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1、 分类号： S896.9 单位代码： 10335 密 级： 学 号： 20817039 硕士学位论文 中文论文题目：中文论文题目： 蜜蜂巢脾抗氧化、抑菌和抗炎活性 蜜蜂巢脾抗氧化、抑菌和抗炎活性 以及抗生素残留研究 以及抗生素残留研究 英文论文题目：英文论文题目：Antioxidant, Antimicrobial and Anti-inflammatory 111 Activities the water extracts perform better than the ethanol extracts; with the exception of the DPPH scavenging a
2、cticity, the A. mellifera ligustica honeycomb over-performs the A. cerana cerana honeycomb; the bioactivities of the extracts of honeycomb show in a concentration-dependent manner. The in vivo results showed that both samples exhibited remarkable inhibition in xylene-induced ear edema model, carrage
3、enan-induced hind paw edema model and the content of PGE2 in the inflammatory tissues, while they showed no anti-inflammatory against acetic acid-induced vascular permeability; Only the water extracts of A. cerana cerana honeycombs bio-activities showed in a concentration-dependent manner. The resul
4、ts partly explained the use of honeycomb in traditional Chinese medicine. Moreover, honeycomb could be potential natural bio-resources. Keywords： honeycomb; antibiotic residue; antioxidant activity; antimicrobial activity; anti-inflammatory activity 缩 写 缩 写 缩缩 写写 英英 文文 中中 文文 AFB American Foul Brood
5、美洲幼虫腐臭病 BHT 2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol 2,6-二叔丁基对甲酚 BW Body weight 体重 CAPE Caffeic acid phenethyl ester 咖啡酸苯乙酯 DPPH 1,1-Diphenyl-2-pierylhydraz 1,1-二苯基-2-苦肼 EC50 Median effect concentration 半效应浓度 EEP Ethanol extract of propolis 蜂胶醇提液 EFB European Foul Brood 欧洲幼虫腐臭病 ESI Electrospray ionization 电
6、喷雾离子化 FDA Food and drug administration 美国食品与药物管理局 10-HDA 10-Hydroxy-2-decenoic acid 10-羟基-2-癸烯酸 LC Liquid chromatography 液相色谱法 MBC Minimum bactericidal concentration 最小杀菌浓度 MIC Minimum inhibitory concentration 最小抑菌浓度 MRL Maximum residue limit 最大残留限量 MS Mass spectrometry 质谱分析法 NV Nidus vespae 蜂房 NVP
7、Nidus vespae protein 蜂房蛋白 OC Organochlorine 有机氯 OP Organophosphorus 有机磷 PGE2 Prostaglandin E2 前列腺素 E2 Vc Ascorbic acid 抗坏血酸 本论文涉及抗生素名称中英文对照 本论文涉及抗生素名称中英文对照 缩缩 写写 英英 文文 中中 文文 AHD 1-Amino-hydantoin 呋喃妥因代谢物 AMOZ 5-Morpholinomethy-3-amino-2-oxalidinone 呋喃它酮代谢物 AOZ 3-Amino-2-oxalidinone 呋喃唑酮代谢物 CAP Chlor
8、amphenicol 氯霉素 CIP Ciprofloxacin 环丙沙星 DAN Danofloxacinmesylate 丹诺沙星 DMZ Dimetridazole 地美硝唑 DSM Dihydrostreptomycin 双氢链霉素 ENR Enrofloxacin 恩诺沙星 MNZ Metronidazole 甲硝唑 NOR Norfloxacin 诺氟沙星 OFL Ofloxacin 氧氟沙星 OXO Oxolinic acid 恶 喹 酸 RNZ Ronidazole 洛硝哒唑 SBZ Sulfabenzamine 苯酰磺胺 SCP Sulfachlorpyridazine 磺胺
9、氯哒嗪 SD Sulfadiazine 磺胺嘧啶 SDM Sulfadimethoxine 磺胺间二甲氧嘧啶 SDX Sulfadoxine 磺胺多辛 SEM Semicarbazide 呋喃西林代谢物 SIZ Sulfaisoxazole 磺胺二甲异噁唑 SM Streptomycin 链霉素 SM1 Sulfamerazine 磺胺甲基嘧啶 SM2 Sulfamethazine 磺胺二甲嘧啶 SMM Sulfamonomethoxine 磺胺间甲氧嘧啶 SMP Sulfamethoxypyridazine 磺胺甲氧哒嗪 SMZ Sulfamethoxazole 磺胺甲基异噁唑 SPD Su
10、lfapyridine 磺胺吡啶 SQX Sulfaquinoxaline 磺胺喹恶啉 STZ Sulfathiazole 磺胺噻唑 TMP Trimethoprim 三甲氧苄氨嘧啶 目 次 目 次 致 谢. I 摘 要 缩 写 目 次 1 引言 1 1.1 蜜蜂巢脾概况 1 1.2 蜜蜂巢脾成分 2 1.3 蜜蜂巢脾的生物学活性 3 1.4 巢脾中抗生素和农药残留问题 . 8 1.5 研究意义和创新点. 11 2 抗氧化活性研究. 13 2.1 研究材料. 13 2.2 研究方法. 13 2.3 结果和讨论. 15 2.4 小结. 18 3 抑菌活性研究. 19 3.1 研究材料. 19 3
11、.2 研究方法. 19 3.3 结果和讨论. 20 3.4 小结. 21 4 抗炎活性研究. 24 4.1 研究材料. 24 4.2 研究方法. 24 4.3 结果和讨论. 26 4.4 小结. 29 5 抗生素残留研究. 31 5.1 研究材料. 31 5.2 研究方法. 31 5.3 结果和讨论. 34 5.4 小结. 37 6 结论. 38 参考文献. 40 浙江大学硕士学位论文 1 1 引言引言 1.1 蜜蜂巢脾概况蜜蜂巢脾概况 巢脾，是指由蜜蜂筑造的双面布满巢房的脾状蜡质结构，是蜜蜂栖息、繁衍 育子、贮存酿造食物的场所1。由于茧衣的堆积和蜂产品储存后的残留，巢房的 容积随着培育蜜蜂世
12、代的增加而减小， 巢房的颜色由白色或者淡黄色转为褐色甚 至黑色，巢脾的成分也变得相当复杂。 蜜蜂有着悠久的饲养历史，蜂蜜和蜂蜡的应用最为广泛。 神农本草经对 蜜蜂医疗功能有记载：“蜂蜜味甘、平、无毒，主心腹邪气，诸惊痈经，安五脏 诸不足，益气补中，止痛解毒，除百病，和百药，久服强志轻身，不饥不老，延 年”。人类对蜂蜡的利用约始于 4000 年前，小亚细亚的亚述国将蜂蜡涂抹尸体， 用于防腐前处理2。约 2000 年前，蜂蜡开始被用于医药领域，据神农本草经 记载，蜂蜡“味甘，微温，主下痢脓血，补中，续绝伤金疮，益气”。近代，越来 越多的蜂产品被开发利用，如蜂王浆、蜂胶、蜂花粉和雄蜂虫蛹等，其对人体
13、机 能的健康具有各种不同的功效，并且低毒甚至无毒。巢脾是一种中国民间传统药 物，被用于治疗或者辅助治疗鼻炎、支气管炎、风湿性关节炎、牙周炎、肝炎、 皮肤病等，也被作为单一药制剂(如鼻炎宁)和营养型原料(如复肝扶正饮)加以应 用。但是巢脾的相关研究相当匮乏，尤其是对巢脾的化学成分和生物学活性的基 础研究则寥寥无几。 1.1.1 蜜蜂巢脾在古代的应用 陈年巢脾在古代的应用主要局限于提取蜂蜡，没有可靠文献记载其本身被作 为一种药物或者食品来应用。蜂蜡主要被用于蜡烛制造、绘画、丸药制备、药剂 配置等方面。也有人认为蜜蜂陈年巢脾与蜂房功效接近。蜂房(也称为露蜂房)是 一味有着悠久的应用历史中药材。蜂房(
14、nidus vespae)为胡蜂科昆虫果马蜂 (Polistes olivaceous)、日本长脚胡蜂(P. japonicas)或异腹胡蜂(P. varia)的巢3。 本 草纲目记载，“露蜂房，阳明药也。外科齿科及他病用之者，亦皆取其以毒攻 毒，兼杀虫之功耳。”本经记载，“主惊痫瘈疭，寒热邪气，癫疾，蛊毒，肠 痔。”现代研究表明蜂房在抗龋齿、调节机体免疫力和抗肿瘤方面均有一定功效。 1.1.2 蜜蜂巢脾应用的现状 浙江大学硕士学位论文 2 虽然陈年巢脾资源丰富，但利用率却很低，目前主要用于蜂蜡提取。巢脾可 作为单一药制剂，临床证明其对鼻炎和肝炎具有显著治疗效果。巢脾还常被与其 它中药材配伍，
15、用于治疗慢性支气管炎、胃肠炎、慢性咽炎、痈肿疮毒、皮肤病、 肾虚和尿道结石等疾病4。蜂房油，有驱虫功效，但是毒性较大。巢脾浸提液 “黄金膏”是巢脾制蜡过程中产生的副产品，常用于提高家禽免疫力。 1.1.3 蜜蜂巢脾资源 我国是世界第一养蜂大国，蜂群饲养量、蜂产品产量和出口量均位居世界首 位。据统计，2008 年我国蜂农共有 25 万人左右，生产蜂群约 700 万群，包括意 蜂 400 多万群和中蜂 200 多万群。蜂蜜产量约 29.3 万吨，蜂王浆 0.3 万吨，蜂花 粉 0.3 万吨，蜂胶 350 吨，产值达 80 亿人民币，出口创汇约 1.33 亿美元5。意 蜂巢脾使用时间一般为 23 年
16、，中蜂巢脾使用时间相对较短，一般为 12 年。 我国蜜蜂资源丰富，所以养蜂生产淘汰下来的巢脾数量也相当可观。如果能够将 巢脾开发利用，不仅可以为蜂业增加一项可观收入，而且可提高这一可再生资源 的利用率，进一步提高生态效益。 1.2 蜜蜂巢脾成分蜜蜂巢脾成分 巢脾的成分十分复杂，除蜂蜡外，还含有蜜蜂生产和代谢的各种产物，如茧 衣、蜂胶、蜂王浆、花粉、蜂蜜等物质。由于中蜂和意蜂的习性不一样，其巢脾 的理化性质和成分也存在一定的差异。意蜂旧巢脾含有大量的蜂蜡，以及树脂、 油脂、色素、鞣质、糖类、有机酸、脂肪酸以及甙类等物质，是提取蜂蜡和制备 巢脾水溶性浸膏的主要原料；中蜂旧巢脾茧衣较薄，主要用于提取蜂蜡6。 巢脾的主要成分蜂蜡的主要成分为酯类、游离酸、烃类、维生素 A、色素 (蜡素等)及芳香性物质7。蜂蜡中研究较多以及用于生产
