《4.小鼠种群的繁殖与饲养》由会员分享，可在线阅读，更多相关《4.小鼠种群的繁殖与饲养（52页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、小鼠种群的繁殖与饲养 Sonja Rumpel, DVM Veterinary and Professional Services Charles River Laboratories 报告内容 常规繁殖的要点 记录，名称，要素 建立繁殖种群 排查繁殖性能 已知影响繁殖性能的因素 潜在解决方案 生产计划 生殖生理（小鼠） 繁殖周龄：雌性： 6 8周 雄性： 6 8周 发情周期：4天 妊娠期：19 21天 平均胎产仔数： 6 8 只 离乳：3周 繁殖寿命：多变 退役：5 6 胎 或6 8 月龄 生殖生理（小鼠） Receptivity duration:12 小时 产后排卵：分娩后12 18 小
2、时 胎间隔: 3.5 6 周 大多数小鼠在光照周期的6小时黑暗期中排卵，并且 在夜里产仔。 激素的影响 对发情周期控制或影响 1. 外源激素 2. 李-波特氏效应：由于拥挤导致抑制 3.魏顿氏效应 ：将雄性放入雌性群体中同步性周期 4. 布鲁斯效应：“陌生雄性” 5. 假孕 （来源于子宫颈刺激） 柯立芝效应： 变化是生活的调味品 一雄一雌繁殖 一只雄鼠和一只雌鼠 利用产后发情 保证每只母种一生中生产最多仔鼠 准确记录 雄性敏感的繁殖体系 雄性可能增加幼仔的死亡 一雄多雌繁殖 一只雄鼠和多只雌鼠（通常是2只） 利用产后发情 保证每个繁殖笼保留期间生产最多仔鼠 雌性可能共同承担哺育任务 雄性敏感程
3、度低 雄性可能增加幼仔的死亡 记录更加困难 不同窝仔鼠之间的竞争 多雄多雌混合繁殖 多只雄鼠和雌鼠 隔离怀孕雌鼠 如果群养怀孕动物，雌性可能会分享哺育任务 雄性最不敏感的繁殖体系 雌鼠一生中生产最少窝数的繁殖方式 不利用产后发情 记录困难 可观察的交配（或人工交配） 一只雄鼠和一只雌鼠 交配后分开 准确的妊娠时间 雄性敏感繁殖体系 与不育的雄鼠交配造成假孕，用来进行胚胎移植 基本的繁殖记录 以繁殖单位记录（一般以笼盒为单位） 种鼠编号 种鼠出生日期 种鼠合笼日期 生产第一窝时的年龄 雌性每窝生产日期 每窝新出生的幼仔数 每窝幼仔雌雄数 幼仔离乳数 也可以标注种鼠预计退役年龄/日期 将笼卡数据转
4、换成电子数据 小鼠看起来很相像. AKR A BALB/c FVB SJL 命名非常重要! 提供品系的信息 C57BL/6NCrl, Crl:SKH1-Hrhr 对于有亚系的品系尤为重要 DBA/1 and DBA/2 C57BL/6 and C57BL/10 因为亚系有不同的表型和基因型，所以命名 尤为重要 DBA/1 and DBA/2 有不同的MCH H2 单体 型 小鼠的命名 http:/www.informatics.jax.org/mgihome/nomen/ 名字包含大量的信息 涉及的品系 涉及的基因 等位基因（若有） 目标突变体或转基因的数量 创建该品系的实验室 目标突变命名法
5、 B6.129-Ahrtm1Bra/J C57BL/6 + 129 同类系 Chris Bradfield 实验室代码 第一次目标突变 芳族烃反应的基因 JAX 亚系 种鼠的选择 亲本的生产数据 母性 每窝产量 亲本疾病史 遗传标准及育种体系 遗传修饰的特性 遗传方式 生产目标 与背景相关的病变 品系相关病变不是由实验操作，传染性的， 有毒的或者其他重要的外源性因子引起的 对“完美” 情况的背离（病变） C57BL/6 小鼠通常被用作标准的遗传背 景品系 例如: 在不同的器官有黑色素沉积; 眼球发育不 正常, 牙齿咬合异常, 脑积水, 年龄相关听力下 降, 等等。 种鼠更换标准 合笼后的周数预
6、期窝数 61 9 2 12 3 18 4 21更换 From MFW Festing, “Chapter 3: Animal Production and Breeding Methods” The UFAW Handbook on the Care and Management of Laboratory Animals 种鼠退役标准 （连续生产） 有效的繁殖寿命种群每月退役百分数（%） 5个月20 6个月16.7 7个月14.3 8个月12.5 9个月11.1 10个月10 Adapted from Guidelines for the Care and Use of Mammals in
7、 Neuroscience and Behavioral Research 生产计划小结 持续监控种鼠 更新数据库 保持组织有序 经常沟通（种群经理，设施经理，动物使用者， 兽医） 应急方案 隔离种群 冷冻保存 排查繁殖障碍，提升繁殖性能 确定问题 小鼠不繁殖 小鼠不怀孕 小鼠怀孕了，但最终并没有看到仔鼠 小鼠产仔了，但是拒绝带仔 小鼠繁殖，并且哺乳仔鼠，但最终仔鼠死亡了 小鼠产仔量不高 小鼠状态不好 影响繁殖性能的因素 动物 年龄 身体状况 疾病 品系类型 基因突变 环境 光照 饲料 噪音 震动 温度 湿度 气味 操作 季节性变化 小鼠年龄 通常： 繁殖年龄在6-8周大 6-8个月后繁殖性能
8、减弱 雄性可以比雌性使用的久一点 更早一点交配繁殖吗？ 4-5周龄时阴道口打开 在饲料中添加天然植物雌激素可能加速阴道口打开的时间 （Thigpen et al, 2004） 首次发情可能不会排卵 窝产仔鼠数较少 更晚一点交配繁殖吗? 首次交配 3 月龄可能会无法繁殖 身体状况和小鼠的疾病 肥胖雄性交配行为减弱 肥胖雌性 怀孕的可能性降低 窝产仔鼠数较少 易难产 动物欠佳的身体状态会影响繁殖 急性/慢性疾病会影响繁殖性能造成胚胎期/围产期 死亡 解剖学相关的问题 解剖结构上的缺陷或 者先天性缺陷 阴道口闭锁 阴道斜隔 雄性隐睾 雌雄同体 不要将这些鼠用作种鼠! Gearhart , S. et
9、 al. CM 54(4). 2004 品系影响 各品系小鼠繁殖性能不一 品系特征 攻击性(SJL) 第一胎食仔(C57BL/6) 近交系繁殖退化 每窝产仔数下降 杂交优势 可引起遗传污染 突变 (转基因, 基因敲除, 自发突变) 死胎 不孕 神经上的行为 人为失误/管理不当 要确认至少有一雌一雄. 没有记录种鼠或仔鼠的死亡数 由于没有经常查看动物，导致仔鼠丢失或被食 老龄鼠用于繁殖的时间太长 产仔数减少 难产 环境因素 光照 长日照种鼠 (最好是14:10(光照：黑暗）光照周期) 扰乱光照周期会产生问题 例如小鼠饲养间设置窗户 饮食 肥胖会降低繁殖效率 雄性对交配没有兴趣 雌性怀孕的可能性减
10、小 营养失衡 调节饮食中脂肪的含量( or )可能会有所帮助 环境因素 噪音和震动 (应激源) 啮齿类动物能听到超声波范围 ( 20 KHz) 在繁忙区域附近饲养 独立通风笼架 附近有建筑施工? 温度 稍冷一些比温度过高好 热平衡温度： 29.6oC 30.5oC (85oF 87oF) 最好在21oC - 25oC (70oF 77oF)下饲养 ? 筑巢材料 调节体温 有助于提高幼崽存活率和增加体重 环境因素 气味 换笼是一个干扰因素 季节变化 季节性繁殖抑郁 (晚秋, 冬天) 操作 操作者的更换 常规操作者身上气味的变化 处理方式 寻求正确的解决方案: 排查繁殖障碍方法 确定问题: 怀孕还
11、是饲养? 查看生殖历史 雄性还是雌性的问题? 杂合/表型 问题? 排除环境干扰 尝试“调试”一些变量，看看是否会有影响 切记: 务必拥有正确的信息 背景品系 代次 健康状况 繁育者的纯合/杂合性 平均每窝产仔数 第一次交配时的日期和 年龄 最后一胎出生时的日期 和年龄 胎间隔 出生：离乳比 见栓：怀孕比 怀孕观察 遗传检测结果的评估(孟德 尔比例和性别分布) 表型问题? 可能的解决方案 重新配对 改变背景品系 改变交配体系 外源激素治疗 代乳 净化 胚胎移植 其他辅助的生殖技术 达成生产目标 形成自己的繁殖规划 1. 明确繁殖种群的目的 供应雌鼠用于胚胎收集 繁殖种鼠或嵌合体 制作一个特定的模
12、型 小规模或大规模生产以提供实验动物 后备种群 形成自己的繁殖规划 2. 明确繁殖种群的目标 特定时间内需要的动物数量 所需动物的具体特征: 性别 年龄范围 基因型 牢记: 生产特征 背景品系 生殖能力 (怀孕率) 每胎产仔数 纯合子 x 纯合子交配 需要多少只雌性种鼠? 每隔一周20只雄鼠 = 10只雄鼠 / 周 假定后代等性别比例出生, 但是只需要一个性别 每周需要生产2倍的仔鼠 仔鼠数 / 周 = 雌性种鼠数量x P.I. 20 = 雌性繁育者个数 x 0.5 受孕率 = 80% 20 = 雌性种鼠数量x 0.5 x 0.8 注意: 如果 杂合子x 杂合子交配, 则需要现有雌性种鼠数量的4倍 (200只雌性种鼠) 如果杂合子 x 纯合子交配, 则需要现有雌性种鼠数量的2倍 (100只雌性种鼠) 雌性种鼠数量= 20 / 0.5 / 0.8 = 50 总结 小鼠品系不同，繁殖性能也会不同 维持准确的繁殖记录和明确影响繁殖性能的因素非 常重要 当排查繁殖障碍时, 看看整个小鼠的状态和它的生 存环境 明确每个种群的生产目标 当不容易找到解决方案时要寻求帮助 谢谢!
