骨髓红细胞微核技术监测中药石菖蒲及成分毒性初探

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1、动物毒物学2006年第21卷第12期畸形率明显升高,1309mgkg及其以下小鼠精子畸形率升高,不具有明显致突剂量的千里光70乙醇提取物不能引起变作用。参考文献(略)MiceSpermAbnormalityTestofExtractfromSenecloScandensYUZeng-jie。N3EFang-hong,LINHongying,XUXiao-bin,LIHuaCHENJin-jun事(instituteofAgriculturalBiotechnologyGuangdongOceanUniversityZhanjiangGuangdong52408&China)Abstract:F

2、rozen-vacuum-driedpowderofextractfromSenecioscandensBuch-Hamwith70ofethanolsolutionwaspreparedandarangeoffemaleKunmingmicewereemployedtoconductmicespermabnormalitytestItwasfoundthattheextractfromS$canden$increasedtheincidencerateofthemice8pc-1nlabnormalityatthemediumandhighdosages,mspecfivelybutnoin

3、creaseofspermabnormality砒thelowdosage(1309mgkg)。andthattheincidencerateofthemicespermabnormalityreliedonthedoseoftheextractfrom&$candensThoseresultsaboveindicatedthatonlythehigherdoseoftheextractfrom&$candeR$callcausemutationinmiceKeywords:ExtractfromSenecioscandensBuch-ham;spermstructuraltest;mutat

4、ion;mouse基金项目】广东省科技攻关计划重点引导项目(2004Bz020l007);广东省湛江市科技攻关计划项目(湛科200694号)if者简介】于增杰(1976一),男,黑龙江鸡西市人,在读硕士研究生,研究方向为高效无公害饲料陈进军博士为通讯作者,E-mail:jjchen777yahootomca,Tel:13828219598。,。冀琶鹫基套曼粤、掣黼弛肛懋鏖纛茹黜荡_霎熬磊为天南譬翼植、钽蚕,苞CAc冉orus它qT具-r有wj抗H=I癌11-W,。莸奚i采氧琵友藩搽盲苫t、a。tarin,ow、iL童璺绝!蹩挹象J掣味煮薹墓i抗3盖尔破綦集:薛盂箧:。澡拳罨赢鎏宙入窆二孽凳2型

5、璧化窭踅窍二些鎏蕻孟,。茗蠢茹箍虿囊霸菇蓐辑务运獾黎是可里主痰璧鎏塑k塑星:。,窭湿粪甭艺霞笼措磊气蚤三五爻矗蔷;里篓忘二鼍量丢鎏粤守甍塑望竖闩,婆真有赣瓣荪箱军藉航荔鲁;茗苌晶饔篓三享!挛荚要蓼!:!翌复袭翟。王”41。”幂釜矗梨鬲与:最薯谣;桑红17细II胞TlJ母秘录、千金方和:本草纲目中。1一“”。”171”动物毒物学2006年第21卷第1、2期(Polychromaticerythrocytes,PcE)微核技术(PCEMCNTest)对石菖蒲及成分的致突变性进行检验,为临床用药提供试验依据。1材料和方法11材料1-11试验动物10周龄未经产Bm卫,c小鼠(体重1822g),由河北医

6、科大学实验动物中心提供。雌雄各半,室温23+9-,全价饲料,自由采食饮水。112药物与试剂乙酸龙脑酯(BornylAcetate),槲皮素(Quercedn),Aldrich公司产品,购自舒伯韦化工试剂。环磷酰胺,。江苏恒瑞医药股份公司生产。石菖蒲煎液,石菖蒲饮片(购自保定金诺药业有限公司)加常水浸泡1h,水煎2次,合并滤液,蒸发浓缩至每mL药液含生药10g。12方法121动物分组及处理56只10周龄BALBe小鼠随机分为8组,每组7只。A,B,C,D,E,F组小鼠每天分别灌服高、低两个剂量的石菖蒲煎剂、槲皮素药液或乙酰龙脑酯药液,连续6d;G组每天灌服等量蒸馏水为阴性对照组;H组试验第1,3

7、,5d,肌肉注射环磷酰胺为阳性对照组。(分组、用药方法和药物用量,详见表1。)122制片所有试验小鼠均于第7天颈锥脱臼法处死,取其股骨,用小牛血清冲洗骨髓,制成骨髓涂片,每只小鼠制片35张,自然干燥后,甲醇固定,Giemsa染色。123镜检油镜下选择分布均匀,染色良好的区域观察,微核多呈圆形,边缘光滑整齐,呈紫红色。每只小鼠观察3张骨髓涂片,每只鼠计数1000个嗜多染红细胞,采用双盲法对微核计数。:13统计分析计算骨髓嗜多染红细胞含微核细胞的千分率,用卡方检验对数据进行分析处理。2结果试验中C组和G组各有一只小鼠因灌药致死。D,F组和G组小鼠,部分表现精神沉郁,G组尤为明显。G组微核率为236

8、67,与各组相比差异极显著(尺O01);D组微核率为3714,极显著低于G组(尺O01),显著高于其它各组(尺O05);其它各组间差异不显著(DO05)。结果详见表1。表1石菖蒲及成分对小鼠骨奠P傀的微援率的影响注:同列内字母相同者差异不显著(尸005);不同小写字母之间差异显著CPO05);大小写字母之间差异极显著(Po01)。3讨论微核是细胞有丝分裂后期仍滞留在细胞质中的染色体断片或染色单体。微核率是检测细胞遗传损伤的一个重要指71动物毒物学2006年第21卷第1,2期标,微核检测技术是被公认的筛选致突变物的主要方法之一,并为国际环境致突变物和致癌物防护委员会所肯定哺1。小鼠是骨髓PCE微

9、核实验的常用动物。环磷酰胺为一种烷化剂,它对细胞DNA合成及分裂具强烈的抑制作用,从而可明显诱发微核产生。本次实验环磷酰胺阳性组的微核率与阴性对照组的微核率差异极为显著(尺O001),说明本实验系统是可靠的。试验发现B,C,E和F组与H组相参考文献(略)比较,其微核率差异不显著(乃005),表明石菖蒲的成分槲皮素和乙酸龙脑酪没有遗传毒性,但F组小鼠出现了一些轻微的中毒症状,如嗜睡,活动减少等,说明服用50倍常规用量的乙酸龙脑酯,对小鼠产生了一定的内脏毒性。D组微核率显著高于H组,即服用常规用量50倍石菖蒲,其小鼠骨髓多染红细胞微核率显著高于阴性照组(只0001),表明石菖蒲具有一定的的遗传毒性

10、,但具体为何种成分在产生毒性有待进一步研究。StudiesORdetectthetoxicityofAcorus讹rinowiiSchottandItscomponentbymicronucleustestofbonemarrowpolychromaticerythrocytesInmiceJiangGuo-junlGuoHong-bin2LiuZongpin91(1CollegeofTraditionalChineseveterinarymedicine,AgriculturalUniversityofHebci,Dingzhou,073000;2Collegeofveterinarymed

11、icineUniversityofYangZhou;YangZhou,Jiangshu。225009)1Abstract:ResearchongenetictoxicityofAcon塔tatarinowiiSchottQuercetinandBomylAcetatebymeansofthemicronucleus(MCN)testofbonemarrowpolychromaticerythrocytes(PCE)inmiceThispaperreportedthegenetictoxicityofAcorustatarinowiiSchottQuercetinandBomylAcetateT

12、hroughMCNstatisticanalysisofthedatagainedfromvarioustestinggroups。TheresultindictedthatthemicronuclcusrateofmicePCEofthegroupwhichmiceweregivenorallyto50timesdosagesdecoctionofAcorustatarinowiiSchottweresignificanthigherthanthecontrolgroupKeywords:AcorustatadnowfiSchott;Querce吐n;BomylAcetate;Polychr

13、omaticerythrocytes;micronucleus(MCN)7【作者简介】姜国均(1971一),汉族,博士生联系电话:1383i209587通讯作者,刘宗平,博士生导师,教授。研究方向:临床兽医学。E-mail:liuzongpingyzueducn慢呼抗合剂的急性毒性和长期毒性试验研究李继昌,佟恒敏,张秀英,刘芳萍(东北农业大学动物医学学院药理教研室,黑龙江哈尔滨150030)摘要采用与临床应用相同的给药途径(30gmL)和动物能耐受的最大容积(08对小鼠进行灌胃给药,测定慢呼抗合剂的急性mL209)在24h内连续灌胃给药3次,中间毒性和最大耐受量:以60gkg、30gkg、间隔5h,即刻及连续观察7d,无一只小鼠15gkg(分别相当于临床用药剂量的30、15、死亡,亦未见明显毒性反应经计算,24h内75倍)连续灌胃给药60d,观察大鼠的生长小鼠总给药量为360gkg,相当于雏鸡每日用发育、血液学、血液生化学、脏器系数、组织量(2gkg)的180倍;在长期毒性试验中,病理学变化及停药2周后上述指标的变化结经连续60d灌胃给予慢呼抗合剂后,大鼠体果在急性毒性试验中,受药液浓度及灌胃容积重、行为活动、重要脏器系数、大鼠血液学、的限制而未能测出LDn以药物的最大浓度血液生化学指标与对照组比较均未见明显影72

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