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1、 分类号：密级：编号：U D C：学 位 论 文急性单核细胞白血病细胞株 SHI-1挥发性有机物的测定Analysis of VOCs in the Headspace of SHI-1 acutemononuclear leukemia cell王娟指导教师姓名申请学位级别提交论文日期学位授予单位和日期夏海龙教授安徽医科大学第一附属医院硕士专业名称 内科学（血液病）2014.03论文答辩日期2014.05安徽医科大学2014.07答辩委员会主席汪兴洪教授人翟志敏教授等评阅2014年 05月 安徽医科大学ANHUI MEDICAL UNIVERSITY硕士学位论文论文题目急性单核细胞白血病细胞
2、株 SHI-1挥发性有机物的测定Analysis of VOCs in the Headspace ofSHI-1 acute mononuclear leukemia cell作者姓名王娟指导教师夏海龙 教授 内科学（血液病）血液系统肿瘤的诊断与治疗学科、专业 研究方向 论文工作时间 2012年7月至2014年1月2014年 5月 学位论文独创性声明本人所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确说明并表示谢意。学位论文作
3、者签名：日期：学位论文使用授权声明本人完全了解安徽医科大学有关保留、使用学位论文的规定。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。学位论文作者签名：日期：导师签名：日期： 目 录中英文缩略词对照表 1中文摘要 2英文摘要 3前言 5材料与试剂10实验方法13结果18讨论22结论27存在的问题及展望27参考文献28附录32个人简历32致谢 33综述及参考文献34 安徽医科大学硕士学位
4、论文英文缩略词对照Abbreviation英文缩写英文全称中文全称VOCsSPMEVolatile organic compoundsSolid phase microextraction挥发性有机物固相微萃取GC/MSGas chromatography/massspectrometry气相色谱/质谱技术SIFT-MSSelected ion flow tube massspectrometry选择离子流动学质谱分析技术IMSIon mobility spectrometer离子迁移谱DMSODimethyl sulfoxide二甲基亚砜rpmcpsRotation per minuteCo
5、unts per second每分钟转速每秒计数COPDChronic obstructive pulmonarydisease慢性阻塞性肺疾病- 1 - 安徽医科大学硕士学位论文急性单核细胞白血病细胞株 SHI-1挥发性有机物的测定中文摘要白血病是常见肿瘤之一，其中急性多于慢性；急性白血病主要有发热、出血、感染、肝脾肿大等症状，致病原因主要与病毒感染、化学因素、电离辐射等有关。主要依靠临床症状、体征、实验室检查等进行诊断，其中骨髓检查是白血病确诊的里程碑，但目前创伤性仍较大，不仅给患者带来痛苦且过程繁琐，各种不利因素促使医学科技工作者不断研究探索新的检测手段，以期减少患者痛苦并方便于临床。前
6、期文献阅读中我们发现，呼吸分析在疾病尤其肿瘤筛选及诊断中很受人们欢迎。本课题组通过 PTR-MS对急性白血病细胞株 NB4培养瓶顶空气体进行检测分析，发现该细胞株可以引起培养瓶顶空气体中 VOCs组成的改变，其中多种醛类物质含量减少，乙醛含量的减少最为显著，但该物质只是推测。本实验进一步研究急性白血病细胞株 SHI-1对该细胞培养瓶顶空气体中 VOCs组分的影响，并筛选出细胞株 SHI-1代谢产物中具有特征性的 VOCs，探讨 VOCs分析检测在白血病患者诊断或与其他肿瘤鉴别诊断中的价值，以及 SPME-GC/MS是否可以应用于呼气中 VOCs的测定，为开展下一步的研究工作奠定了基础，也为呼气
7、分析应用于血液系统恶性疾病的诊断拓展了新的领域。目的：检测急性单核细胞白血病细胞株 SHI-1培养瓶顶空气体中挥发性有机物（VOCs），分析该细胞对其组分的影响，并筛选出白血病细胞株 SHI-1代谢产物中具有特征性的 VOCs，探讨 VOCs分析检测在白血病诊断、鉴别诊断中的价值。方法：收集急性单核细胞白血病细胞株 SHI-1、人巨噬细胞株和空白培养液培养瓶顶空气体中的 VOCs，采用固相微萃取-气相色谱/质谱技术- 2 - 安徽医科大学硕士学位论文（SPME-GC/MS）对其进行检测，应用双边 Mann-Whitney U检验分析两两之间的差异性，筛选出与 SHI-1细胞有关的特征性 VOC
8、s。结果：应用 SPME-GC/MS对 SHI-1细胞株、人巨噬细胞株及空白培养液顶空气体进行检测分析，发现急性单核细胞白血病细胞株 SHI-1细胞培养瓶顶空气体中可检测出 8种特征性挥发性有机物，分别为 2,4-二甲基庚烷、苯、4-甲基辛烷、氯仿、3,7-二甲基十二烷、己醇、环己醇、十六烷；与人巨噬细胞、空白培养液培养瓶比较，其中烷烃类、苯类物质可检测量在 SHI-1细胞株中明显增高，醇类明显减少。结论：SHI-1细胞株可引起培养瓶顶空气体中 VOCs组分的改变，其中多种烷烃类物质、苯含量增多，醇类含量减少，提示上述物质有可能作为白血病细胞特征性标记物。关键词急性单核细胞白血病细胞株 SHI
9、-1肿瘤 VOCs固相微萃取-气相色谱/质谱技术Analysis of VOCs in the Headspace of SHI-1 acute mononuclear leukemia cell AbstractThe leukemia is one of the most common tumors, in which acute is more than thechronicity; The acute leukemia mainly include symptoms such as fever, hemorrhage,liver and spleen enlargement, the
10、pathogenicity mainly with the viral infection, thechemical factor, the ionisation radiation and so on. Its diagnosis is dependent onclinical symptom, the symptom, the laboratory inspection and so on. In which marrowinspection are the leukemia diagnosis milestones, but the present wound was still big
11、,- 3 - 安徽医科大学硕士学位论文not only brought the pain also the process to the patient is tedious. Nevertheless,adverse effects of those the laboratory inspection urged the medicine scientific andtechnical worker to study exploring the new examination method which reduce thepatient pain and facilitate clinica
12、l. In preliminary literature, we discovered that thebreath analysis gain growing popularity in disease especially tumor screening and thediagnosis. By means of PTR-MS, air samples from the headspace of SHI-1 acutepromyelocytic leukemia cells and medium control were detected, we found that SHI-1acute
13、 promyelocytic leukemia cells had an impact on the concentration distributions ofVOCs in their headspace. The most outstanding VOCs were multiple aldehydes, whichrevealed a significant consumption by SHI-1 cells, especially acetaldehyde, but theconcrete material were still unclear. This experiment further study the impact of SHI-1cells on VOCs in the headspace, and to assess the feasibility of VOCs analysis inleukemia patients or
