《动物营养研究方法讲述》由会员分享，可在线阅读，更多相关《动物营养研究方法讲述（77页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第十章 动物营养研究方法 内 容 第一节 化学分析法 第二节 消化实验 第三节 代谢试验 第四节 平衡实验 第五节 饲养实验 第六节 化学预测法 第一节 化学分析法 一、营养物质的分析 三、动物组织和血液理化成分分析 二、抗营养因子分析 作用：为判定动物营养状况、动物营养需要和饲料 的营养价值提供基础数据。 分类：营养物质的分析、抗营养因子分析及动物组 织和血液理化成分分析。 一、营养物质的分析 概念：应用物理、化学原理和方法对饲料、动 物组织及动物排泄物的某些成分，进行定性、定 量分析。 (1)水分 (2)粗蛋白（CP）真蛋白(TP) (3)粗脂肪（EE） (4)粗纤维（CF） (5)粗灰分
2、 (6)无氮浸出物（NFE） 1、概略养分分析 一、营养物质的分析 （1）维生素 （2）矿物质 （3）微量元素 （4）氨基酸 （5）脂肪酸 （6）纯蛋白质 （7）糖等 2、纯养分分析 一、营养物质的分析 (1)饲料 (2)排泄物（粪、尿、呼出气、皮屑等） (3)动物组织 (4)血液 (5)整体动物 3、分析对象 一、营养物质的分析 (1)称量法 (2)比色法 (3)滴定法 (4)原子吸收法 (5)色谱法 (6)荧光法 (7)电泳 (8)分子生物技术 4、分析方法 一、营养物质的分析 二、抗营养因子分析 抗营养因子是指饲料中本身所有或从 外界进入，影响饲料营养价值和动物生长 的物质。 1、概念
3、（1）影响蛋白质消化 蛋白酶抑制剂、凝集素、皂苷、多酚化合物等 （2）影响矿物元素利用 植酸、草酸、葡萄糖硫苷、棉酚 （3）影响维生素利用 双香豆素、抗维生素B族因子等 2、种类 二、抗营养因子分析 （4）影响碳水化合物利用 （5）刺激免疫系统的抗营养因子 如:抗原蛋白 （6）综合性抗营养因子 如:水溶性非淀粉多糖。 二、抗营养因子分析 分析饲料中抗营养因子的种类和含量，可 指导饲料的合理加工、利用、贮存，如通过 加热可提高豆类籽实的营养价值。 3、意义 二、抗营养因子分析 (1)酶法 (2)比色法 (3)滴定法 (4)原子吸收法 (5)色谱法 (6)荧光法 4、分析方法 二、抗营养因子分析
4、三、动物组织血液理化成分分析 （1）动物组织和血液中各种营养物质； （2）动物组织和血液中与营养物质有关的功 能酶或相关酶； （3）动物动物组织和血液中某些代谢中间产 物或最终产物。 1、分析对象 （1）概略养分或纯养分； （2）营养物质代谢产物； （3）相关标识功能酶，如硒血浆谷胱甘肽 过氧化物酶、锌血清碱性磷酸酶、铜血浆 铜蓝蛋白氧化酶和血浆尿素氮等。 2、分析内容 三、动物组织血液理化成分分析 第二节节 消化实验实验 一、 消化试验概念与目的 四、尼龙袋法 三、 体外消化试验 二、 体内消化试验 以测定动物对饲料养分的消化能力或饲 料养分的可消化性为目的的试验。 2、目的： 准确地量化饲
5、料中 各种养分被动物消化利 用的程度 ，也是评定饲料营养价值的重要方法 。 3、种类 一、消化试验概念与目的 1、概念： 体内（in vivo） 消化实验 离体（in vitro）消 化实验 尼龙袋法(nylon bags technique) 全收粪法 指示剂法 消化道消化液人工消化液 肛门收粪内源指示剂外源指示剂 消化实验 体内（in vivo） 消化实验 离体（in vitro）消 化实验 尼龙袋法(nylon bags technique) 全收粪法 指示剂法 消化道消化液人工消化液 肛门收粪回肠收粪内源指示剂外源指示剂 消化实验方法剖析 粪中养分组成： 饲料中未消化的养分; 消化道分
6、泌物; 消化道脱落细胞; 消化道微生物及其代谢产物。 4. 消化率计算公式 表观消化率= （食入养分 - 粪中养分） 食入养分 X 100% 一、消化试验概念与目的 真消化率= 食入养分 -（粪中养分-内养分） 食入养分 X100% 一、消化试验概念与目的 食入饲料总能 - 粪中总能 食入饲料总量 （kg） 表观消化能 (MJ/kg) 食入总能 - （粪中总能-内源能） 食入饲料总量（kg） 真消化能 (MJ/kg) 消化能 一、消化试验概念与目的 二、 体内消化实验 1、根据其收粪方式可分为： （1）全收粪法； （2）部分收粪法（指示剂法） 2、全收粪法根据收粪的部位不同又分为： （1）肛门
7、收粪法； （2）回肠末端收粪法 3、指示剂法也可分为： （1）内源指示剂法；（2）外源指示剂法。 (1)全收粪法 1）优点：试验操作方便、测定较准确； 2）缺点：排泄物污染严重； 采食量、排粪量难以准确记录； 粪中养分含量受环境影响大； 工作量大。 二、 体内消化实验 (2)指示剂法 1）对指示剂的要求 不能被动物消化吸收 在饲料中、粪便中能均匀分布 有很高的回收率 对动物没有毒副作用 2）种类 外源指示剂饲料本身不含，人为加入饲料中的指示物 质，一般多用Cr2O3; 内源指示剂饲料本身含有，不能被动物消化吸收但可 以测定的成分，多用酸性不容灰分（AIA acid insoluble ash
8、）2mol 或4mol HCl 不溶 二、 体内消化实验 4）缺点：指示剂回收率对消化率影响较大，并且 很难找到回收率很理想的指示物质：分析困难， 较难获得重复性高的测定数据；与全收粪法最后 的缺点相同。 3） 优点：在于减少收集全部粪便带来的麻烦， 省时省力，尤其是在收集全部粪便较困难时。 二、 体内消化实验 5）消化率的计算 原理：食入指示剂量=排出指示剂量 饲粮指示剂含量粪中养分含量 粪中指示剂含量饲粮养分含量 100-100 养分消化 率（%） = 二、 体内消化实验 （3）回肠末端 消化率测定 1）T型瘘管 优点：安瘘管后对荷 术动物生理影响小； 缺点：必须用指示剂 ，因不可能收集全
9、部粪尿，由 此取样缺乏代表性，而且较麻 烦。 图1、T型瘘管示意图 二、 体内消化实验 优点：收粪简便，而且可收集全部粪样； 缺点：手术复杂、成功率低和护理相对麻烦。 4）回-直肠吻合术 回直肠吻合术 图3 二、 体内消化实验 图 可移动的回-盲瘘管术 优点：手术简单，荷术动物生理影响小； 缺点：仍需要指示剂。 6）屠宰法 7）盲肠切除法 （家禽） 5）可移动的回-盲瘘管术 二、 体内消化实验 代谢笼中装了瘘管的猪 二、 体内消化实验 (4)单一原料消化率测定 1）被测饲料作为全部饲粮 优点：简单，不需要测定参考饲粮，无养分互作的干扰； 缺点：某些饲料适口性差，时间长后可能导致营养缺乏症 。
10、2）被测饲料替代标准饲料法 优点：克服方法1的缺点； 缺点：标准饲料的质量规格很难在各种条件下保持一致 ，养分间互作也影响测定结果。 二、 体内消化实验 原理：被测料替代实际基础饲料的一部分，分别 测定基础饲粮和替代后饲粮的养分。 优点：克服方法2中的参考饲粮或标准饲料的养分 变化造成的影响，而且克服养分不平衡的影响。 缺点：基础饲粮营养平衡，则代入被测饲料后可 能出现不平衡。 3）饲料替代法 二、 体内消化实验 饲料替代法消化率计算公式： 消化率(%)= 测试日粮可消化物量-测试日粮中基础可消化物量 被测饲料顶替基础日粮的量 二、 体内消化实验 1、动物选择 2、日粮配制 3、实验步骤 （1
11、）预试期：适应环境、摸清采食量、排粪规律 （2）正试期：记录采食量、收集排粪 时 间：单胃动物：5-10天； 反刍动物：7-14天 基本步骤与要求 二、 体内消化实验 预备实验期 正式实验期 牛、羊 10-14天 10-14天 马 7-10天 8-10天 猪 5-10天 6-10天 家禽* 3-5 天 4-5 天 表 不同种类的动物的实验期规定 *一般是进行代谢实验，采用强饲法，实验期为1-2天。 二、 体内消化实验 4、粪的收集和处理 （1）收粪方法：专用消化柜或消化栏、动物肛 门上套收粪袋 （2）粪样处理 1）全粪法：收集全部粪便 2）指示剂法：每天定时收粪 粪样称重，混匀，按总重的1/1
12、0-1/50取 样，加硫酸和甲苯，固氮防腐。 二、 体内消化实验 5、养分消化率和消化能测定 （1）消化率的测定 1）饲粮：直接测定 例1 ：测定仔猪饲粮CP消化率 日采食量：1000g， 饲粮CP含量：16% 日排粪量：250g， 粪中CP含量：12% CP消化率= ( 100016%-25012%） （100016%） 100 = 81.2% 二、 体内消化实验 例 2: 某饲粮消化实验结果如下,计算CF消化率 饲料CF含量:40% 粪中CF含量: 40% 饲料指示剂添加量:3% 粪中指示剂含量:6% CF消化率= 100 3 6 40 40 100 = 50 二、 体内消化实验 第一次：
13、测定基础饲粮养分消化率 第二次：测定新饲粮养分消化率 为减少动物的影响，用二组动物同时实验 新饲粮组成：70-85%基础饲粮+15-30% 被测饲料 2）饲料原料：间接测定 二次消化实验 二、 体内消化实验 D() 100(A-B) / F B 式中：D为被测饲料养分消化率 A为基础饲粮养分消化率 B为新饲粮养分消化率 F为被测饲料养分占新饲粮该养分的比例。 二、 体内消化实验 第一组 第二组 第一次 消化实验 基础日粮 预饲期 实验期 基础日粮 + 被测饲料 57天过渡期 第二次 消化实验 基础日粮 + 被测饲料 实验期 基础日粮 交叉实验步骤示意 二、 体内消化实验 原理：假定基础饲粮养分
14、消化率不变； 养分间无互作效应。 新饲粮中被测饲料的比例很重要 间接法优缺点 二、 体内消化实验 1）直接测定 ：根据消化试验结果和结合能 值测定进行 DE = （GE - FE）/采食量（kg） （2）消化能的测定 二、 体内消化实验 饲料消化能 = （33.47-8.34）/2 =12.57（兆焦/Kg） 例如：体重50Kg的猪，每日食入日粮2Kg，含总 能33.47兆焦耳，每日排粪中的总能为8.34兆焦耳 ，计算其采食饲料的的消化能。 二、 体内消化实验 根据每日食入的可消化粗蛋白质（X1 ）、可消 化粗脂肪（X2）、可消化粗纤维（X3）、可消化无 氮浸出物（X4）的量（克），用下列回归公式计算 每日食入饲料的消化能（Y千焦）。 2）间接推算： 二、 体内消化实验 Y（绵羊）=23.93X1 +37.87X2+18.33X3 +16.99X43.77% Y（猪）=24.18X1 +39.41X2+18.41X3 +17.03X4 4.18% Y（牛）=24.23X1 +34.10X2+18.49X3 +16.99X4 4.18% 二、 体内消化实验 2、优点：操作方便，环境条件、处理方法和时间 易控制，更容易标准化。 3、缺点：与动物的生理系列化过程有一定的差异 。 4、分类：消化道消化液法和人工消
