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1、论文质量承诺书 本人承诺：所交的学位论文均按答辩专家意见进行认真修改，文字和 图表均无错误，内容真实可靠，并经导师审核确认，最后定稿、装订成册， 论文书写和格式均按新修订的福建中医药大学关于研究生学位论文格式 的规定要求。本人愿意对论文的质量负责，且文责自负。 专业：1 幸面咣台恼彖学号：2 1 1 川伽l承诺人签字：强垒蕴 2 0 脚年6 月 g 日 导师承诺：本人己认真审核研究生的学位论文，该论文是在导师指 导下由研究生完成，并已按答辩专家意见进行修改，文字和图表均无错误， 内容真实可靠，论文书写和格式均按新修订的福建中医药大学关于研究 生学位论文格式的规定要求。本人承诺研究生所交的论文为
2、最后定稿论 文，并对论文质量负责。 导师签字： 事尚 2 0 么年多月目日 学位论文原创性声明J 嬲必燃 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行的研究工作及所 取得的研究成果。据我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不含任何其 他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得福建中医药大学或其他教 育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已 在文中以明确方式标明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名銎整撞 签字日期：2 0 f 甲年莎月日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解福建中医
3、药大学有关保留和使用学位论文的规定，即： 研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属福建中医药大学。学校有权保留并 向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许学位论文被查阅和借阅。本人 授权福建中医药大学可以公布学位论文的全部或部分内容，并编入有关数据库进行检 索，可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文( 保密的学位论文在 解密后遵守此规定) 。 1 、本学位论文属于( 必须在以下相应方框内打“ ，否则一律按“非保密论文“ 处理) ： ( 1 ) 保密论文：口本学位论文属于保密，在年解密后适用本授权书。 ( 2 ) 公开论文：囱本学位论文不属于保密范围，适用本授权书
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5、前言。1 1H ! J吾。 第一部分青娥方对去卵巢模鼠骨组织M M P 2 、9 、1 3 、O P G 、R A N K L 的 影响4 1 材料和方法一4 1 1 实验材料4 1 1 1 实验药物4 1 1 2 实验动物。4 1 1 3 实验试剂。4 1 1 4 实验仪器。5 1 2实验方法6 1 2 1 实验动物分组与造模6 1 2 2 药物干预与取材一6 1 2 3 指标检测7 1 2 3 1 骨密度测定7 1 2 3 2 血清E 2 含量检测。7 1 2 3 3 血清n 认C P 活力检测7 1 2 3 4 骨组织H E 染色及图像分析8 1 2 3 5 骨骼生物力学性能检测8 1
6、2 3 6 骨组织M M P 2 、9 、1 3 、O P G 、R A N K I ，m R N A 检测一8 1 2 3 7 骨组织M M P 2 、9 、1 3 、O P G 、R A N K L 蛋白检测1 1 2 统计学处理1 3 3 实验结果1 3 3 1 一般情况观察1 3 3 2 术后1 2 周大鼠P M O P 模型鉴定1 3 3 3 骨密度结果1 3 3 4 骨组织形态学结果1 3 3 5 骨生物力学结果1 4 3 6 血清E 2 结果一l5 3 7 血清T R A C P 活力结果1 5 3 8 骨组织M M P 2 、9 、1 3 、R A N K I ，l I l I
7、 斟A 和蛋白含量结果一1 6 3 9骨组织O P G m R N A 和蛋白含量结果1 6 I I 4 讨论2 0 4 1 去卵巢骨质疏松大鼠模型的建立2 0 4 2 青娥方对去卵巢骨质疏松模鼠破骨细胞性骨吸收的影响2 1 第二部分青娥方含药血清对体外培养破骨细胞的分化和骨吸收活性的响。 ：1 6 1 材料和方法2 6 1 1实验材料2 6 1 1 1实验药物2 6 1 1 2实验动物2 6 1 1 3 实验试剂2 6 1 1 4 实验仪器2 6 1 1 5 主要试剂的配制2 7 1 1 5 1 含1 0 胎牛血清的D M E M 培养液的配制2 7 1 1 5 2 细胞因子M C S F
8、和R A N K I 的配制2 7 1 1 5 3 含药血清的制备2 7 1 1 6 骨片的制备与处理2 7 1 2 实验方法2 7 1 - 2 1 破骨细胞培养2 7 1 2 2 实验分组2 8 1 2 2 1 青娥方含药血清对R A W 2 6 4 7 细胞诱导分化影响的分组2 8 1 2 2 2 青娥方含药血清对成熟破骨细胞骨吸收功能影响的分组2 8 1 2 3 破骨细胞的鉴定2 8 1 2 3 1 活体细胞的动态观察2 8 1 2 3 2T RA C P 染色2 8 1 2 4 破骨细胞计数2 8 1 。2 5 骨吸收陷窝观察2 9 1 2 6 细胞上清液中T R A C P 活力检测。2 9 1 2 7 细胞中P U I 、M i t f , N F A T c l 、T R A C P 、R A N K 、M M P 9 m R N A 检测2 9 2 统计学处理一3 0 3 实验结果3 0 3 1 破骨细胞鉴定3 0 3 1 1 活体细胞的动态观察3 0 3 1 2 T R A C P 染色3 0 3 1 3 骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色3 0 3 2 诱导培养2 d 、4 d 、6 d 时破骨样细胞计数结果一3 0 3 3 诱导培养2 d 、4 d 、6 d 时细胞中P U 1 、M i t f , N F A T c l m R N A 表达结果3 l 3 4 诱导培
