《脾气虚证及固脱益视汤对视网膜脱离复位后细胞结构及视功能影响的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《脾气虚证及固脱益视汤对视网膜脱离复位后细胞结构及视功能影响的实验研究（57页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、陕西中医学院 硕士学位论文 脾气虚证及固脱益视汤对视网膜脱离复位后细胞结构及视功能 影响的实验研究 姓名：张妍春 申请学位级别：硕士 专业：中西医结合眼科学 指导教师：金文亮;朱赛林 20040501 婴! 翌壅圭望塞一j 童兰 中文摘要 目的：观察脾气虚证这一病理状态对视网膜脱离复位后视网膜组织细胞形态结构 和视功能恢复的不良影响以及中药固脱益视汤对该影响的减轻作用，进。步探讨 可能的作用机理。 内容及方法：采用中医证病结合的科研思路，选用耗气破气加饥饱失常复合因素 造“脾气虚证”动物模型，在此基础上选用视网膜下注射透明质酸钠方弦建立视网 膜脱离自动复位模型，设实验兔空白对照维( 正常对照组
2、) 、视网膜脱离自动复 位模型对照组( 以卜- 简称R D 对照组) 、脾气虚型视网膜脱离自动复饪组( 以F 简 称气虚组) 、灌服中药固脱益视汤治疗的气虚兼视网膜脱离自动复位组( 以卜简 称治疗组) ，于术前、术后l O 、2 0 、3 0 天分期观察实验兔的体重、体温，活动等 宏观指标以及血清木糖、S O D 、M D A 值，闪光视网膜电图( F - E R G ) ，用光镜、透射 电镜观察术后l o 、2 0 、3 0 天视网膜组织细胞结构及超微结构的变化，运用原位凋 亡过氧化物酶法( T U N E L ) 标记视网膜的凋亡细胞，光镜下记数。 结果：( 1 ) 脾气虚组及治疗组在脾气
3、虚造模因素开始后1 周全面出现脾气虚证宏 观症状体征，术前检查D 一木糖吸收率降低，脾气虚组兔维持至实验结束，治疗组 药物治疗后症状逐渐好转。D 一木糖吸收率明显升高，接近或超过R D 对照组。 ( 2 ) 眼底检查、B 超驶0 C 1 检查表明术后视网膜均有脱离，呈灰白色隆起4 5 D ， 范围达5 0 - 6 0 ，大部分模型眼R D 维持3 8 天后均自动复位。 ( 3 ) 脾气虚组血清M D A 升高明显( P O 0 5 ) 。见表6 。 表6正常兔眼E R e , ( 1 2 只跟) X S t P 视杆细胞反应a 波振幅 2 6 5 7 8 + _ t 4 1 7 70 3 2
4、3 1 0 0 0 ! I l 秆细胞反应b 波振幅1 9 4 2 3 1 2 3 4 7 2 0 6 3 4 0 8 1 6 最人反应a 波振幅 7 5 6 1 2 2 0 8 1 90 6 2 4 0 8 3 l 最大反应b 波振幅 2 5 4 3 0 0 _ + 4 9 2 0 10 5 2 3 0 9 4 7 单次闪光视锥细胞a 振幅1 7 8 9 3 6 8 4 4 0 6 2 2 0 8 3 3 单次闪光视锥细胞b 振幅 i 3 2 6 3 4 5 5 7 8 21 1 3 60 1 5 1 视轩细胞反应a 波峰时2 0 5 0 2 2 4 2 2 0 8 5 0 0 4 6 5
5、视杆细胞反应b 波峰时 5 L2 5 3 2 9 7 3 0 6 7 3 0 7 5 6 最大反应a 波峰时 1 3 3 5 4 1 8 9 20 6 2 6 0 8 2 9 最大反应b 波峰时3 4 5 4 9 2 0 8 2 0 4 8 5 0 9 7 3 单次闪光视锥细胞a 波峰时 1 4 1 5 2 2 7 3 10 6 5 4 0 8 0 0 单次闪光视锥细胞b 波峰时3 6 9 0 0 2 6 1 0 0 6 5 3 0 7 8 8 O P s 振幅 1 0 9 3 1 4 2 8 9 9 40 7 6 9 0 5 9 6 采用多因素方差分析对各不同实验组术后不同观察时间E R G
6、 各成分差异进行 统计学检查( 表7 ) 。从恢复时间来看，最大反应b 波振幅、单次闪光视锥细胞b 堡堕塞皇堡兰 一一! 兰 波振幅、壤大反廊a 波峰时、单次闪光视锥细胞b 波峰时有显著性差异( P ( O 0 5 ) ； 各组间比较，最大反应a 波振幅、最大反应b 波振幅、单次闪光视锥细胞a 波振幅、 单次闪光视锥细胞a 波峰时有显著性差异( P O 0 5 ) 。 表7以分组和时间为对象对E R G 各成分统计学检验 G R O U PT I M E FPF P 视杆细胞反应a 波振幅2 4 2 8 0 1 1 52 4 5 80 1 1 2 视杆细胞反应b 波振幅 3 0 6 10 0
7、7 02 1 7 0 0 0 8 3 最大反应a 波振幅8 1 0 50 0 0 2 1 7 5 20 1 8 7 最大反应b 波振幅 9 6 t O0 0 0 0t 3 3 t 90 0 0 0 单闪锥细胞a 波振幅 3 9 5 90 0 2 7 2 5 8L0 0 8 9 单闪锥细胞b 波振幅 2 1 5 90 t 2 96 8 7 l 0 0 0 3 视杆细胞反应a 波峰时0 3 5 8 0 7 0 41 8 3 90 1 9 1 视杆细胞反应h 波峰时3 4 2 9 0 0 8 00 3 5 70 7 0 5 最大反应a 波峰时 2 3 9 50 1 0 54 1 2 60 0 2 4
8、 最大反应b 波峰时0 1 2 00 8 8 7 1 5 5 20 2 2 5 单闪锥细胞a 波峰时 3 7 3 40 0 3 30 2 4 30 7 8 6 单闪锥细胞b 波峰时4 1 t 40 0 2 4 4 0 0 60 0 2 6 O P s 振幅 1 2 0 7 20 0 0 00 2 6 9 0 7 6 6 对于有统计学意义的数据，进一步进行两两比较( 表8 ) 。 表8 各实验组术后不同观察时间E R G 各成分值 R D 组气虚组治疗组 爿询呋书动哽术乱厌术同呋焖动沃术宙【厌术a 跃术秀獗术鳜 黝凰1 8 2 蛆2 8 64 1 6 3 5 地2 0 2m 6 1 8 丑3 6
9、 5 她1 8 7 缸3 8 86 1 5 4 5 趣黼王4 亚1 z 国& 3 51 - 6 9 12 3 舱醢恐留规6 4丛1 6 硕士研究生论文 参考文献 最大反应1 6 1 2 3 51 7 4 蠕2 3 4 4 7 0 9 6 2 2 81 1 9 1 3 81 6 3 8 9 61 2 1 5 2 01 3 5 3 4 32 2 L1 5 0 碗报幅 蕊3 L 5 2 1 勉啦7 1 驰啦盛3 4 驵0 9 1 叠1 5 1 甑3 黼7 3 5 s 2 7 6 鼢1 4 9 9 0 05 8 0 6 37 2 g B 89 7 4 5 58 8 2 9 88 8 i f 51 ,
10、5 6 3 4 5 胞嗡| 赫i 2 9 3 8 3 L 2 7 6 2 61 3 3 8 m 2 0 l q1 6 缀3 8 + 4 2 8 02 6 1 9 戢贼 托2 6 51 Z O f f ) l Z 2 0 01 & l 磬 扭9 0 0拖2 0 0垃1 3 3 1 2 6 0 01 2 8 0 0 碗自略砖 ( x 7 5 a 6 8z 5 51 弱士n 3 81 4 1 n 5 61 0 6土3 3 9 篥砌1 & 0 0 0 2 0 7 0 01 2 6 0 01 7 8 0 0 1 7 3 0 0 1 4 2 0 0 l & 7 “ 3 31 7 5 0 01 3 6 0
11、0 胞积摊对8 0 B 2 & l l4 7 0 + 3 6 0+ 3 。6 8 3 就L 0 0n 5 7 辑蝴勉0 0 0 鼹7 0 03 5 O f f ) 瓿蚵3 4 ：2 0 0 ：j & 6 0 03 3 翻B 盟4 0 0 弛4 0 0 胞积静时2 驼2 7 8土2 弱_ + L 6 7 2 7 4 1 璐 2 踟 3 2 71 1 3 l 振1 3 L 羽( 1 1 c L 麟1 0 5 麟骶3 1 5 飘硒5 5 0 1 5 1 1 7 2 5 2l l L W _ A 随8 3 0 幅 融国l L 豫鞭挖m 昆聂4 1 - 4 - 3 & ( ；7 士蛆0 7 3 f i
12、l 6 4 f i0 6 术后不同观察时间E R G 恢复情况如表9 所示。随恢复时间的延长，最大反应b 波振幅、单闪锥细胞b 波振幅、最大反应a 波振幅逐渐升高，单闪锥细胞a 波峰时 逐渐缩短。 表9 术后不同时问E 隔恢复情况与正常对照组比较 分别对术后不同观察时问各实验组E R G 不同成分变化进行比较( 表1 0 ，I l ， 1 2 ) ，发现各不同时期组兔最大反应b 波振幅、单闪锥细胞b 波振幅、最大反应。 1 4 - 硕士研究生论文 参考文献 波振幅、O P s 振幅均较其它两组下降明显；组兔以上各值在术后l O 天、2 0 天较 m 组稍有恢复，到第3 0 天恢复明显。 表1
13、0术后1 0 天各实验组E R G 恢复1 R 况与正常组比鞍 G R O U P I 一* 目月m I I = R D m = 1 m g R c 目一m 目 表1 1 术后2 0 天各实验组E R 嗽篓情况与正常组比较 G R O U P I 。正常对熙组 】I ；R D 组l 一气虚型R D 组 I V 一治疗组 衰12 术后3 0 天各实验组E R 嗽复情况与正常塞且 匕较 G R O U P 1 耳正书列麒组I l 互R D 组 ；气虚型R o 蛆 I v = 治疗组 1 5 。 堡堡壅生堡茎 2 5 5 组织病理学检查结果 2 5 5 1 光镜检查结果 正常对照组( I 组) ：光
14、镜下清晰可见视网膜色素上皮层、视杆与视锥层、 外核层、外丛状层、内核层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层等结构，各 层细胞及组织排列整齐，层次结构清晰。色素上皮由单层色素上皮细胞构成，里 极性规则排列；光感受器细胞外节与与色素上皮细胞顶部微绒毛紧密连接。外节 及内节排列整齐，内外节界限可见，外核层有6 8 层视细胞，内核层有3 4 层神 经细胞，均形态正常，无变性。神经节细胞数量和排列正常，无空泡样变性，神 经纤维层清晰m n l l e r 细胞框架纤维结构完整。( 图4 ，见附页2 ) 术后1 0 天： I 【组：光镜卜所有眼视网膜均复位。鼻卜方发生R D 并复位的视网膜：R P E 层
15、 基本正常，视锥视杆层、内外核层、网状层结构排列紊乱、较多空泡样变性，细 胞变大、水肿，有核固缩现象，神经节细胞轻度改变，表现为部分细胞有水肿， 空泡变性，神经纤维层有空泡样变性，部分部位视网膜上_ u l l e r 细胞框架纤维消 失( 图5 ，见附页2 ) 。鼻上方未发生R D 区域视网膜：R P E 层、光感受器细胞层、视 细胞层排列结构基本正常，双极细胞排列轻度紊乱双极细胞、节细胞均可见空 泡样变性及水肿，内外网状层结构正常。( 同6 ，见附页2 ) 组：光镜下所有眼视网膜均复位。鼻下方发生R D 并复位的视网膜：视网膜 厚度明显增加，各层均有水肿。色素上皮细胞肥大、增生、游离，色素颗粒减少。 光感受器外节结构显著紊乱、断裂缺失、参差不齐，内节疏松水肿，空泡变性。 各层细胞均可见细胞肿胀、空泡变性，尤以双极细胞层和节细胞层明显内、外 核层细胞均可见明显核固缩现象。内外网状层结构紊乱，疏松水肿，m U l l e r 细胞 框架纤维结构紊乱( 图7 ，8 ，见附页2 ，3 ) 。鼻上方未发生R D 区域的视网膜：色 素上皮层无明显改变。光感受器内节疏松水肿，外节基本无变化。内外核层细胞 排列紊乱，视
