陕西中医学院学位论文独创性声明及使用授权声明 学位论文独创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工 作所取得的成果，无抄袭及编造行为除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论 文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果对本文的研究做出重要贡 献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢．奉人完全意识辫本声唠的法耷 结果并由本人所承担的法律责任． ，一 学位论文作者签名乏隧 日期：≯，≯年手月r 日 关于学位论文使用授权的声明 陕西中医学院有权保留使用本人学位论文，同意学院按规定向国家有关部门机构 送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅本人授权陕西中医学院可以将本学 位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印 手段保存和汇编本学位论文可以公布( 包括刊登) 论文的全部或部分内容 ( 保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名垒塑型垒日期：加，2 年牟月广日 论文导师签名辫日期： 勿，埤4 月／日 I _ 本论文以珠子参皂苷成分为研究对象，对其进行以下几个方面研究 首先，在前期实验研究的基础上，发现加热对珠子参皂苷成分有影响，为此，采 用化学水解、色谱技术对珠子参的主要活性部位一总皂苷进行化学成分分离，除人参 皂苷R 0 、竹节参皂苷Ⅳa 外，从中又得到姜状三七苷R l 、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 两 个主要皂苷成分，并按化学对照品的技术要求对其进行制备研究。
在此基础上，为全面、准确分析珠子参热转化( 加工炮制) 过程中成分变化规律 建立了H P L C 同时测定4 种成分分析方法结果发现人参皂苷R 0 、竹节参皂苷Ⅳa 的含量随时间的增加逐渐降低，而姜状三七苷R l 、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 的含量随 时间的增加逐渐升高提示，热处理会引起珠子参化学成分的转化，推测在珠子参总 皂苷的制备过程中经过提取．浓缩热处理会使姜状三七苷R 1 和去葡萄糖竹节参皂苷 Ⅳa 的含量升高 第三，皂苷化学转化机制研究：实验结果发现在酸水解条件下，珠子参总皂苷水 解产物以姜状三七苷R l 和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 为主要化学成分同时，还通过对 照品酸水解实验推测，姜状三七苷R l 和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 可能是人参皂苷R D 和竹节参皂苷Ⅳa 在酸水解的条件下去掉2 8 位葡萄糖的产物 最后，抗肿瘤作用和机制研究：采用体外实验M T T 法，检测不同浓度珠子参总 皂苷及去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 对人源H e p G 2 肝癌细胞、人源H T ．2 9 结肠癌细胞和 人源E C V - 3 0 4 血管内皮细胞体外增殖的抑制情况其次，还采用流式细胞术和 W | e s t e m - b l o t 技术探索珠子参皂苷对H e p G 2 细胞凋亡和周期，以及蛋白质表达的影响。
结果发现，珠子参总皂苷及去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 对上述3 种细胞均有显著抑制作 用，提示去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 可能是珠子参总皂苷中发挥抗肿瘤作用的主要化学 成分然而，珠子参经过合理、科学的热处理( 炮制) 可以提高抗肿瘤活性成分( 去 葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa ) 含量，从而增强了珠子参及珠子参总皂苷的抗肿瘤活性 关键词：珠子参；热转化；炮制机制；抗肿瘤作用； 0 1 ． j ～ S t u die so nt h e r m aIt r a n s f o r m a tio no fp r o c e s sin gm e c h a nis mo f R hlz o m aP a n a cisM a j o ris A b s t r a c t n l i sp a p e ra i m e dt 0s t u d yo nt o t a ls 印o I l i n so fR “z o m aP 锄∞i sM 旬o r i s 【尸绷甜 ／印D 刀把搬C ．A ．M e y ．V 缸M 萄o r ( B u d ( ) C ．YW U e tK ．M ．F e n 朗i I ls u c ha S p e c t sb e l o w ． F i r s t l y ，b 船i I 培0 nt 1 1 es t u d i e sp r e V i o u s l y ，w eh a 、，ef o u n dn l a th e a t i I 培p r o c e s sm a y1 1 a l v e e 能c t so n 龇s a p o l l i n so fR h i z o 嫩P 锄a c i sM 旬o r i s ．1 1 1 e r e f o r e ，m e t h o d so fc h e 嘶c a l h y d r o I y s i s 觚dc h r o m a t o 野a p M ct e c l l I l i q u ew e r eu s e dt 0s 印a r a t et l l e 廿l et o t a ls p o n i l l So f R I l i z o m aP a I l a c i sM 萄o r i s 嬲m a i l la c t i V es i t e ．W ．e ’V e g e tf o u rm a 缸S p o n i I l s ．T h e y 、Ⅳe r e G i n s e n o s i d eR 0 ，C 蛐【u s e t s us a p o n i n Ⅳ| a ，z i n g i b r o s i d e №锄dd e 9 1 u c o s e —c l l i l ( u s e t s u s 印0 1 1 i nr V 毛m e 锄w h i l e ，l 嬲tt w oc o m p o u n d sw e r eo b t a i n e df i r s 衄觚dw e r es t u d i e da S c h e m i c a lr e f e r e n c es u b s t a I l c ea c c o r d i I l gt 0r e l e v a n tt e c l l l l i c a lr e q u i r e m e n t s 如r t h e d y ． A n do n 也a tb a s i s ，i 1 1o r d e rt 0 锄a l y s i st 1 1 eV a r i a t i o no fc h e m i c a lc o n s t i t 眦n t si I l t l l e m a lc o I l 、他r S i o np r o c e s so fR I l i z o m aP a I l a c i sM 萄o r i s0 v e r a l la I l da c c 唧l t e l y ，、Ⅳeh a v e e s 切b l i s h e d 恤e x p e r i m e n t a lm e t l l o dt 0d e t e n I l i n em ef o u rs a p o n i l l sb y 肿L C 觚ds 砌i e d o n 位d i 旋r e n tp r o c e e dp r o d u c t So f 蹦z o mP 趾a c i sM 萄o r i s ．1 1 1 er e s u l t ss h o w e dt l l a t 恤 c o n t e n t so fG i n s e n o s i d eR oa n dC 础( u S e t s us 印。
血I v a 、Ⅳe r e 莎a d u a l l yd e c r e 嬲e d 鹊t l l e t i l l l ei n c r e 髂e d ，b u tn l ec o n t e n so fa n dd e g l u c o s e - c h i k u s e t S us 印0 1 1 i nI V ．aw e r eo p p o s i t e ． C o n s e q u e m l y ，m e s es u g g e s tt h a t 吐呛c h e m i c a Jc o m p o s i t i o no fR h i z o m aP 锄a c i sM 旬o r i s w i l l 衄l s f o r m e d 以e rl l e a t i n gp r o c e s s ．T h e nw ec o u l ds p e c u l a t et l l a tt h ef ．a b r i c a t i o n p r o c e s s e ss u c h 鹊e ) 【n 锄c t i o na n dc o n c e n 打a t i o nm a yi n c r e 嬲e 吐l ec o m e n t so fz i I l g i b r o s i d eR l a n dd e g l u c o s e c h “( u s e t s us a p o n i I lI v a ． Ⅲr d l y ，m es t u d yo nt h em e c h 枷S mo fc h e m i c a l 仃髓s f o m a t i o no fs 印。
血：也e e X p 硝m 朗t a lr e s u l t sf o u l l dn l a tz i n g i b r o s i d e №锄dd e g l u c o s e - c l 吐l ( 1 l s e t s us a p o l l i nI V a 袱I r c t l l em a i m yh y d r o l y s a t e so ft 1 1 et o t a ls 印o n i I lo fR I l i z o m aP a I l a c i sM 旬o r i su n d e rt h e 踮i d h y d r o l y s i sc o n d i t i o n s ．S i I T m l t a I l e o u s l y ，a n c rt l l es 锄ee x p e r i m e n to fc h e m i c a lr e f e r e r l c e s u b s t a I l c e ，、v ei n f e rt 1 1 a tz i n g i b r o s i d eR la n dd e g l u c o s e —c h i k u s e t S us a p o I l i nI v ac o u l db et l l e a C i d l l y ( h o l y s i sp r o d u c t So fG i n s e n o s i d eR 0a 1 1 dC l l i l 【u S e t s us a p o m nI v ab y 2 8 一p o s i t i o n - g l u c o s ew e r e ￡l b s c i s e d ． F i n a l l y ，血es t u d yo n 也ee 位c ta n dm e c h a n j s mo f 觚t i t 哪o r ：D i 疏r e mc o n c e n 仃a t i o n o ft o t a ls 印o n i I lo fR h i z o m aP a n a c i sM 句o r i s 觚dd e g l u C o s e - c 础k u s e t s us 印o n i n Ⅳr a ．、Ⅳe r c i n S p e c t e dt h r o u g I l。