苹果红色芽变香气组分及脂肪酸代谢相关酶活性研究

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1、关于学位论文原创性和使用授权的声明 本人所呈交的学位论文,是在导师指导下,独立进行科学研究所取得 的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体, 均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。 本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定,同意学 校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版,允许论 文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存 论文和汇编本学位论文,同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文 收录到中国学位论文全文数据库,并向社会公众提供信息服务。 保

2、密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名: 导师签名: 日 压蟛 期:麴! 查6 f f , 7 r ;lLIIIIIIllIll1111111111I l l l lI I1 1 1 1 1 1 1 m 英文缩写符号及其中英文对照表【Y 2 ,1 6 6 0 1 英文缩写英文名称中文名称 A F L P A m p l i f i e dF r a g m e n tL e n g t hP o l y m o r p h i s m扩增片段长度多态性 H S H e a d s p a c e 一 项空 E T r a n s 反式结构 G C M SG a sc h r o m a t

3、 g r a p h y - m a s ss p e c t r o m e t r y气相色谱质谱联用 S P M ES o l i dP h a s eM i c r o e x t r a c t i o n固相微萃取法 P D M S P o l y d i m e t h y l s i l o x a n e聚二甲基硅氧烷 D V B D i v i n y l b e n z e n e二乙烯基苯 C A R C a r b o x e n碳分子筛 P A P o l y a c r y l a t e 聚丙烯酸酯 丸虹A l c o h o la c y l t r a n

4、s f e r a s e醇酰基转移酶 A D HA l c o h o ld e h y d r o g e n a s e醇脱氢酶 C T A B C e t y l t r i m e t h y la m m o n i u mb r o m i d e 十六烷基三甲基溴化铵 C VC o e f f i c i e n to fv a r i a t i o n变异系数 E - T r a m 反式结构 G C M SG a sc h r o m a t g r a p h y m a s ss p e c t r o m e t r y气相色谱质谱联用 H P L H y d r

5、o p e m x i d el y a s e 氢过氧化物裂解酶 L O X L i p o x y g e n a s e 脂氧合酶 N O N i t r i co x i d e一氧化氮 O D O p t i c a ld e n s i t y 吸光度 S I M S e l e c t e di o nm o n i t o r i n g选择离子检测 U oO d o ru n i t s香气值 Z C i s 顺式结构 厶- J 目录 中文摘要I A b s t r a c t I I I 1 弓l 言。1 1 1 问题的提出1 1 2 前人研究进展:2 1 2 1 果树芽变

6、研究进展2 1 2 2 果实香气组成7 1 2 3 香气生物合成及代谢8 1 2 4 果实香气物质研究方法1 2 1 3 本研究的内容及目标15 2 材料与方法。1 6 2 1 红色变异株的A F L P 分子标记鉴定1 6 2 1 1 试验材料:1 6 2 1 2A F L P 主要试剂及配制- 1 6 2 1 3A F L P 主要仪器及设备18 2 1 4 试验方法1 8 2 2S P I V l E G C M S 分析苹果香气时萃取方法的建立2 0 2 2 1 试验材料2 0 2 2 2 仪器及药品2 0 2 2 3 试验方法2 0 2 3 苹果红色芽变及其对照香气组分分析2 1 2

7、 3 1 试验材料2 1 2 3 2 实验仪器及药品2 2 2 3 3 试验方法2 2 2 4 香气代谢的脂肪酸途径相关酶活性及脂肪酸积累量的测定2 2 2 4 1 试验材料。2 2 2 4 2 脂肪酸代谢途径相关酶活性测定方法2 2 2 4 3 脂肪酸积累量测定2 3 3 结果与分析2 5 3 1 红色变异株的A F L P 分子标记鉴定2 5 3 2S P M E G C M S 分析苹果香气时萃取方法的建立2 8 3 2 1 萃取头的选择2 8 3 2 2 萃取温度的选择2 8 3 2 3 萃取时间的选择2 9 3 2 4 解吸时间的筛选2 9 3 2 5 重现性分析3 0 3 3 苹果

8、红色芽变及其对照香气组分分析31 3 3 1 香气组分及含量3 l 3 3 2 特征香气成分及香气值3 4 3 3 3 香气种类及含量3 4 3 3 4 香气代谢的脂肪酸途径相关酶活性及脂肪酸积累量的测定3 6 4 讨论3 8 4 1 红色变异株的A F L P 分子标记鉴定3 8 4 2 关于S P M E G c M S 分析苹果香气时萃取方法的建立3 8 4 2 1 萃取头的选择3 8 4 2 2 萃取温度的选择3 9 4 2 3 萃取时间的选择3 9 4 2 4 解吸时间的选择3 9 4 3 关于苹果红色芽变与对照品种香气成分的比较3 9 4 4 关于苹果红色芽变与对照香气代谢的脂肪酸

9、途径相关酶活性及脂肪酸积累4 0 5 结论4 2 参考文献。4 3 致谢5 5 攻读硕士学位期间发表论文情况5 6 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 芽变选种是优中选优,是对现有品种个别不良性状进行改良的有效途径。在已报道 的苹果芽变品种中,红色芽变品种占7 0 以上。深入探讨红色芽变机理,对苹果品种的 有效改良具有重要意义。为此,本研究以发现的多个红色株变及其对照为试材,通过分 子标记对其进行鉴定,并对其香气组分进行分析评价,研究其香味物质代谢机理及规律, 旨在为旨在为探讨苹果红色芽变机理提供基本资料,并为优质苹果芽变品种选育提供参 考。 主要研究结果如下: 1 采用A F L P 技术对

10、2 9 份材料进行分子标记鉴定,6 4 对引物共扩增出1 5 1 2 条;对 原始矩阵用S i m Q u a l 程序求D I C E 相似系数矩阵,并获得相似系数矩阵得出聚类图。由 聚类图可以判断红色变异与各自母株分离明显,鉴定其是芽变,为后续芽变选种提供分 子依据。 2 利用固相微萃取( S P M E ) 气相色谱质谱( G C M S ) 联用技术分析苹果香气组分, 探讨了不同纤维头、平衡温度、萃取时间和解析时间等条件对分析结果的影响结果,表 明苹果的S P M E G C I V I S 萃取方法为采用D V B C A R P D M S ( 5 0 3 0 u r n ) 纤维头在5 0 。C 下 萃取3 5 m i n 后,高温解析2 m i n 能有效吸附苹果果实香气;筛选结果的重现性分析显 示,主要香气成分的变异率变异系数均小于1 0 ,且大部分在5 左右,重现性良好: 3 采用筛选的萃取方案,以成熟果实为试材,分析了富士( 2 个) 、国光与红将军等 苹果品种的4 个红色芽变品系及其各自对照母株的果实香气成分,;旨在为苹果芽变机 理研究及芽变品种

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