生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定讲解

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1、高中生物实验 实验一 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 复习目标 1通过对实验结果的分析归纳，理解实验原理 2初步学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂 肪、蛋白质的基本方法和某些化学试剂能够使生物组 职中的有关有机化合物产生特定的颜色反应 1实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生 特定的颜色反应 可溶性糖中的还原糖斐林试剂砖红色沉淀 脂肪 桔黄色 脂肪苏丹染液 蛋白质 紫色 可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，鉴定生物 组织中 的存在。 2实验目的 初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质 的基本方法。 苏丹染液 红色 双缩脲试剂 糖、脂肪或蛋白质 3实验材料

2、的选择 本实验成功的关健在于实验材料的选择好的 材料可以提高实验效果。 (1)可溶性还原糖的鉴定；还原糖的含量，生物 组织中有无色素的影响实验结果及其观察的最重 要因素因此要 也可用白色的甘蓝叶、白萝卜替( 经 实验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果， 梨、白色甘蓝叶白萝卜。 选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的 植物组织，其中以苹果，梨最好 不能选西瓜 (2)脂肪的鉴定：所用材料一要 二 要 才能做徒手切片，花生种子符合 该实验的要求，将花生种子 ，使其变 软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长， 否则组织太软，切下的薄片不易成形。 (3)蛋白质的鉴定：一般选用浸泡12d的富含 蛋白质

3、的 (便于研磨)或用 。 脂肪含量高 有一定大小 浸泡34h 大豆种子鸡蛋清 4. 试剂的配制 (1)斐林试剂的配制： ， 。 (2)苏丹染液：配制后待 后 再使用。 (3)双缩脲试剂的配制： 。 即配即用 甲、乙两种试剂分别配制 全部溶解 A、B两液分开配制，注明标签 5.实验方法与步骤中应注意的事项 (1)在对可溶性还原糖鉴定的过程中，使用的斐林试剂要 (在实验中改用班氏试剂更 为简便)。在水浴加热时，试管底部不要触及烧杯底部，以 ；加热时，试管口也不要朝向自己或他人，防止沸腾的溶液 冲出试管造成烫伤。 (2)在对脂肪进行鉴定时，切出符合要求的薄切片是实验 结果能否满意的关键。要多 ( 特

4、别注意切片时的安全)。该实验是把化学反应和显微镜观 察结合起采的实验，叫显微化学鉴定。 (3)在对蛋白质进行鉴定时，若使用蛋清，必须按要求 。 实验样液要留出一份作为对照，便于最后进行比较。 (4)实验中 ，要牢记不同试剂的鉴 定对象。 现配现用，混合均匀后一次加入 防止试管受热不均匀而爆裂 按教材要求练习徒手切片技术 稀释 各试剂的使用不可弄混 6实验结果与讨论 (1)如果注意了材料的选择和实验要求，本实验 会十分明显。 (2)前面提到 ，否则实验难以 得到满意结果。这是因为此反应利用的是斐林试剂中 的 。而我们知道， ，而 是斐林试剂的改良剂，它利用 ，使之稳定溶解，灵敏度高且可以长期使用

5、，故更为 简便。 颜色效果 斐林试剂要现配现用 Cu(OH)2产物为弱氧化剂与还原糖 Cu(OH)2是一种沉淀物质，放置过久沉淀过多则不 利于反应班氏试剂 柠檬酸作为Cu2+的络合剂 典例分析 例l 在鉴定可溶性糖的实验中，加入斐林试剂时应 ( ) (A)先加入斐林试剂甲液后加入乙液 (B)先加入斐林试剂乙液，后加入甲液 (C)将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加 (D)以上A、B、C三项操作方法都正确 解析：斐林试剂的甲液是氢氧化钠的质量浓度为0.1g mL的溶液；乙液是硫酸铜的质量浓度为0.05gmL的溶液 只有将甲液和乙液混合后，才能生成浅蓝色的Cu(OH)2 沉淀而可溶性搪(还原糖)就

6、是与Cu(OH)2在加热条件下 才能生成砖红色的Cu2O沉淀，起到鉴定可溶性糖的作用。 答案：C C 例2 下列可用于脂肪鉴定的实验材料是 ( ) (A)苹果 (B)梨 (C)卵白 (D)花生种子 解析：用于脂肪鉴定的实验材料最好选择富含脂肪的种子 ，如花生种子：苹果、梨富含可溶性还原糖含脂肪少；卵 白含蛋白质多，含脂肪少 说明：对具体的实验选材也是进行实验设计的重要工作， 实验材料的选择对实验成功与否影响很大，花生种子是用于 脂肪鉴定的最好的实验材料。 例3 花生子叶细胞内的圆形透亮的小颗粒与苏丹染液 发生了颜色反应形成 ( ) (A)蓝色 (B)红色 (C)无变化 (D)紫色 解析：花生子

7、叶细胞内的圆形透亮的小颗粒是脂肪颗粒， 脂肪被苏丹试剂染成红色 D B 挑战误区 例 下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是 ( ) (A)用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白 质的鉴定 (B)脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成桔黄色的脂肪漓 (C)鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液 (D)用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后再加入 含样品的试管中，且必须现配现用 解析：斐林试剂与双缩脲试剂所用溶质相同，且所含氢氧化钠溶液的 浓度相同但二者所用的硫酸铜的质量浓度不同鉴定可溶性还原糖 时，是甲、乙两液现配现用，一次如入而鉴定蛋自质时要

8、先加A液 ，再加B液可溶性还原糖、蛋白质的颜色反应是试剂与其发生化学 反应的结果，是肉眼可见的脂肪鉴定中由于脂肪滴小且分散在细 胞中所以需要借助于显微镜现察。 易错分析：本题在于考查学生的操作是否规范，正确，是否注意了不 同鉴定实验之间的差别在选用试剂上容易出现错误。 B 名题链接 1、在过氧化氢酶溶液中加入双缩脲试剂，其结果 应该是 ( ) (A)产生气泡 (B)溶液呈蓝色 (C)溶液呈紫色 (D)产生砖红色沉淀 答案：C 2、鉴定蓖麻籽粒中的储存蛋白质，采用的实验步 骤应包括 ( ) (A)用质量分敷为l0的盐酸解离液处理种仁薄片 (B)用体积分数为95的酒精解离液处理种仁薄 片 (C)用

9、革兰氏碘液染色 (D)用亚甲基蓝染液染色 答案：(B)、C C B、C 3 据药理研究，一种茅草的报内含有降血糖的因子及多种 有益于健康的成分，某公司将它开发成一种保健钦料该 产品是否适用于糖尿病的患者生物学兴趣小组的同学以 此作为研究课题，请完成下面的实验鉴定报告。 (1)实验目的：鉴定一种茅草的根是否含有还原性糖和淀 粉。 (2)实验原理：还原性糖可用 试剂、淀粉可用 试剂来检测 （3)实验器材一种茅草的根、所需试剂、刀片、载玻 片、酒精灯，试管夹、火柴滴管 班氏 革兰氏碘 液 （4)实验步骤： 鉴定还原性糖： 鉴定淀粉： (5)实验现象： (6)结果分析： (7)在鉴定还原性糖的实验操作

10、中应注意； 将一种茅草的根切成薄片(或压碎)，放于载玻片上， 滴加l2漓革兰氏碘液，观察颜色变化 将一种茅草的根切成薄片(或压碎)，放于载玻片上，滴加l一2滴 班氏试剂将载玻片放在酒精灯上加热，观察颜色变化。 观察到有红黄色，说明有还原性糖存在，如没有红黄色，说 明没有还原性糖存在如有蓝色或蓝紫色出现，说明有淀粉 存在；如没有蓝色或蓝紫色出现，说明没有淀粉存在 。 载玻片在火焰上加热时要来回移动，以免加热不匀而爆裂 能力训练 一、选择题 1.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是 ( ) （A)先加A液，混合后再加B液摇匀观察 (B)先加B液，混合后再加A液摇匀观察 (C) A、B液混合后加

11、入，摇匀后观察 (D) A、B液同时加入样液，摇匀后观察 2可溶性还原糖的鉴定中，制备生物组织样液时加入少许 石英砂，其目的是 ( ) (A)研磨成分 （B)防止糖被破坏 (C)防止反应 (D)无作用 3组织样液制备时，过滤黄豆组织研磨液时，漏斗上（ ） （A)铺几层滤纸 (B)填一团棉花 (C)垫上一层纱布 (D)堵一小团脱脂棉 A A C 4在鉴定可溶性还原糖的实验中，对试管中的溶液进行加热时，操作 不正确的是 （ ) （A)将这支试管放进盛有开水的大烧杯中 (B)试管底部不要触及烧杯底部 （C)试管口不要朝向实验者 (D)试管底部紧贴烧杯底部 5供实验用的花生种于必须提前浸泡 ( ) (

12、A)l2d (B)34d (C)12h (D)34h 6某学生在显微镜下观察落花生种叶的切片，当转动细准焦螺旋时， 有一部分细胞看得清晰另一部分细胞较模糊，这是由于 ( ) （A)反光镜未调节好 （B)标本切得厚薄不均 （C)细准焦螺旋未调节好 (D)显微镜物镜损坏 D D B 7将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和 洗出的白浆用的试剂分别是( ) （A)碘液苏丹染液 （B)双缩脲试剂，碘液 （C)亚甲基蓝溶液、苏丹染液 （D)碘液、斐林试剂 8与硫酸铜溶液在碱性环境中反应，生成紫色物质的是 ( ) （A)淀粉 （B)脂肪 (C)蛋白质 (D)核酸 9.下列试剂能与脂肪发

13、生颜色反应的是 ( ) (A)斐林试剂 (B)苏丹 (C)双缩脲试剂 （D)硫酸铜 B C B l0在显微镜下观察花生种子经处理好的装片时，要寻找切片 的 。 11.现有下列材料，梨，韭莱叶、胡萝卜、黄豆，花生种子， 小麦种子其中适合于鉴定还原糖的是 ，理由是 小麦种子不如花生种子更适合用 来鉴定脂肪，这是因为虽然小麦种子 含量很高但不适 合用来鉴定 ，因为 。 韭菜叶内含有大量的可溶性单糖，由于 ，也不适于还原糖的鉴定。适合用来鉴 定蛋白质的是 因为 ，但实验前 ，须提前 ，这样容易 。 梨 组织细胞为白色，含糖量高 淀粉 可溶性还原糖 叶片中叶绿素颜色较深，对鉴定是的颜色反应其掩盖作用，

14、导致实验想象不明显 黄豆 黄豆种子蛋白质含量较高 浸泡12d研磨成浆 淀粉是非还原性糖且不溶于水 最薄处 12鉴定花生种子叶存在脂肪时，所用的试剂是 溶液，用物理方法鉴定脂肪的存 在叙述鉴定方法 烘烤花生种子后，把子叶放在白纸上用手挤压， 白纸上出现透明的油迹，说明子叶中含脂肪。 苏丹或苏丹 13利用所掌握的实验原理，鉴定家兔血液中有葡萄糖 的存在提供的药品材料：硫酸铜、氢氧化钠、柠檬酸 钠、新鲜的兔血，请设计操作方案并说明结果。 (1)新鲜兔血中加入柠檬酸钠(抗凝剂)，离心提取血浆上 清液。 (2)配制斐林试剂：一定浓度的CuS04(甲液)和NaOH(乙 液)混合呈蓝色的斐林试剂。 (3)兔血的上清液中加入斐林试剂，在沸水中加热，出现 砖红色。 结论：证明兔血中有糖的存在。