《鸭新城疫病毒的分离鉴定及单克隆抗体的制备与应用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《鸭新城疫病毒的分离鉴定及单克隆抗体的制备与应用（74页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
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2、密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名： 缩略语 符号说明 英文 A P M VA v i a nP a r a m y x o v i r u s A P M V - I A x ，i a nP a r a m y x o v i r u ss e r o t y p eI A m p A b p C E F D P M V D A B E L I S A E D T A F I T C F H A H I h H R P I P T G L B m i n M A b s 0 R F 0 I E P A G E P C R A m p i c i l l i n a b s o r b
3、 a n c e b a s ep a i r C h i c k e ne m b r y of i b r o b l a s t s D u c kp a r a m y x o v i r u s D i a m i n o b e n z i d i n e e n z y m e - l i n k e dI m m u n o s o r b e n tA s s a y e t h y l e n ed i a m i n et e t r a a c e t i ca c i d f l u o r e s c e i ni s o t h i o c y a n a t e
4、 F u s i o np r o t e i n H e m a g g l u t i n a t i o n H e m a g g l u t i n i ni n h i b i t i o n h o u r h o r s e r a d i s hp e r o x i d a s e i s o p r o p y l t h i o D - D - g a l a c t o s i d e L u r i a - B e r t a n i ( b r o t h ) m i n u t e m o n o c l o n a la n t i b o d y O p e
5、 nr e a d i n gf r a m e O f f i c eI n t e r n a t i o n a ld e sE p i z o o t i e s p o l y a c r y l a m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i s P o l y m e r a s eC h a i nR e a c t i o n 中文 禽副黏病毒 禽副黏病毒I 型 氨苄青霉素 吸光度 碱基对 鸡胚成纤维细胞 鸭副黏病毒 二氨基联苯胺 酶联免疫吸附试验 乙二胺四乙酸 异硫氰酸荧光素 融合蛋白 血凝 血凝抑制 小时 辣根过氧化物酶 异丙基硫代-
6、p - D 一半乳糖 苷 L B 培养基 分钟 单克隆抗体 丌放阅读框 刚际曾疫局 聚丙烯酰胺凝胶电泳 聚合酶链式反应 P B S P E G r p m S D S S P F T r i s p L l a g p h o s p h a t eb u f f e r e ds a l i n e p 0 1 3 e t h 3 l e n e9 1 3 7 c o l r o t a t i o np e rm i n u t e s o d i u md o d e c y ls u l p h a t e s p e c i f i cp a t h o g e nf r e e T
7、 r i s ( h 3 d r o x 3 ，m e t h y l ) a m i n o m e t h a n e m i c r o l i t e r m i c r o g r a m 磷酸盐缓冲液 聚乙二醇 每分钟转速 十二烷基硫酸钠 无特定病原体 三羟甲基氨基甲烷 微升 微克 目录 中文摘要 英文摘要I I I l 引言1 1 1 病毒基本结构和特征1 1 1 1 形态特征一1 1 1 2 对理化因素的抵抗力l 1 1 3 生物学活性l 1 1 4 培养特性2 1 1 5 致病性2 1 2N D V 病毒基因组及主要结构和功能蛋白的特性3 1 2 1 基因组R N A 3 1
8、 2 2 核衣壳蛋白一3 1 2 3 磷蛋白和非结构蛋白。4 1 2 4 膜蛋白5 1 2 5 融合蛋白5 1 2 6 血凝素神经氨酸酶8 1 2 7 大分子蛋白质10 1 3 病毒感染和致病的分子机制1 0 1 3 1N D V 的复制1O 1 3 2N D V 致病性的分子基础1 l 1 4 病毒的分子检测技术1 2 1 5 基因工程疫苗的研究1 3 1 5 1 表达N D VF 和H N 蛋白的基因工程疫苗1 3 1 5 2反向遗传学和新型疫苗15 1 6 本研究的日的和意义。1 6 2 材料与方法16 2 1 主要试剂1 6 2 2 病毒、细胞和动物1 7 2 3D P M V 的分离
9、及其F 基I 圈的分子特征1 7 2 3 1 病料来源及处理l7 2 3 2 病毒分离l7 2 3 3 血清学鉴定1 7 2 3 4 中和试验18 2 3 5 鸡胚半数致死黾测定1 8 2 3 6 病毒生物学毒力测定1 8 2 3 7 致病性测定一l9 2 3 8F 基因的分子特征1 9 2 4D P M V 单克隆抗体的制备2 4 2 4 1 抗原的制备2 4 2 4 2 杂交瘤细胞株的建立2 4 2 4 3 单抗的特异性鉴定2 8 2 5 夹心E L I S A 检测方法及胶体会免疫层析试纸条的研制2 9 2 5 1 夹心E L I S A 检测方法的建立2 9 2 5 2 胶体金免疫层析
10、检测方法的建立2 9 3 结果与分析3 2 3 1 鸭新城疫病毒的分离及其F 基因的分子特征3 2 3 1 1 病毒的分离3 2 3 1 2 血清学鉴定3 2 3 1 3 中和试验3 2 3 1 4 鸡胚半数致死量的测定3 3 3 1 5 病毒生物学毒力测定3 3 3 1 6 致病性试验3 5 3 1 7F 基因的分子特征3 8 3 2 抗鸭新城疫病毒单克隆抗体的制备4 0 3 2 1 抗原制备4 0 3 2 2 细胞融合、筛选与克隆4 0 3 2 3 单抗I G 亚类及效价测定4 l 3 2 4 腹水纯化4 l 3 2 5 瞥抗的特异性鉴定4 2 3 3 央心E I L S A 检测方法的建立及胶体余免疫层析试纸条的研制一4 3 3 3 1 双抗体夹心E L I S A 方法的建立4 3 3 3 2 胶体金免疫层析检测方法的建立4 3 4 讨论4 5 4 1 鸭新城疫病毒的分离及其F 基因的分子特征4 5 4 2 抗鸭新城疫病毒单克隆抗体的制备
