《药用植物半夏的杀虫活性及毒杀机制研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《药用植物半夏的杀虫活性及毒杀机制研究（76页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 分类号： 学校代码：10373 密 级： 学 号：11015071103 硕士学位论文硕士学位论文 题题 目：目：药用药用植物半夏的杀虫活性植物半夏的杀虫活性 及毒杀机制研究及毒杀机制研究 论文作者：论文作者： 付付 士士 龙龙 指导教师：指导教师： 薛薛 建建 平平 教教 授授 专业名称：专业名称： 植植 物物 学学 研究方向：研究方向： 资源植物开发利用资源植物开发利用 淮北师范大学研究生处 二一三年六月 缩略语表缩略语表 Abbreviations 简写符号简写符号 英文全称英文全称 中文名称中文名称 DTNB 2-nitrobenzoic acid 2-硝基苯甲酸硝基苯甲酸 GSTs
2、 gultathione S transferases 谷胱甘肽谷胱甘肽-S-转移酶转移酶 AChE acetylcholinesterase 乙酰胆碱酯酶乙酰胆碱酯酶 CarE carboxylesterase 羧酸酯羧酸酯酶酶 MFOs mixed-function oxidases 多功能氧化酶多功能氧化酶 SOD OrgoteinSuperoxideDismutase 超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶 POD peroxidase 过氧化物酶过氧化物酶 CAT Catalase 过氧化氢酶过氧化氢酶 DMRT 邓肯氏复极差检验法邓肯氏复极差检验法 AFC50 antifeedant con
3、centration50 拒食中浓度拒食中浓度 LC50 Lethal Concentration 50 半致死浓度半致死浓度 OD optical delnsity 光密度光密度 Tris Tris 三羟甲基三羟甲基氨基甲烷氨基甲烷 PBS phosphate buffer saline 磷酸缓冲液磷酸缓冲液 -NA -Naphtholbenzein -萘酚萘酚 EDTA ethylene diamine tetraacetic acid 乙二胺四乙酸乙二胺四乙酸 DTT Dithiothreitol 二硫苏糖醇二硫苏糖醇 PMSF Phenylmethylsulfonyl fluoride
4、 苯甲基磺酰氟苯甲基磺酰氟 AChR anti- acetylcholinereceptorantibody 乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体 1O2 singlet oxygen 单线态单线态氧氧 SDS Sodiumdodecylsulfate 十二烷基硫酸钠十二烷基硫酸钠 I 药用药用植物半夏的杀虫活性及毒杀机制研究植物半夏的杀虫活性及毒杀机制研究 付士龙付士龙（植物学）（植物学） 摘 要 杀虫植物的研究在农药的发展史上占有重要地位，一些具有杀虫活性的植物很早就被加 工成农药被利用，但植物源杀虫剂更大的贡献则在于提供先导化合物，再进一步通过结构改 造、类推合成活性更高的化合物。中药在中国使用历史
5、悠久，其中许多中药同时还具有杀虫 活性。近年来，从中草药中发现新的杀虫活性化合物是我国杀虫剂研究领域的一个热点。 本论文以药用植物半夏块茎干粉的提取物为药剂，以农业重大害虫甜菜夜蛾为靶标对 象，对半夏杀虫活性物质的最佳提取方式进行比较，评价了半夏提取物对甜菜夜蛾的拒食活 性、触杀活性、胃毒活性、杀蛹活性、杀卵活性、产卵忌避活性及生长发育抑制活性等作用 方式，通过系统测定半夏提取物对甜菜夜蛾幼虫体内解毒酶活性、消化酶活性及保护酶活 性，探讨了半夏提取物对甜菜夜蛾的杀虫机制，取得了以下结果： （1）通过选取 5 种不同极性溶剂（甲醇、无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯及石油醚）和 3 种提取方式（室温浸渍法
6、、超声波提取法及索氏提取法）进行杀虫活性物质提取率的比较， 以对甜菜夜蛾幼虫的拒食活性作为杀虫活性指标，筛选出最佳的半夏杀虫活性物质提取方式 为以无水乙醇为溶剂、以索氏提取为提取方法。 （2）通过杀虫活性测定，结果表明，半夏乙醇提取物甜菜夜蛾具有多种作用方式。半 夏乙醇提取物对甜菜夜蛾具有较好的拒食活性，拒食活性随浓度升高而增强；对甜菜夜蛾 3 龄幼虫的触杀效果随着浓度的增加和时间的延长而提高，触杀作用表现较为缓慢，但对甜菜 夜蛾卵的毒杀效果较好，杀卵活性随着提取物浓度的提高而增强，各浓度间的校正死亡率均 差异显著（P0.05）。半夏乙醇提取物的对甜菜夜蛾 3 龄幼虫具有较好的胃毒活性，随着
7、处理时间的延长，各处理的校正死亡率随之升高，当处理 72 小时后，对甜菜夜蛾幼虫的半 致死浓度（LC50）为 63.268mg/ml，展现出较好的胃毒作用；对甜菜夜蛾幼虫生长发育具有 一定的抑制作用。半夏乙醇提取物对甜菜夜蛾有很强的产卵忌避作用，浓度越高，产卵忌避 作用越强。在非选择性和选择性试验处理后 24h，浓度为 100 mg/mL 乙醇提取物对甜菜夜蛾 的产卵忌避率分别为 78.34%和 72.95%。 （3）通过测定甜菜夜蛾幼虫的解毒酶、消化酶和保护酶活性来探讨半夏提取物的杀虫 II 机制，结果表明，半夏乙醇提取物对甜菜夜蛾乙酰胆碱酯酶(AChE)活性表现出先激活后抑制 的特征，随着
8、取食时间延长，体内乙酰胆碱酯酶活力逐渐降低，且差异显著（P0.05） ；对 甜菜夜蛾谷胱甘肽 S-转移酶活力、羧酸酯酶活性表现出较强的抑制特征，随着时间延长， 抑制活性逐渐加强；对甜菜夜多功能氧化酶活性表现出激活特性，在 6、12、24、48 和 72h 体内多功能氧化酶活力均显著高于取食正常叶片相同时间的个体（P0.05） 。半夏乙醇提取 物对甜菜夜中肠蛋白酶活性表现出抑制特性，处理甜菜夜蛾幼虫在 6、12、24、48 和 72h 中 肠蛋白酶活力均显著低于对照个体（P0.05） ；对中肠淀粉酶活性表现出激活特性，在 6、 12、24、48 和 72h 中肠淀粉酶活力均显著高于对照个体（P0
9、.05） ；中肠脂肪酶活性先升 高后降低。取食提取物处理叶片的甜菜夜蛾幼虫，体内超氧化物歧化酶活力均显著高于取食 正常处理叶片相同时间的个体（P0.05） ，体内过氧化物酶活力均显著低于相同时间的对照 个体（P0.05） ，体内过氧化氢酶活力也均显著低于相同时间取食正常叶片的个体（P 0.05） 。 以上结果表明，半夏乙醇提取物对甜菜夜蛾具有较好的杀虫活性，通过改变体内解毒酶 活性、消化酶活性及保护酶活性来干扰该虫正常代谢，进一步起到毒杀的作用。 关键词：关键词：半夏；杀虫活性；毒杀机制半夏；杀虫活性；毒杀机制 III Insecticidal activities and insectici
10、dal mechanism on extracts from Pinellia ternata Fu Shilong（botany） ABSTRACT Although the utilization of plant materials to protect field crops and stored commodities against insect attack has a long history, botanical pesticide plays a minor role in modern pesticide industry. In fact, insecticidal p
11、lant has given great contribution to modern pesticide in another aspect. Its well known that many important pesticides were man-made pesticides designed according to the natural products. Chinese herbal medicine has been used in clinic over two thousands years, many of them exhibit pesticidal activi
12、ties at the same time. Its an interesting research to find novel lead compounds from Chinese herbal medicine. In this thesis we used extracts from Pinellia ternate as insecticide and selected Spodoptera exigua as targeted pest to explore the new plant source pesticides, the insecticidal activities w
13、as conducted by evaluating antifeedant activity, contact activity, stomach poisoning , pupae-killing effects, ovicidal activity, oviposition deterrent action, inhibition of growth and development.To investigate the extracts insecticidal mechanism against Spodoptera exigua, the detoxification enzyme
14、activities, digestive enzyme activities and protective enzyme activities were tested respectively. The main results were as follows: (1)The insecticidal active composition were extracted by five species different polar solvents(methanol , ethanol, acetone, ethylacetate , petroleum ether) using three
15、 extraction methods(Soxhlet extraction, Utrasonic-extraction methods, method of dipping powered at room temperature). The result showed that the highest production rate was ethanol extract by soxhlet extraction, and the highest insecticide active parts of Pinellia ternate were extracted by ethanol a
16、s extracting solvents and using Soxhlet-extraction method respectively. (2)Results indicated that the extracts had many functional patterns against the larvae of Spodoptera exigua as anti-feeding,contacting toxicity,stomach poisoning and inhibiting growth activities. The higher concentration, the more obviously the effect on the pest was. The antifeedant activity of extra
