临床标本的留取.

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1、临床常见微生物标本的临床常见微生物标本的 采集和运送采集和运送 检验科微生物实验室检验科微生物实验室 微生物检验标本的特殊性微生物检验标本的特殊性 n n 标本采集标本采集时效性时效性 n n 抗生素和消毒剂的抗生素和消毒剂的干扰干扰 n n 环境微生物和机体正常菌群的环境微生物和机体正常菌群的污染污染 n n 标本标本送检时间送检时间 n n 标本标本来源多样来源多样 检验过程中各阶段检验过程中各阶段 对检验结果的影响程度对检验结果的影响程度 检验结果出现误差的原因并不全是来自于实验室检验结果出现误差的原因并不全是来自于实验室 检测环节而检验结果检测环节而检验结果 没有正确指导诊断也不能没有

2、正确指导诊断也不能 完全归咎于检验本身完全归咎于检验本身 微生物培养标本采集送检的基本原则 1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂 。 6.送检标本应注明来源和检验目的 n n 标本采集与运送的正确、及时与否直接关标本采集与运送的正确、及时与否直接关 系到微生物检验结果的可靠性和阳性率高系到微生物检验结果的可靠性和阳性率高 低低 n n 不合格的标本或不合适的保存、运送方式不合格的标本或不合适的保存、运送方式 必定导致不准确的结果，从而影响临床诊必定导致不准确的结果，从而影响临床

3、诊 断，延误患者治疗断，延误患者治疗 n n 业界共识：业界共识：Garbage in,Garbage out !Garbage in,Garbage out ! 因此有必要规范微生物标本的采集与保存、因此有必要规范微生物标本的采集与保存、 运送方法，保证微生物检验的质量。运送方法，保证微生物检验的质量。 临床微生物标本的种类 带菌体液 痰 尿液 粪便 咽拭子 其他 无菌体液 血液 脑脊液 关节腔积液 胸腹水 其他 微生物实验室常被称为3D实验室（Dirty 、Dump、Dangerous） 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 血培养指征血培养指征 n n 患者出现寒战，体温超过 患者出现寒

4、战，体温超过3838或低体温或低体温 ，怀疑血流感染时，尤其存在以下情况时，怀疑血流感染时，尤其存在以下情况时 ，应抽血做细菌和真菌培养：医院内肺炎，应抽血做细菌和真菌培养：医院内肺炎 ；留置中心静脉导管超过；留置中心静脉导管超过72h72h；感染性心内；感染性心内 膜炎；骨髓炎；有严重基础疾病、免疫缺膜炎；骨髓炎；有严重基础疾病、免疫缺 陷伴全身感染症状；临床医生怀疑有血流陷伴全身感染症状；临床医生怀疑有血流 感染可能的其他情况。感染可能的其他情况。 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 采血时机采血时机 n n 一旦怀疑有血流感染可能，应立即采 一旦怀疑有血流感染可能，应立即采 血做血培养

5、，最好在抗菌治疗前或停用抗血做血培养，最好在抗菌治疗前或停用抗 菌药物菌药物24h24h后，尽可能在寒战、发热初期时后，尽可能在寒战、发热初期时 采集。采集。 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 采血流程采血流程 （为防止血培养污染，请先执行手卫生！）（为防止血培养污染，请先执行手卫生！） n n （1 1）消毒）消毒 n n 培养瓶消毒程序：弃去瓶顶塑料帽，用培养瓶消毒程序：弃去瓶顶塑料帽，用 75%75%乙醇棉球消毒培养瓶橡皮塞，待干燥乙醇棉球消毒培养瓶橡皮塞，待干燥6060秒后秒后 使用。使用。 n n 皮肤消毒程序：用皮肤消毒程序：用消毒液消毒液从穿刺点向外画从穿刺点向外画 圈消毒，

6、至消毒区域直径达圈消毒，至消毒区域直径达5cm5cm以上，待消毒液挥以上，待消毒液挥 发干燥后发干燥后( (常需常需30s30s以上以上) )穿刺采血。穿刺采血。 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 静脉穿刺和培养瓶接种静脉穿刺和培养瓶接种 n n 成人用注射器无菌穿刺取血后，排尽针头内 成人用注射器无菌穿刺取血后，排尽针头内 空气，直接注入血培养瓶，勿换针头空气，直接注入血培养瓶，勿换针头( (如果行第二如果行第二 次穿刺或用头皮针取血时，应换针头，先注于厌次穿刺或用头皮针取血时，应换针头，先注于厌 氧培养瓶，避免注入空气，然后注入需氧培养瓶氧培养瓶，避免注入空气，然后注入需氧培养瓶 ，轻

7、轻混匀以防血液凝固。成人瓶每瓶，轻轻混匀以防血液凝固。成人瓶每瓶8-10ml,8-10ml,儿儿 童瓶每瓶童瓶每瓶1-3ml1-3ml。采血量不足时应优注入需氧瓶中。采血量不足时应优注入需氧瓶中 。近年来，临床普遍采用负压血培养瓶，使用采。近年来，临床普遍采用负压血培养瓶，使用采 血器将血从患者静脉直接吸入血培养瓶，减少污血器将血从患者静脉直接吸入血培养瓶，减少污 染环节（染环节（采血时培养瓶位置应低于采血点，防止采血时培养瓶位置应低于采血点，防止 负压不足时培养瓶内液体倒流入血管负压不足时培养瓶内液体倒流入血管）。）。 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 n n 注意事项注意事项 n n

8、特殊部位或采集多套标本时应在血培养瓶上注 特殊部位或采集多套标本时应在血培养瓶上注 明采血的部位（如中心明采血的部位（如中心V V、左侧肘、左侧肘V V等）。等）。 n n 从静脉采血，不建议从动脉采血。采血部位通 从静脉采血，不建议从动脉采血。采血部位通 常为肘静脉，疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或常为肘静脉，疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或 股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处 采血。除非怀疑有导管相关的血流感染，否则不采血。除非怀疑有导管相关的血流感染，否则不 应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管易被皮应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管易被皮

9、 肤正常菌群污染。肤正常菌群污染。 n n 采血过程中绝对不可用手指触摸采血点采血过程中绝对不可用手指触摸采血点 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 n n 采血次数：对于成年患者，应该同时分别不同部位采集 采血次数：对于成年患者，应该同时分别不同部位采集 2-32-3套血标本（一套为一瓶需氧一瓶厌氧），在不同部位套血标本（一套为一瓶需氧一瓶厌氧），在不同部位 分离到同样菌种才能确定是病原菌。儿童由厌氧菌引起的分离到同样菌种才能确定是病原菌。儿童由厌氧菌引起的 血流感染非常罕见，一般无需常规做厌氧培养。血流感染非常罕见，一般无需常规做厌氧培养。 n n 采血后采血后3-53-5天内一般不需重

10、复采血培养天内一般不需重复采血培养 n n 细菌性心内膜炎：在细菌性心内膜炎：在24h24h内取血内取血3 3次，每次间隔不少于次，每次间隔不少于 30min30min；必要时次日再做血培养；必要时次日再做血培养2 2次。次。 采血套数及血量采血套数及血量 1 1套（套（20ml20ml）2 2套（套（40ml40ml）3 3套（套（60ml60ml） 检出率检出率 65%65%80%80%96%96% CLSI指南：血培 养的原则和流程 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 n n 采血量：采血量： n n 成人每次每培养瓶采血成人每次每培养瓶采血8 810ml10ml，婴幼儿每，婴幼儿每

11、次每培养瓶采血次每培养瓶采血1-3ml1-3ml。采血量过少会明显。采血量过少会明显 降低阳性率。一定量范围内每多降低阳性率。一定量范围内每多1ml1ml血液，血液， 阳性率增加阳性率增加3.6%,3.6%,并非越多越好，超过一定并非越多越好，超过一定 量血液会稀释培养基，使之无法中和血中量血液会稀释培养基，使之无法中和血中 的抑制物质（抗体、补体、抗生素等）的抑制物质（抗体、补体、抗生素等） 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 n n . .运送要求运送要求 n n 所有标本采集后都应立即送往实验室 所有标本采集后都应立即送往实验室 ，最好在，最好在2h2h内。如果不能及时送检，宜置内。如

12、果不能及时送检，宜置 于室温环境。血培养瓶送到检验科放入培于室温环境。血培养瓶送到检验科放入培 养箱前，养箱前，切勿暂存于冰箱内切勿暂存于冰箱内。 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 送检标本条形码请竖贴于送检标本条形码请竖贴于 培养瓶上的方框中培养瓶上的方框中 瓶身本身的条码是用瓶身本身的条码是用 来被机器识别之用，来被机器识别之用， 所以粘贴的条码切勿完所以粘贴的条码切勿完 全遮盖原有的瓶身条码。全遮盖原有的瓶身条码。 不同部位采集的标本应不同部位采集的标本应 在瓶身上手写标明位置。在瓶身上手写标明位置。 血液培养标本的采集血液培养标本的采集 n n 安全防护：放标本的容器必须防漏，禁止

13、安全防护：放标本的容器必须防漏，禁止 将渗漏的标本送往实验室。将渗漏的标本送往实验室。 导管相关血流感染导管相关血流感染(CRBSI)(CRBSI) n n 送检指征：疑似患者有动静脉插管；送检指征：疑似患者有动静脉插管； 血培养出细血培养出细 菌是皮肤正常菌或假菌血症的常见菌；菌是皮肤正常菌或假菌血症的常见菌； n n 培养方案：培养方案： 1) 1) 拔除导管拔除导管: : 至少两份外周血培养至少两份外周血培养+ +导管尖端培养；导管尖端培养； 2) 2) 保留导管保留导管: : 至少至少1 1份外周血培养份外周血培养+1+1份导管血培养，份导管血培养， 采血间隔时间采血间隔时间5min;

14、5min; n n 诊断依据：诊断依据： 外周血、导管血、导管尖端培养是同外周血、导管血、导管尖端培养是同 一种菌一种菌; ; n n 血培养有不同的阳性报警时间血培养有不同的阳性报警时间 （ 2h 2h ） CRBSICRBSI标本采标本采 集集 n n 外周血培养：经外周静脉穿刺采血。外周血培养：经外周静脉穿刺采血。 n n 导管血培养：从导管中或静脉留置口隔膜导管血培养：从导管中或静脉留置口隔膜 采血。采血。 n n 导管尖端培养：导管尖端培养： 导管周围皮肤消毒导管周围皮肤消毒 无菌剪切导管末端无菌剪切导管末端( (约约5cm)5cm) 标本装无菌管送检标本装无菌管送检 无菌管应无菌管

15、应立即送检，立即送检，防干燥；防干燥； 痰标本采集与运送痰标本采集与运送 细菌室每天收到的标本中，以咳痰标本数细菌室每天收到的标本中，以咳痰标本数 量最多，这也是细菌检验人员花费时间，量最多，这也是细菌检验人员花费时间， 精力最多的标本类型，但目前临床上最不精力最多的标本类型，但目前临床上最不 认可的也正是痰的细菌检验报告认可的也正是痰的细菌检验报告 痰标本采集与运送痰标本采集与运送 n n 一般原则一般原则 n n （ （1 1）采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。）采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。 n n （ （2 2）最好在清晨采集标本。多数患者在清晨痰较多）最好在清晨采集标

16、本。多数患者在清晨痰较多 ，且含菌量也多，尤其是对平时痰量少的患者，清晨采痰，且含菌量也多，尤其是对平时痰量少的患者，清晨采痰 相对容易。相对容易。 n n （ （3 3）对于普通细菌性肺炎，如果能采集到比较理想）对于普通细菌性肺炎，如果能采集到比较理想 的痰液时建议一个检验周期（的痰液时建议一个检验周期（4 4天）内只送天）内只送1 1次痰标本，不次痰标本，不 必连续送检，更不建议必连续送检，更不建议24h24h内多次采样送检，除非痰液外内多次采样送检，除非痰液外 观性状出现改变。观性状出现改变。 n n （ （4 4）怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集）怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3 3天清晨痰液天清晨痰液 送检。送检。 痰标本采集与运送痰标本采集与运送 采集方法采集方法 n n 自然咳痰法与雾化导痰法自然咳痰法与雾化导痰法 n n 嘱咐患者留取前摘去牙托，清洁口腔，如刷牙嘱咐患者留取前摘去牙托，清洁口腔，如刷牙 后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力自气管深后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力自气管深 部咳出痰液，置无菌容器内，最佳痰液采集量为