分子生物学3.2.

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1、第三章 生物信息的传递(上) 从DNA到RNA 本章主要内容: 3.1 RNA的结构、分类和功能 3.2 RNA转录的基本过程 3.3 转录机器的主要成分RNA聚合酶 3.4 启动子与转录起始 3.5 原核生物与真核生物转录产物比较 3.6 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 3.7 真核生物RNA的转录后加工 3.8 RNA的编辑、再编码和化学修饰 3.2 RNA转录的基本过程 P105/113-2/4: 简述RNA转录的概念及其基本过程。 转录的基本过程 模板识别 转录起始 通过启动子 转录的延伸 转录终止 转录起始 不需要引物; 转录起始就是RNA链上第一个核苷酸 键的产生。 RNA聚

2、合酶全酶+启动子 DNA处于双链状态 封闭复合物 开放复合物 三元复合物 RNA合成起始 聚合酶全酶所结合的DNA序 列中有一小段双链被解开 RNA聚合酶、DNA和新生RNA 转录起始 大致分为3个阶段: P74/76 P105/113-4/7. 什么是封闭复合物、开放复合物以及三元 复合物? P73/76 P74/76 转录延伸复合物较为稳定,可长时间与 DNA模板结合而不解离。只有在遇到转录 终止信号时,RNA聚合酶才停止加入新的 核苷酸,RNA-DNA杂合物解离,释放转录 产物并导致聚合酶本身从模板DNA上脱落 。 RNA链的延伸图解 3 5 RNA-DNA杂交螺旋 聚合酶的移动 方向

3、新生RNA 复链 解链 有义链 模板链(反义链 ) 延长部位 在转录的过程中,提供转录终止信号的序列 称为终止子(terminator)。无论是原核生物 还是真核生物,通过控制转录的终止来对转 录进行调控,也是基因表达调控的重要手段 。目前,对原核生物的终止子结构了解较多 。 P105/113-9/13 大肠杆菌的终止子有哪两大类?请分别介绍 一下它们的结构特点? 在大肠杆菌中,有两种类型的终止子,一类 为内在终止子(intrinsic terminator),在体 外实验中,只有核心酶和终止子就足以使转 录终止,不依赖其他辅助因子; 另一类终止子必须在因子( factor)的存在 下核心酶才

4、能终止转录,因此称为依赖因子 的终止子(-dependent terminator)。 第一类终止子又称为不依赖因子的终止子。 新生RNA中出现发卡式结构会导致RNA聚合酶的暂 停,破坏RNA-DNA杂合链5端的正常结构。寡聚 U的存在使杂合链的3端部分出现不稳定的 rUdA区域,两者共同作用使RNA从三元复合物中 解离出来。 终止效率与二重对称序列和寡聚U的长短有关, 随着发卡式结构(至少6bp)和寡聚U序列(至少 4个U)长度的增加,终止效率逐步提高。 因子 因子是一个相对分子 质量为2.0105的六聚 体蛋白。 其功能是作为RNA pol的一种辅助因子, 当其浓度为RNA pol 浓度的

5、10%时在体外 可发挥最高的活性。 大肠杆菌两类终止子的回文结构 A. 不依赖于Rho() 的终止子 A. 依赖于Rho()的 终止子 富含 G-C 系列U 新合成的RNA分子中 典型的回文结构(发夹结构) 和原核生物相比,对真核生物终止子结构的了解 较少。不同的RNA聚合酶有不同的终止子。 RNA聚合酶和有类似于原核生物的终止元件 ,RNA聚合酶是否有类似的终止元件目前还不 十分清楚。 抗终止作用 抗终止作用(antitermitation)是细菌操纵子和噬菌体 基因表达调控的一种方式,首次发现于噬菌体感染过程 中。噬菌体只有少数基因(早期基因)能被细菌RNA聚 合酶转录,而这些基因的产物能起始其他启动子的转录 ,或使RNA聚合酶阅读通过终止子,从而调控其他基因 的表达。 有些终止子的作用可被特异的因子所阻 止,使酶得以越过终止子继续转录,称 为通读( readthrough) 参见P69/72第三段

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