类3 4 第三章B 类、C 类花发育相关基因的克隆及P m A P 、尸砌阻
