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1、 学号：2006010052 姓名：董小卫 联系电话：18653159101 Email：dongxiaowei1972 学院：生命科学学院 山 东 师 范 大 学 博 士 学 位 论 文 单位代码 10445 学 号 2006010052 分 类 号 Q78 山东师范大学山东师范大学 博博 士士 学学 位位 论论 文文 论文题目论文题目 利用木霉和利用木霉和 RNAi 技术技术 提高提高烟草烟草抗性和品质抗性和品质的研究的研究 学科专业名称 植物学 申 请 人 姓 名 董小卫 导 师 姓 名 毕玉平 研究员 论文提交时间 2010 年 03 月 27 日 独 创 声 明 本人声明所呈交的学位
2、论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得 （注：如 没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材 料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明 并表示谢意。 学位论文作者签名： 导师签字： 学位论文版权使用授权书学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 学校学校 有关保留、使用学位论文的规定，有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。 本人授权 学校学校 可以将学位论文的全部或
3、部分内容编入有关数据库进行检索， 可 以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 （保密的学位论文在 解密后适用本授权书） 学位论文作者签名： 导师签字： 签字日期：2010 年 月 日 签字日期：2010 年 月 日 山 东 师 范 大 学 博 士 学 位 论 文 i 目 录 中文摘要中文摘要 ix ABSTRACTxi 符号说明符号说明 xiV 第一章第一章 研究工作背景研究工作背景 1 1 烟草主要病毒病烟草主要病毒病 1 1.1 烟草普通花叶病 1 1.2 烟草黄瓜黄叶病 3 1.3 烟草马铃薯 Y 病 3 2 烟草病毒病防治中存在的主要问题烟草病毒病防治中存在的主要问题4
4、3 烟草病毒病的防治烟草病毒病的防治状况和研究进展状况和研究进展4 3.1 抗病品种5 3.1.1 选种5 3.1.2 杂交育种5 3.1.3 突变育种5 3.1.4 转基因5 3.1.4.1 利用非病毒来源基因介导的抗病性 5 3.1.4.2 病毒来源的基因6 3.2 栽培措施12 3.2.1 合理布局烟田12 3.2.2 合理轮作12 3.2.3 搞好田间卫生12 3.2.4 培育无病壮苗13 3.2.5 科学施肥13 3.2.6 科学移栽13 3.2.7 加强田间管理13 3.2.8 控制传毒介体13 山 东 师 范 大 学 博 士 学 位 论 文 ii 3.3 施用抗病毒药剂13 3.
5、3.1 植物提取药剂14 3.3.2 动物产生药剂14 3.3.3 微生物产生药剂15 3.3.4 人工合成药剂15 3.3.4.1 有机酸类15 3.3.4.2 核苷、嘌呤、嘧啶类衍生物16 3.3.4.3 DHT 类化合物16 3.3.4.4 (硫)脲类化合物17 3.3.4.5 杂环化合物17 3.3.4.6 其他17 3.4 利用弱毒株系(脱毒疫苗)防治18 3.5 脱毒技术18 3.5.1 茎尖分生组织脱毒技术18 3.5.2 热处理脱毒技术19 3.5.3 茎尖培养和热处理相结合19 4 木霉生物防治的研究进展木霉生物防治的研究进展19 4.1 抗生作用20 4.2 重寄生作用20
6、 4.3 溶菌作用21 4.4 毒性蛋白21 4.5 竞争作用21 4.6 诱导抗性21 4.7 促进植物生长22 4.8 Peptaibols22 5 RNAi 技术的研究进展技术的研究进展22 第二章第二章 木霉防治烟草病毒病研究木霉防治烟草病毒病研究27 1 材料与方法材料与方法29 山 东 师 范 大 学 博 士 学 位 论 文 iii 1.1 康宁霉素 CD 光谱特征研究的材料方法29 1.1.1 康宁霉素 CD 光谱特征研究试剂29 1.1.2 康宁霉素 CD 光谱特征研究主要仪器29 1.1.3 CD 光谱的测定29 1.1.4 TFE 浓度对 Trichokonin VI 结构
7、的影响29 1.1.5 Trichokonin VI 浓度对其结构的影响29 1.1.6 膜拟态环境对 Trichokonin VI 结构的影响30 1.2 木霉孢子体外钝化 TMV30 1.2.1 木霉孢子体外钝化 TMV 材料30 1.2.2 木霉孢子体外钝化 TMV 方法30 1.3 木霉孢子处理 TMV 电镜照片30 1.4 康宁霉素体外钝化 TMV31 1.4.1 康宁霉素体外钝化 TMV 材料31 1.4.2 康宁霉素体外钝化 TMV 方法31 1.5 康宁霉素体外钝化 TMV 电镜照片材料与方法31 1.5.1 康宁霉素体外钝化 TMV 电镜照片材料31 1.5.2 康宁霉素体外
8、钝化 TMV 电镜照片方法31 1.6 木霉孢子抑制 TMV 积累的材料方法32 1.6.1 木霉孢子抑制 TMV 积累的材料32 1.6.2 木霉孢子抑制 TMV 积累的方法32 1.6.3 木霉孢子抑制 TMV 积累的 real time quantitative PCR 反应32 1.7 木霉孢子抑制 TMV 复制的材料方法33 1.7.1 木霉孢子抑制 TMV 复制的材料33 1.7.2 木霉孢子抑制 TMV 复制的方法33 1.8 康宁霉素抑制材料 TMV 复制的材料方法33 1.8.1 康宁霉素抑制材料 TMV 复制的材料33 1.8.2 康宁霉素抑制材料 TMV 复制的方法34
9、1.9 木霉孢子诱导烟草抗性材料方法34 1.9.1 木霉孢子诱导枯斑三生抗性34 山 东 师 范 大 学 博 士 学 位 论 文 iv 1.9.1.1 木霉孢子诱导枯斑三生抗性材料34 1.9.1.2 木霉孢子诱导枯斑三生抗性方法34 1.9.2 木霉孢子诱导 NC89 抗性材料方法34 1.9.2.1 木霉孢子对 NC89 的促生防病作用材料34 1.9.2.2 木霉孢子对 NC89 的促生防病作用方法35 1.9.3. 木霉孢子诱导烟株防御酶活性材料方法35 1.9.3.1 木霉孢子诱导烟株防御酶活性材料36 1.9.3.2 木霉孢子诱导烟株防御酶活性测定方法36 1.10 康宁霉素诱导烟草抗性材料方法36 1.10.1 康宁霉素诱导枯斑三生抗性材料方法37 1.10.1.1 康宁霉素诱导枯斑三生抗性材料37 1.10.1.2 康宁霉素诱导枯斑三生抗性方法37 1.10.2 康宁霉素诱导 NC89 抗性材料方法37 1.10.2.1 康宁霉素诱导 NC89 材料37 1.10.2.2 康宁霉素诱导 NC89 方法37 1.10.3 康宁霉素诱导烟株防御酶活性材料方法37 1.10.3.1 康宁霉素诱导烟株防御酶活性材料37 1.10.3.2 康宁霉素诱导烟株防御酶活性方法38 1.11 木霉孢子和康宁霉素治疗效果对
