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1、分类号密级 _ l830 65 8 华中农业大学硕士学位论文 基于S S R 、IS S R 和R A P D 对大豆疫霉菌的 遗传多样性研究 A n a l y s i so fG e n e t i cD i v e r s i t y o f P h y t o p h t h o r as o j a eb a s e do nS S R 、I S S R a n dR A P Dm a k e r s 研究生：刘敏 指导教师：黄俊斌教授 朱振东研究员 专业：植物病理学 获得学位名称：农学硕士 研究方向：植物病害 获得学位时间：2 0 1 0 年6 月 华中农业大学植物科学技术学院 二
2、O o 年六月 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 否如需保密，解密时间年月日 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位 或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究 所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：毒l 锨 时间： 知p 年占月r 日 学位论文使用授权书 本人完全了解“华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定”，即学
3、生必须按 照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和 电子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、 汇编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学 黼鲐训镦 撇名：钛、斌 签名日期： 2 t ，f 眸6 月j 日签名日期：? 一f 驴年舌月日 注：请将本表直接装订在学位论文的靡页和目录之间 基于S S R 、I S S R 和R A N ) 对大豆疫霉菌的遗传多样性研究 目录 摘要I A b s t r a c t I 第一章文献综述1 1 1 大豆疫霉根腐病的概况”l 1 1 1 大豆疫霉根腐病的发生1 1
4、 1 2 病害症状2 1 1 3 发病规律2 1 2 大豆疫霉根腐病的病原”3 1 2 1 大豆疫霉的分类地位3 1 2 2 大豆疫霉的形态4 1 2 3 大豆疫霉的生物学特性5 1 2 4 大豆疫霉菌的检测与分离方法5 1 2 4 1 大豆疫霉的检测”5 1 2 4 2 大豆疫霉菌的分离“6 1 2 5 大豆疫霉基因组学研究概况8 1 2 6 大豆疫霉的生理分化9 1 2 7 大豆疫霉生理小种的鉴定方法1 0 1 2 8 病原菌群体遗传多样性1 0 1 2 8 1 遗传多样性的概念1 0 1 2 8 2 遗传多样性产生的原因1 1 1 2 9 植物病原菌群体遗传多样性的研究方法及应用1 2
5、1 2 9 1 形态学标记1 2 1 2 9 2 细胞学标记l3 1 2 9 3 同工酶标记1 3 1 2 9 4 蛋白质标记1 3 1 2 9 5 基于D N A 多态性的分子标记1 4 华中农业大学2 0 1 0 届硕士研究生学位论文 1 3 大豆疫霉的遗传多样性研究1 8 1 4 研究目的与意义l8 第二章大豆疫霉的毒力鉴定2 0 2 1 材料和方法2 0 2 1 1 试验材料2 0 2 1 1 1 鉴别寄主2 0 2 1 1 2 供试菌株2 0 2 1 2 方法2 2 2 1 2 1 培养基制备”2 2 2 1 2 2 接种体制备一2 2 2 1 2 3 大豆植株培养“2 2 2 1
6、2 4 接种2 2 2 1 3 病情调查及抗性评价”2 2 2 1 4 毒力遗传多样性聚类分析”2 2 2 2 结果与分析2 3 2 2 1 毒力鉴定2 3 2 2 2 分离物的地理来源与毒力特征的关系2 4 2 2 3 同一地区不同菌株的差异比较2 7 2 2 4 大豆疫霉菌在不同地区的毒力分布“3 0 3 3 讨论3 0 第三章基于S S R 标记的遗传多样性分析3 2 3 1 材料与方法3 2 3 1 1 试验材料3 2 3 1 1 1 主要的仪器设备：”3 2 3 1 1 2 主要试剂3 2 3 1 1 3 供试菌株”3 2 3 1 1 4 培养基3 2 3 1 1 5S S R 引物
7、3 3 3 1 2 实验方法一3 4 基于S S R 、I S S R 和R A P D 对大豆疫霉菌的遗传多样性研究 3 1 2 1 大豆疫霉培养及菌丝体收集3 4 3 1 2 2D N A 的提取3 4 3 1 2 3P C R 扩增3 5 3 1 2 4S S R 扩增产物的琼脂糖检测3 6 3 1 2 5I S S R 扩增产物的银染检测3 6 3 1 2 6 数据统计与分析3 7 3 2 结果与分析3 8 3 2 1 基因组D N A 的提取3 8 3 2 2 不同地理来源大豆疫霉的遗传多样性3 8 3 2 3 不同地理来源大豆疫霉的遗传相似性3 9 3 2 4 基于S S R 的大
8、豆疫霉遗传多样性分析“4 0 3 2 5 供试菌株地理来源与S S R 标记的关系“4 1 3 2 6 基于S S R 技术的遗传分组与毒力类型的关系4 2 3 3 讨论4 4 第四章基于I S S R 标记的遗传多样性分析4 5 4 1 试验材料4 5 4 1 1 主要的仪器设备”4 5 4 1 2 主要试剂4 5 4 1 3 供 式D N A 4 5 4 1 4I S S R 引物! 一4 5 ： 4 1 5P C R 扩增”4 6 4 1 6I S S R 扩增产物的琼脂糖检测”4 7 4 1 7 扩增产物数据处理4 7 4 2 结果与分析4 7 4 2 1 不同地理来源大豆疫霉的遗传多
9、样性4 7 4 2 2 不同地理来源大豆疫霉的遗传相似性4 9 4 2 3 基于I S S R 的大豆疫霉遗传多样性分析5 0 4 2 3 1 供试菌株地理分布与I S S R 标记的关系5 l 4 3 讨论”5 2 华中农业大学2 0 1 0 届硕士研究生学位论文 第五章基于R A P D 标记的遗传多样性分析5 3 5 1 试验材料5 3 5 1 t 主要的仪器设备5 3 5 1 2 主要试剂”5 3 5 1 3 供试D N A 及R A P D 引物”5 3 5 1 3P C R 扩增5 4 5 1 4R A P D 扩增产物的琼脂糖检测5 5 5 1 5 扩增产物数据处理5 5 5 2 结果与分析5 6 5 2 1 不同地理来源大豆疫霉的遗传多样性一5 6 5 2 2 不同地理来源大豆疫霉的遗
