《血常规分析中的误差分析2012.11.22.》由会员分享，可在线阅读，更多相关《血常规分析中的误差分析2012.11.22.（68页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、血常规分析中的误差因素及 血涂片复检规则 多种病理条件对血常规检测的干扰 o假性血小板减少或增多 o假性红细胞减少或增多 o假性白细胞减少或增多 假性血小板减少或增多的干扰因素 o假性血小板减少 n样品采集环节中的血小板聚集 nEDTA诱导的血小板聚集 n血小板卫星现象 n巨大血小板 o假性血小板增多 n红、白细胞碎片的干扰 n小红细胞对血小板检测的影响 末梢取血不顺畅，组织液混入 抗凝剂干燥后混匀不好 抗凝剂浓度不够，11.5mg/mL 真空取血管采血后未充分混匀 样品采集环节中的血小板聚集 WBC LYM% MXD% NEUT% PLT PDW MPV P-LCR 5.4 0.190 0.
2、115 0.695 288 11.2 9.4 0.213 109/L 109/L fL fL WBC LYM% MXD% NEUT% PLT PDW MPV P-LCR 6.3 0.231 0.118 0.651 271 12.0 9.6 0.232 109/L 109/L fL fL WL* WL* WL* WL* AG 末梢血组织液混入后所致凝血 EDTA诱导的血小板聚集 o1969年Gowland首先报道 o可能的发生机制：抗原-自身抗体反 应 o易发条件：抗血小板抗体升高、 EDTA抗凝剂、室温或低于室温、体外 抗凝血中 o发病率：0.07%0.11% 血小板的活化与血小板聚集 血小板
3、活化时，肌 动蛋白与廓蛋白解离 ，肌动蛋白单体与短 纤维迅速聚合成长纤 维，随后，肌动蛋白 纤维在肌动蛋白结合 蛋白作用下形成束状 或网状；进而交联， 使胞浆由溶胶变为凝 胶。 血小板激活在四周 形成丝状伪足，伪足 末端有芽状凸起，活 化的血小板向纤维蛋 白网中伸入伪足并与 相邻的血小板或纤维 蛋白末端连接，形成 红色血栓。 Balduini CL, et al. Surface mechanisms of platelet adhesion and aggregation. Haematologica. 1987;72: 261-76. EDTA诱导的血小板聚集 oEDTA可引起血小板糖膜发
4、生改变，改变了 血小板膜表面某种隐匿性抗原构象 o血浆中存在的某种自身抗体与隐匿性抗原结 合后的抗原抗体复合物激活了细胞膜中的血小 板活性物质 n磷酯酶，使血小板膜水解并释放AA、ADP、 5-TH、胶原、凝血酶原等 o血小板纤维蛋白原受体被活化，促使血小板 与纤维蛋白原受体结合后聚集成团，导致血小 板假性减少 EDTA诱导的血小板聚集 o假性血小板减少可见于多种疾病，如自身免疫病、慢 性炎症、病毒或细菌感染、代谢综合征和肿瘤等，也 可见于少数健康人 o潜在的误诊风险高 n血小板计数为20109/L 是临床采取预防性血 小板输血的医学决定水平 n误诊为ITP或TTP病人 o处理方法： n形态学
5、镜检 n高端仪器 n更换抗凝剂重新检测 n手工法计数 血小板卫星现象 血小板卫星现象 o血小板卫星现象也是由于自身抗体引起的 一种免疫反应 oIgG型抗体可识别中性粒细胞和血小板上 的共同抗原结构，靶抗原是血小板的GPIIb- IIIa和中性粒细胞上的FcRIII片断 oEDTA诱导血小板凝集和血小板卫星现象 的机制不清楚 o处理方法 n形态学镜检 巨大血小板的检测问题 PLT-I 32 109/L PLT clumps? PLT Abn distribution? Thrombocytopenia? 光学法对巨大血小板的检测 PLT-O 65 109/L 红、白细胞碎片的干扰 o红细胞碎片的
6、产生 n多见于弥散性血管内凝血 n微血管病性溶血性贫血 n心源性溶血性贫血等红细胞破碎综 合症 n其它常见于化学中毒、肾功能衰竭 、血栓性血小板减少性紫癜和化疗等 o白细胞碎片的产生 nAML、淋巴瘤、严重感染、化疗等 排除红、白细胞碎片对血小板干扰 排除红、白细胞碎片对血小板干 扰 假性红细胞减少或增多的干扰因素 o红细胞冷凝集所致假性红细胞减少 o巨大血小板所致假性红细胞增多 红细胞冷凝集所致假性红细胞减少 o冷凝集素综合症：在31以下时能作 用于自身红细胞抗原发生可逆性的红细 胞凝集 o特发性病例和继发病例 n白血病、恶性淋巴瘤或全身性红斑狼 疮 n肺炎支原体属感染 n传染性单核细胞增多
7、症 n血吸虫病、丝虫病、疟疾、非洲锥虫 病、肝硬化、非典型性肺炎等 冷凝集素综合症的抗体 o冷凝集素主要为IgM抗体 o抗I抗体 n单克隆抗体：含有型轻链，4时最强， 而在37时不发生作用，继发于白血病、恶性淋 巴瘤或全身性红斑狼疮等滴度常很高，而IgG及 IgA值均正常 n多克隆抗体：含有及轻链，继发于肺炎 支原体属感染者抗体的滴定度常很低 o抗i抗体 n多见传染性单核细胞增多症和部分淋巴瘤病 例 n在低温下凝集脐带血中的胎儿红细胞，但在 成人中对红细胞的凝集作用极微弱 排除红细胞凝集所致干扰 RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDW 2.23 144 0.249 111.7
8、 64.6 578 0.254 1012/L g/L fL pg g/L RU* RU* RU* RU* RU* * 处理方法处理方法 加温到加温到3737O OC C后再测定 后再测定 假性白细胞减少或增多的干扰因素 o白细胞聚集所致假性白细胞减少 o红细胞溶血不良所致假性白细胞增 多 o有核红细胞所致假性白细胞增多 白细胞的凝集 白细胞的凝集 o易发条件 n常见于单核细胞增多症、感染性疾病 、自身免疫性疾病 n高滴度冷凝素 nEDTA抗凝诱导中性粒细胞围绕未成 熟细胞形成花环 n肿瘤疾病产生的粘多糖 o处理方法 n加温到37O OC C后再测定 溶血剂剂滴下后 正常人RBC肝硬化病人RBC
9、 红细胞溶血不良病例 o因脂类代谢异常所致红细胞膜表面 与外周血脂类结合形成脂质颗粒保护 膜，或红细胞膜表面结构异常，正常 浓度的溶血素无法破坏红细胞膜表面 o常见于以下疾病 n肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期、胆 道堵塞) n高脂血症 n高胆固醇制剂输液治疗过程中 n异常血红蛋白症(Hgb-S症、Hgb- C症) 红细胞溶血不良的原因 WBC LYM% MXD% NEUT% 6.9 0.343 0.194 0.463 109/L F1* F2* 肝硬化病人的红细胞溶血不良 WBC LYM% MXD% NEUT% 90.9 -.- -.- -.- WL* WL WL WL 109/L 有核红细胞的
10、存在 o血液学疾病： n急性髓细胞白血 病 n急性红白血病 n急性淋巴细胞白 血病 n慢性粒细胞白血 病 n慢性淋巴细胞白 血病 n多发性骨髓瘤 n骨髓增生异常综 合征 n恶性淋巴瘤 n骨髓转移癌 n骨髓纤维化 n原发性血小板增 多症 o血液非肿瘤性疾病 n缺铁性贫血 n巨幼细胞贫血 n溶血性贫血 n增生性贫血 n再生障碍性贫血 n原发性血小板减 少性紫癜 o感染性疾病 o原发性脾亢脾 有核红细胞对白细胞检测的干扰 WBC 56.1X109/L 外周血中红细胞的数量是白细胞的三次方数量级 排除NRBC对白细胞检测的干 扰 o形态学镜检 o高端仪器 临检是实验室风险最大的部门 自动化 形态学 A
11、 (blood) smear A (blood) smear campaigncampaign Blood, 1 April 2003, 101(7), 2453-2453Blood, 1 April 2003, 101(7), 2453-2453 血涂片复检所存在的问题 o使用血液分析仪后涂片复检率过低30%才能使漏检率达到临床认 可水平 * Laboratory Productivity and Manual Peripheral Blood Smears. Arch Pathol Lab Med-Vol130,May 2006 ISO对血常规形态学的相关要求 o5.5 检验程序 b）血液
12、学检查部门需制定如下标准/程序并形成 文件（不仅限于如下标准/程序）： 血细胞分析的显微镜复检标准（检测结果出现异常 计数、警示标志、异常散点图等情况时结果的确认 方法和程序）；血涂片制备和检验的书面程序/过程 ；对患者血液检查和凝固试验的标本进行重复检验 的标准及程序。 c）血液计数结果超出仪器线性范围时宜规定识别 和解决方法（如对血样进行适当稀释和重复检验） ；对于检测样本存在一些影响因素（如有核红细胞 、红细胞凝集、小红细胞、红细胞有内容物或疟原 虫、血小板凝块、巨型血小板等）时，对仪器检测 结果可靠性的判定和纠正措施需有书面规定。 CAP对血常规形态学的相关要求 oHEM.34200
13、Has the laboratory established criteria for checking and reviewing leukocyte differential counter data, histograms, and/or blood films for clinically important results flagged by the automated differential counter? oHEM.34300 Is the quality of blood films satisfactory (properly stained, free of prec
14、ipitate, good cell distribution)? oHEM.34350 Are slides uniquely identified? NOTE: Slides or cover slips must be uniquely identified by element (s) such as specimen or accession number, or patient name and/or number. oHEM.34450 Are blood films retained for at least one week for possible review and/o
15、r reference? NOTE: It may be desirable to retain outpatient films for a longer period and significantly abnormal films indefinitely for teaching purposes. 国际复检规则标准化状况 o国际血液学复检专家组推荐的41条规 则 nBerend Houwen博士，2002年 n6个国家，20名专家，调查17个实验 室 n通过对83条规则 ，13298例（15个 实验室）血液标本进行验证，合并成41条 规则 o与CBC、细胞体积和血红蛋白浓度 相关的规
16、则15条 o与白细胞分类相关的规则7条 o与仪器警报提示相关的规则17条 o与网织红细胞相关的规则2条 41条规则检测的真值表 NumberPercentage True Positive148311.20% False Positive247618.60% True Negative895367.30% False Negative3862.90% Total number of samples13298 推片复检率29.80% Barnes PW, et al. Lab Hematol, 2005,11:83-90 41条规则的验证 NumberPercentage True Positive148314.02% False
