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1、学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行的研 究工作及所取得的研究成果。据我所知，除文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也 不包含为获得福建中医学院或其他教育机构的学位或证书而使用过的材 料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标 明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 _ _ ，- - ， 学位论文作者签名：南n 踊 签字日期：2 0 叮年J 月2 7 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解福建中医学院有关保留和使用学位论文的规 定，即：研究生在校攻读
2、学位期间论文工作的知识产权单位属福建中医学 院。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版； 允许学位论文被查阅和借阅。本人授权福建中医学院可以公布学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以允许采用影印、缩印或其 它复制手段保存、汇编学位论文。( 保密的学位论文在解密后遵守此规定) 本学位论文属于( 必须在以下相应方框内打“一，否则按一律按“非保密论文一处理) ： 1 、保密论文：口本学位论文属于保密，在三生密后适用本授权 书。 2 、非保密论文：口本学位论文不属于保密范围，适用本授权书。 本人签名： 导师签名： 签字日期：2 0 。8 年r 月叩日 签字日期：2
3、0 ，r 年厂 月) 夕日 ， ： J I 。 渡 、 l - 目录 | | ! l m I j I 删I j | f I I I I | 1 1 4 1Y 19 9 5 2 3 3 中文摘要1 英文摘要3 1 L j L 刖舌”“”“”“一”“”一”o oO “5 正文 实验资料7 实验方法9 结果- 1 0 分析与讨论1 3 结论2 0 参考文献2 1 致谢2 4 附录? 2 5 文献综述3 0 作者简历3 6 ，参_ 胰岛素样生长因子一1 在脑出血后脑组织中的表达 及与中风闭、脱证的关系研究 高丽丽 中文摘要 目的：本课题旨在通过观察脑出血( I C H ) 患者血肿周围组织中胰岛素样生
4、长因子 一1 ( I G F 1 ) 的表达情况，来探讨其在脑出血后继发性损伤中的作用；研究中医出血中风 闭脱证与I G F 一1 的表达、出血量、美国国立卫生研究院卒中量表( N I H S S ) 评分及格拉 斯哥昏迷评分( G l a s g o w 评分，G C S ) 的关系，为中医辨证提供客观指标及分子生物学水平 的依据，为探索中西医结合治疗脑出血的新途径提供理论指导。 资料与方法：临床收集既符合脑出血的诊断要点，又须根据中风闭证和脱证标准 辨证为阴闭证、阳闭证、脱证，经外科手术的住院病人共计2 8 例，其中男性1 4 例，女 性1 4 例，年龄范围( 6 1 1 8 8 8 6
5、) 岁，病程6 ( 4 9 ) h ( 非正态分布) 。其中阳闭证 1 3 例，男7 例，女6 例，年龄范围( 6 2 3 1 1 0 7 1 ) 岁，病程( 6 8 5 3 4 1 ) h ；阴闭 证8 例，男4 例，女4 例，年龄范围( 6 0 0 0 4 - 7 4 5 ) 岁，病程( 6 7 5 3 9 2 ) h ；脱证 7 例，男3 例，女4 例，年龄范围( 6 0 4 3 7 3 2 ) 岁，病程( 7 o o 3 8 3 ) h 。正常对 照组6 例，取自正常人脑组织标本。脑出血组取自血肿清除术中脑棉表面吸附的脑组织 碎片。并进行G C S 、N I H S S 评分；根据“多
6、田公式”计算出血量；采用免疫印迹法检测 血肿边缘区I G F 一1 的表达。 结果： 1 、I C H 患者血肿周围脑组织中I G F - 1 表达明显高于正常对照组，差异具有统计学 意义( P 阳闭。 + 3 、I C H 患者中医阴闭、阳闭、脱证组之间出血量、N I H S S 评分及G C S 评分有统计学 差异( P 阴闭 阳闭；后者相反。 4 、I C H 患者血肿周围区组织I G F - 1 含量与N I H S S 呈正相关，相关性有统计学意义 ( P 0 1 。其性别经卡方检验后，阳闭组、阴闭组及脱证组两两比较P 值亦均 0 1 。7 提示：I C H 组内无显著性差异，具有可
7、比性。 二、I C H 患者I G F - 1 表达水平与对照组的比较 用免疫印迹法检测I G F - 1 的表 7 达，结果见图1 ，进行吸光度分析， 测定灰度值，再计算光密度相对值 = I G F - 1 表达强度0 - - a c t i n 表达 强度，发现出血组患者I G F - I 表达 水平明显高于正常对照组( 见表2 ) 。 出血组 图l I 郇一l 口- 扯t i n 在所纳入标本的时间段内，发病3 小时即可检测到I G F 一1 的高表达，这种高表达一直持 续到所纳入的最长时间1 4 小时。 表2 sI O t 患者I G F - I 表达水平与对照组的比较 ( i 签)
8、表2 显示：经两独立样本T 检验后P 阳闭。提示：I G F 一1 表达高低水平与中医证型有一定的关系，脱证组I G F _ l 表达最高，阳闭组表达最低。 四、I C H 患者中医阴闭、阳闭、脱证三证出血量、G C S 评分、N I H S S 评分的比较： 4 1I C H 患者中医阳闭组、阴闭组及脱证组之间出血量的比较 表4 ：I C I 患者中医阳闭、阴闭、脱证组之间出血量缸1 ) 的比较( x 签) 表4 显示：以上三组证型经单因素方差分析后，两两对比P 均 阴闭 阳闭。提示： 出血量可能为中医证型的判定提供客观依据。 4 2I C H 患者中医阳闭组、阴闭组及脱证组之间N I H
9、S S 评分的比较 表5 lI C H 患者中医阳闭、阴闭、脱证组之间N I I I S S 评分的比较( 冤士s ) 表5 显示：以上三组证型经单因素方差分析后，两两对比P 均 阴闭 阳 闭。提示：N I H S S 评分可能为中医证型的判定提供客观依据。 4 3I C H 患者中医阳闭组、阴闭组及脱证组之间G C S 评分的比较 福建中医学院硕士学位论文 表6 显示：p A A ：- - 组证型经秩和检验后，两两对比P 均 阴闭 脱证。提示：G C S 评分可能为中医证型的判定提供客观依据。 五、I C H 患者I G F - 1 表达与出血量、N I H S S 评分及G c s 评分之
10、间的相关性分析 表7 lI C H 患者I G F - I 与出血量、N I H S S 评分及G C S 评分之间的相关性分析 表7 显示：经S p e a r m a n 相关性统计，( 1 ) I G F - I 表达量与出血量相关性：r 值= 0 7 2 5 ， 说明I G F - I 的表达与出血量呈正相关，相关性具有统计学意义( P 阳闭；脱证组血肿周围脑组织的I G 卜l 表达也明显高于闭证组，表达情况由高 到低顺序为脱证 阴闭 阳闭，差异均有统计学意义( P 阳闭。已有研究证实，I G F - 1 在脑出血后表达的 动态变化过程与临床上脑出血病情恶化程度相二致，且I G F -
11、 1 表达与细胞凋亡程度呈正 相关，提示I G F - 1 参与脑出血后细胞凋亡的损伤过程，推测I E H 后机体自身保护机制通 过I G F - 1 的高表达来逆转神经损伤。因此，病情越重，I G F - 1 表达量越高，中医症候即 表现为由阳闭到阴闭再到脱证的不同证型，与我们的研究相同。由此说明：I G F - 1 可能 在一定程度上反映了中医闭脱证的实质，表达情况对中风闭、脱证微观辨证有一定的指 导意义。监测I C H 患者急性期血清或脑组织中的I G F - 1 浓度，能从另一侧面对病情轻重 - 1 7 ，A 福建中医学院硕士学位论文 I I I II I I I _ - _ _ -
12、- - _ - _ - _ - _ - _ _ _ - - _ _ _ - - - _ _ _ _ _ - _ L _ 和预后做出评价。但I G F l 的高表达是缓慢且不足量的，并不能在有限的时间内对大量 凋亡细胞起到保护作用，若在有效时间窗内给予外源性I G F - 1 能明显改善患者预后，提 高神经功能。 六、出血量与I C H 中风闭脱证的关系 c T 作为脑出血后的首选诊断检查，对中枢神经系统疾病的诊断有重要的意义。应用 于中医的研究，其为微观辨证提供了最直接、最客观的依据。田锦林等 2 9 1 的研究指出， 出血部位、出血量与证型之间存在密切关系，C T 通过对出血部位和出血量的判
13、断，为临 床进行辨证论治提供重要的指导意义。王泉忠 3 0 i 研究T 4 6 例脑出血患者C T 表现与闭脱证 关系后认为，中风闭、脱证的一个重要客观指征就是血肿破入环池、脑室系统或血肿体 积较大。分析可能由于破入环池、脑室系统的血肿或体积较大的梗塞灶改变脑脊液的粘 滞性，或由于血液粘滞、凝固在环池、脑室，使脑脊液的压力升高，造成脑干受压，阻 碍上行激活系统，出现闭、脱证。仝淼 3 1 1 的研究结果也显示，中医证型按出血量由多到 少依次排序为脱证 阴闭 阳闭。姚毅等【3 2 】研究表明，中经络证属中风轻证。在C T 表现 上，以小病变为主，即使病变范围较大，也多发生在其他脑叶，丘脑及脑干重
14、要生命中 枢则为小病变。中脏腑证属中风重证，在C T 表现上以大病变为主。中脏腑阳闭仅出现2 例，均为脑出血( 1 例在基底节，1 例在丘脑) 。其他脑叶病变很少出现阳闭，当病变范围 很大时，则直接表现为脱证。反映了中医的辨证分型与脑内出血量之间的关系，预示病 变的轻重，但与脑出血的具体部位无明显相关性。侯键等1 3 3 】对中风病急性期病灶C 1 - 进行 定量研究也显示，中脏腑脱证出血量最大，中脏腑阳闭证出血量最小，阴闭证出血量位 于两者之间。 本研究共收集既符合I C H 的诊断要点，又符合中风闭、脱证的病例2 8 例，经C T 验证， 脑出血量用“多田公式“ 计算，闭、脱证各组的出血量结果如表4 所示，差异具有统计 学意义，各证按出血量大小顺序排列为：脱证 阴闭 阳闭。提示出血量对中医证型的 判定有一定指导意义。 七、G C S 评分、N I H S S 评分与I C H 中风闭脱证的关系 G C S ( G
