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1、实验诊断学概论 周有利 武汉科技大学临床学院 教学主要内容 实验诊断学的基本概念 实验诊断学的主要内容及应用范围 实验诊断学的现状及进展 实验诊断的临床应用与评价 学习实验诊断学的要求 标本的采集与处理 教学目的 1. 熟悉实验诊断学的定义及工作范围，了解实验诊断 学发展现状及未来。 2. 掌握临床思维方式，运用实验诊断，为临床服务. 3. 掌握诊断性实验的选择与评价，更好利用实验源。 一、实验诊断学的基本概念 分析综合推理判断 得出结论 （疾病诊断） 获取人体资料 诊断： 病史采集 体格检查 实验室及其他检查 一、实验诊断学的基本概念 （一）基本概念： 实验诊断（ Laboratory Di
2、agnosis ）:是指医生 的医嘱通过临床实验室分析所得到的信息为疾病的 预防、诊断、治疗和预后评价所应用的医学临床活 动。 实验实验/ /检验医学检验医学(Laboratory Medicine(Laboratory Medicine）: : 通过试剂、仪通过试剂、仪 器、技术等进行检测，并对检测的过程进行全面器、技术等进行检测，并对检测的过程进行全面 的质量控制，最终得到可靠的检测结果或数据。的质量控制，最终得到可靠的检测结果或数据。 （二）（二） 实验诊断学与实验医学实验诊断学与实验医学 实验诊断学（ Laboratory Diagnosis ）: 以检验 结果的临床应用为目的。 实验
3、/检验医学(Laboratory Medicine）:以实验 方法的研究和改进为目的 （三）实验诊断学的主要内容 临床血液学检验 体液与排泄物检验 生物化学检验 免疫学检验 病原体检查 医学实验室 血液实验室 体液实验室 生化实验室 病原微生物室 免疫实验室 （四） 实验诊断学的应用范围 临床医疗 疾病的诊断和鉴别诊断 疗效观察和预后判断 疾病预防 社会普查 健康咨询 科学研究 （五）实验诊断学的现状及进展 1、自动化、微量化、信息化 2、方法和仪器的改善 如床旁检测 （Point of care testing，POCT) 3、个体化诊断 4、实验室管理的完善 实验室的认可 （Lab. Ac
4、creditation） 循证实验医学 （Evidence-Based Lab. Med.） 质量管理和质量改进 （Total IQC System EQA System） 二、实验诊断的影响因素和质量体系 生物因素 干扰因素 分析前的可变因素 标本采集、运送错误 分析前的可变因素生物因素 固定生物因素 年龄、性别、种族、遗传等 可变生物因素： 生理节律、季节、月经周期、妊娠、生活 方式、饮食、运动、情绪、体位 饮食 n标准餐后：TG增高50、Glu增高15 n高蛋白或高核酸食物：BUN、UA n高脂肪食物： TG ，血清常出现乳糜状 n咖啡： AST、ALT、ALP、TSH等 n桃、杏、香焦
5、等： 尿VMA n空腹超过14h：胆红素 分析前的可变因素生物因素 运动 适量的运动： GLU、Cr、UA、AST、LD、CK、BUN pH、pCO2、TC、TG 剧烈运动： CK、ALT、AST、Cr 、 BUN、氯化物 Alb、Bli、Fe、K、Na 分析前的可变因素生物因素 K+- 11 ALT41- AST31- ACP11- Alb-4 Cr17- UA12- TP3- 增高（%） 降低（%）项目 可变生物因素：运动 情绪 应激状态： 葡萄糖、 5-羟色胺、儿茶酚胺、皮 质醇皆可升高。 分析前的可变因素生物因素 卧位变立位对血清一些物质的影响 项目增高（%） ALT7 AST5 TG
6、6 Amy6 Alb9 分析前的可变因素生物因素 分析前的可变因素干扰因素 n引起被测物浓 度改变的因素 如溶血、标本放置时间长、 血清与血浆的差异 n干扰分析反应 溶血、脂血、胆红素血 n内源性物质治疗性药物及其代谢产物、 输液等 n外源性物质如抗凝剂、防腐剂、污染等 干扰因素：溶血 项 目溶血标本正常标本变化率% K8.74.689.1 Na 112138-18.8 Cl1061014.95 ALT4521114.3 AST12040200 LDH356013701.8 GLU4.53.050 BUN3.43.013.3 CK1075.01207.7 干扰因素：血清和血浆的差异 无差异AL
7、T、Bil、Ca、CK、pCO2、尿素 血清血浆白蛋白、ALP、Glu、UA、 Na、磷酸 盐、蛋白质 血清血浆醛固酮、AST、Cu、Hb、K、LD、 ACP 干扰因素：血清和血浆的差异 项目 放置（未离心）未放置（离心） 血浆血清血浆血清 Glu OGTT 1h 12.96 3h 18.57 12.19 17.36 12.98 18.60 13.00 18.10 实验的提示： 血浆的值更接近真实值 项目全血血浆血清 K+3.43.43.9 全血： 室温下葡萄糖每小时下降6%； 25存放1.5h，血浆钾升高0.2mmol/L， 4存放4h，血浆钾升高2mmol/L 干扰因素：标本放置时间的影响
8、 干扰因素：脂血 n 被分析物分布非均一性; n 血清/血浆中水分被取代; n 对吸光度的干扰; n 物理化学机制的干扰：如标本中的脂蛋白 可整合亲脂成分,降低与抗体的结合,并影响 电泳和层析. 对TC、TG、GLU、 UA、 BUN、 Cre、Mg产生明显的负干扰 干扰因素：胆红素 干扰因素：药物 所有药物都会对病人的某些检测项目的结果产 生或大或小的影响，它是通过以下途径发生的 ： n对生理病理过程产生影响 n药物的毒副作用 n对测定方法产生影响 推荐标本类型及抗凝剂 n 推荐 ：满足95的实验室检查 n 临床化学检查：使用肝素抗凝血：34ml n 血液病学检查：23ml EDTA抗凝血
9、n 凝血功能实验：23ml枸橼酸盐抗凝血 n 免疫测定（含蛋白质等）：1ml全血完成34项免疫测定 n 红细胞沉降率：23ml枸橼酸盐抗凝血 n 血气：毛细血管采样量50l，动脉、静脉采样量1ml肝素抗凝 血 标本的采集与运送常见错误 n使用污染了的玻璃器皿 n抗凝剂、防腐剂使用不正确 n标本标识错误、张冠李戴 n不正确患者准备活动 n静脉穿刺不顺利、长时间使用止血带 n标本量不够 标本的采集与运送常见错误 n标本未及时送至实验室 n该使用培养液（基）时未使用 n该冷藏（或用冰）时未冷藏 n该密封时未密封 n不完整的标本收集 n从输液处采集标本 样品外观若观察到相应的颜色或浑浊度 ，如溶血、黄
10、疸、乳白色、浑浊或脂血都 应在报告上标注 报告结果：应标注样品外观 质量保证体系 分析前质量控制 分析中质量控制 分析后质量控制 实验结果的分析： 影响因素: 误差的来源: 试验数据的变异及允许误差： 四、实验诊断的临床应用与评价 （一）正确选择实验实验室检查项目 选择灵敏度高和特异性强的检验项目 明确选择实验的目的 选择适合的实验项目 诊断目的的实验选择 为了排除某种疾病的诊断选灵敏度高的实验。 为了确诊某种疾病的诊断选特异性高的实验。 以发现某种疾病的病例为目的灵敏度高的实验 不希望出现假阳性结果为目的特异性高的实验 （二）常用诊断性实验的评价指标 诊断灵敏度 诊断特异性 诊断准确度 预示
11、值 预示值 诊断性试验检测的全部阳性例数中“有病”患者所占的 比例为阳性预示值（positive predictive value） 诊断性试验检测的全部阴性例数中“无病”患者所占的 比例为阴性预示值（negative predictive value）。 （三） ROC曲线的临床应用 特异性高、阳性预示值高的试验，得 到阳性试验结果可以肯定有病，但阴性结 果不能排除有病的可能。 灵敏度高、阴性预示值高的试验，得 到阳性试验结果不能肯定有病的诊断，但 阴性结果可以排除有病的诊断。 四、实验诊断的参考范围与医学决定水平四、实验诊断的参考范围与医学决定水平 （一）（一）参考范围参考范围 参考人群的
12、确定参考人群的确定 参考范围的确定参考范围的确定 正常人正常人 病人病人 假阳性假阳性 假阴性假阴性 （二）医学决定水平（二）医学决定水平 医学决定水平（Medicine decide level ，MDL）不 同于参考值。指测定值是否高于或低于这些限值， 可在疾病诊断中起排除或确认的作用，或对某些疾 病进行分级或分类，或对预后作出估计，以提示医 师在临床上应采取何种处理方式，如进一步进行某 一方面的检查，或决定采取某种治疗措施等。 参考值 （410）109/L 医学决定水平： 低于0.5109/L ，病人有高度易感染性 低于3109/L，为白细胞减少症 高于11109/L ，为白细胞增多，应
13、查找原因。 高于30109/L ，提示可能为白血病，应进行白细胞 分类，观察外周血涂片和进行骨髓检查。 （二）医学决定水平（二）医学决定水平 （三）危急值 “危急值”是表示危及生命的检验结果，即当这种检 验结果出现时，患者可能正处于危险的边缘状态， 医生必须给予患者有效的干预措施或治疗，否则就 有可能出现严重后果，失去最佳抢救机会。如： 血清钾2.5 mmolL或6.0 mmolL 血清葡萄糖 成人2.5mmolL或38 mmolL 新生儿1.6mmolL或16.6 mmolL 实验选择和结果分析应考虑的问题： 1）检查的目的是什么？哪些项目最适合？ 2）实验的特性（敏感性、特异性、准确性等）
14、 和参考范围？ 3）各种疾病中实验结果的频率分布？ 4）阳性结果确定诊断和阴性结果排除诊断的 概率是多少？ 5）检查对患者的利弊及安全性如何？ 6）成本效应分析？ 临床医生与实验室的联系： 临床医生：了解实验检测方法，利于结果评价 提高实验可利用性 接受实验室咨询 实验工作人员:了解临床进行实验目的 选择最佳检测方法和检测项目 提供实验室咨询 五、学习实验诊断学的要求 掌握：检验项目的选择，常用检验的临床意义 学会：临床思维，进行实验的评价及结果分析 熟悉：标本的采集和处理以及实验的影响因素 了解：检验项目的方法、原理 注意：全面分析、动态观察 六、标本的采集与处理(自学内容) 血液标本：采血部位及采血时间 标本采集后的处理
