盐酸小檗碱对葡萄糖、氧化型低密度脂蛋白、胰岛素联合诱导人脐静脉内皮细胞损伤的干预作用

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1、合诱 1 1 3 1 3 前言6 1 4 材料与方法9 1 5 结果1 6 1 6 讨论2 2 1 7 结论2 9 1 8 参考文献3 1 1 9 英汉缩略词对照表3 6 2致谢3 8 3 黄连素在糖尿病中作用的研究进展( 综述) 3 9 、 作 外 培养2 4 小时贴壁后,以G l u ( 4 0 m m o l L ) 、I n s ( 2 0 m U L ) 、O X L D L ( 2 0 m g L ) 联合作用4 8 小时,建立2 型糖尿病血管并发症的体外内 皮细胞损伤模型。在此基础上观测不同浓度的盐酸小檗碱( 1 0 0 、7 5 、 5 0 、2 5 、1 0 I t g m

2、1 ) 对该细胞损伤模型的调节作用,并建立阳性对照卡 托普利组( 5 0 ,t g r r a ) 和阴性对照正常组。各试验组细胞继续培养4 8 小时后分别检测细胞活性、增殖率及其细胞培养液中的内皮素( E T 1 ) 、 一氧化氮( N O ) 、超氧化物歧化酶( s o d ) 、肿瘤坏死因子畔。叻和白介 素6 ( I L 6 ) 的含量。结果:1 ) 细胞增殖率:在G l u 、I n s 、O X L D L 混 合条件液损伤下,模型组细胞增殖率0 4 7 2 士O 1 1 3 较正常组0 9 7 4 士O 0 3 2 明显下降( 尸 O 0 1 ) ,说明造模成功。治疗各组0 8 9

3、 9 士0 0 7 3 、O 8 4 3 士O 1 2 3 、0 7 2 3 土O 1 2 4 、0 6 8 8 士O 1 31 、0 6 3 8 士O 0 9 5 及卡托普利组0 6 0 3 士O 0 8 7 可明显改善内皮细胞的活性,与模型组比较有统计学意义 俨 O 0 1 ) ,并有一定的剂量依赖性,其中治疗1 4 组作用强于卡托普利 组( 尸 O 0 1 及0 0 5 ) 。2 ) N O N O 含量模型组9 8 8 1 士2 0 8 2 t m o l L 较正 1 一 常组5 4 0 4 7 士3 9 4 6 1 a m o l L 明显降低( 尸 O 0 1 ) ,B e r

4、各治疗组7 3 7 2 4 士4 4 0 4 、6 7 9 5 84 - 2 5 7 3 、6 4 3 7 0 士4 3 4 2 、5 7 0 1 3 士3 7 2 1 、5 5 1 7 6 士2 4 1 0 1 a m o l L 及卡托普利组6 6 2 5 8 士2 1 1 8 1 a m o l L 可明显提高N O 的释 放,与模型组比较有统计学意义 O 0 1 ) ,并有一定的剂量依赖性,其 中治疗1 组作用强于卡托普利组( 尸 O 0 1 ) 。3 ) E T 1 :E T 1 模型组6 0 2 4 0 士3 0 5 8n g L 较正常组3 8 1 0 1 士2 9 1 1 n

5、g L 显著升高( P O 0 1 ) ,B e t 治疗 各组3 9 4 1 2 士2 8 9 0 、4 5 6 5 6 士2 9 8 4 、4 8 9 7 6 士2 9 1 4 、5 2 2 9 24 - 1 2 5 4 、5 6 3 7 3 4 - 1 0 9 9 n g L 及卡托普利组4 5 3 3 7 士2 9 7 1 n g L 可明显抑制E T 一1 的释放, 与模型组比较有统计学意义( 尸 O 0 1 ) ,并有一定的剂量依赖性,其中治 疗1 组作用强于卡托普利组俨 0 0 1 ) 。4 ) S O D - S O D 模型组1 6 2 2 1 士1 4 0 1 U m l

6、较正常组3 5 7 8 4 士1 4 9 7 显著降低( 尸 O 0 1 ) ,B e r 治疗各组 3 2 5 1 5 + 2 2 3 1 、2 9 7 1 8 士2 3 0 6 、2 6 1 8 6 士1 7 2 9 、2 3 6 4 3 士1 0 0 8 、2 2 7 0 4 + 1 9 4 8 及卡托普利组2 6 8 9 7 士1 6 8 8 可明显提高S O D 含量,并有一定的剂量依 赖性,与模型组比较有统计学意义( 尸 O 0 1 ) ,其中治疗1 ,2 组作用强 于卡托普利组妒 O 0 1 ) 。5 ) I L 6 :I L - 6 模型组1 6 9 2 5 8 + 1 4 7

7、 5 6 p g m l 较 正常组3 6 8 4 0 士3 5 7 8 p g m l 显著升高( 尸 O 0 1 ) ,B e r 各治疗组 4 2 6 3 5 + 6 2 1 6 、 6 0 4 1 7 + 8 5 9 3 、7 0 5 9 3 + 7 0 1 9 、8 1 1 9 5 + 4 2 0 4 、 8 5 9 3 7 + 9 0 7 3 p g r r d ,卡托利普组7 0 0 6 9 士9 7 4 0p g m l ,可明显降低I L 一6 的浓度,并有一定的剂量依赖性,与模型组比较有统计学意义俨 O 0 1 ) , 其中治疗1 、2 组作用强于卡托普利组( 尸 O 0

8、1 ) 。6 ) n 盯c 【:n 吓0 【模 型组5 1 7 8 0 0 + 2 4 0 9 2p g r r d 较正常组3 4 3 0 9 6 士1 8 6 7 7P g m l 明显升高 俨 O 0 1 ) ,B e r 治疗各组3 8 1 2 3 2 + 1 6 4 1 5 、4 0 5 0 3 2 士2 8 5 0 8 、4 3 1 5 6 4 2 燃燃 + 2 6 9 4 2 、4 6 9 7 8 9 士1 5 0 0 7 、4 9 4 6 1 5 :1 :2 1 2 0 3p g m l 及卡托利普组 5 1 7 8 0 0 + 2 4 0 9 2p g m l 可明显降低T

9、N F 0 【的浓度,并有一定的剂量依 赖性,与模型组比较有统计学意义伊 O 0 1 ) ,其中治疗1 、2 组作用强 于卡托普利组俨 O 0 5 ) 。结论:盐酸小檗碱具有抑制G l u 、I n s 、O X L D L 联合诱导下对H U V E C 功能损伤的作用。其机制可能与抗氧化应激、 促进N O 的分泌、减少E T 1 、n 师c c 及I L 6 的分泌有关。 关键词:盐酸小檗碱;血管内皮细胞;内皮素;一氧化氮;超氧 化物歧化酶;肿瘤坏死因子 T h ee f f e c t so fB e r b e r i n e H y d r o c h l o r i d eo nt

10、 h ev a s c u l a r E n d o t h e l z a lc e l l sI n j u r e db yG l u c o s e 、I n s u l i na n d l o w D e n s i t y 一 一 L | p o p r o t e i n A b s t r a c t :O b j i e e t i v e :T oi n v e s t i g a t et h ee f f e c t so fB e r b e r i n eo nt h e v a s c u l a rE n d o t h e l z a lc e l l s

11、 I n j u r e db yG l u c o s e 、I n s u l i na n do x i d i z e d l o w D e n s i t yL i p o p r o t e i n M e t h o d s :W em a k eH u m a nu m b i l i c a lv e i n e n d o t h e l i a lc e l ll i n eH u v e ce x p o s et of i x e dc o n c e n t r a t i o no fG l u c o s e 、 I n s u l i na n dl o w

12、 D e n s i t yL i p o p r o t e i n ( G l u 4 0 m m o l L ,I n s 2 0 m U L ,O X L D L 2 0 m g L ) f o r4 8h o u r sa n di n v e s t i g a t et h ee f f e c t so fd i f f e r e n tc o n c e n t r a t i o n o fB e r b e r i n eo nt h i si n j u r e dv a s c u l a rE n d o t h e l i a lc e l l s T h ec

13、 e l l si ne a c h g r o u pw e r ec u l t u r e df o ra d d i t i o n a l4 8h o u r s ,t h e nc e ll Sv i a b i l i t yw a s e x a m i n e da n dt h es u p e m a t a n t sw e r eu s e dt od e t e r m i n et h ec o n t e n t so f e n d o t h e l i n 一1 ( E T 1 ) ,n i t r i co x i d e ( N O ) ,I n t

14、e rl e u k i n 6 ( I L 6 ) ,T u m o rN e c r o s i s F a c t o r ( n 盯一仅) ,S u p e r - o x i d eD i s m u t a s e ( S O D ) R e s u l t s :1 ) t h ee f f e c to n c e l lp r o l i f e r a t i o nr a t e :t h ep r o l i f e r a t i o nr a t eo ft h em o d e lg r o u pd e c r e a s e d s i g n i f i c

15、 a n t l yc o m p a r e dw i t ht h en o r m a lg r o u p ( 尸 O 01 ) ,i ts h o w e st h e s u c c e s so fm o d e l T r e a t m e n t g r o u p s a n d C a p t o p r i lg r o u p c o u l d s i g n i f i c a n t l yi m p r o v et h ea c t i v i t yo fe n d o t h e l i a lc e l l sa n ds h o w e sc e r t a i n d e g r e eo fd o s e d e p e n d e n t T h et r e a t m e n tg r o u pa n dm

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