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1、富血小板血浆的临床应用 唐 都 医 院 穆 士 杰 目 录 *2 富血小板血浆概念Part 1 富血小板血浆发展历史Part 2 富血小板血浆制备方法Part 3 富血小板血浆成分特点Part 4 富血小板血浆临床应用及研究Part 5 概 念 *3 富血小板血浆 富血小板血浆凝胶 Platelet-rich plasma,PRP Platelet-rich plasma gel,PRG 全血通过梯度离心分 层后得到的富含血小 板的血浆部分，它含 有多种较丰富的生物 活性因子。 PRP被凝血酶等激活 物激活后形成的胶冻状 物，它具有完整的三维 结构和良好的组织相容 性的纤维蛋白支架。 PRP发
2、展历史 *4 19771977 19841984 19931993 19971997 Harkedeng 首次分离制备出PRP，将其用于 心外科手术后患者，取得良好的疗效。 Okuda等发现血浆中提取的富血小板血浆含 多种生长因子。 Hood等在PRP中加入凝血酶和钙离子，提出了 PG概念，将其所形成的凝胶状物质用于组织修复。 Whitman率先将自体PRP用于口腔颌面外科 手术修补骨组织。 PRP制备方法 原理原理 根据血液成分在离心过程中的沉降速率不同来提取。 制备方法制备方法 无统一标准，都需两次离心。 全自动制备法、手工制备法。 *5 影 响 PRP 血小板 抗凝剂 离心力 离心时间
3、离心次数 凝胶激活剂 浓 度 活 性 回收率 PRP制备方法 全自动法（血浆分离置换法） 利用血成分分离耗材分离制备得到血小板血浆。 特点特点 自动化程度高、血小板纯度浓度高 *6 PRP制备方法 手工制备法 都为两步法，但离心力、离心时间略有不同。 一般认为一般认为 初次200g离心10min,二次1200g离心 10min,制备PRP中血小板计数约为全血6.17倍，效果较 好。 （血液离心后分3层：由下至上-红细胞层、血小板浓缩 物层、贫血小板血浆层） 用中间层再次分离。 *7 PRP成分特点 *8 PRP 纤维蛋白 白细胞 高浓度血小板 其它 PRP成分特点 血小板 成人：平均195*1
4、09/L，PRP约为全血3-17倍。 血小板结构图 作用作用 生理性止血-通过黏附反应作用起到初期止血功能。 组织修复-通过黏附于血管壁和插入内皮细胞之间来修复血管内皮，保持其 完整性。 调控炎症和免疫反应-通过调节其表面粘附及表面受体的表达来实现，如介 导白细胞作用。 *9 PRP成分特点-血小板 *10 凝血酶 血小板源性生长因子 转化生长因子 胰岛素样生长因子 表皮生长因子 血管内皮细胞生长因子 成纤维细胞生长因子 血小板在凝血酶激活后聚集，由颗粒释放生长因子 （GF），可与目标受体上的结合激活诱导蛋白再生 过程，如细胞增殖、基质形成、骨形成、胶原蛋白 合成等。 血小板 PRP成分特点-
5、血小板 血小板源性生长因子（PDGF） 一种促细胞分裂蛋白，第一个被发现存在于血小板中， 是趋化作用最强的骨生长因子之一。 作用作用 可促进血管生成、活化巨噬细胞，刺激成纤维细胞、血 管平滑肌细胞、神经胶质细胞等中胚层细胞的增殖和活性 ， *11 PRP成分特点-血小板 转化生长因子- （TGF-） 以旁分泌或自分泌方式作用于成纤维细胞、骨髓干细胞、成 骨前体细胞和破骨细胞。 TGF免疫染色图 作用：作用： 参与体内多种炎症反应和组织修复，促进细胞外基质分 泌，提高成纤维细胞增殖能力，刺激胶原蛋白1和纤维连 接蛋白的生物合成以及骨基质的沉积，抑制破骨细胞形成 和骨吸收发生。 *12 PRP成分
6、特点-血小板 胰岛素样生长因子（IGF） 作用： 趋化成纤维细胞，刺激蛋白质合成。 刺激骨细胞增殖、分化，促进软骨和骨基质生成。 *13 PRP成分特点-血小板 表皮生长因子（EGF） 作用：作用： 新生血管重要的诱导因子。 可促进创口愈合、参与血管生成。 刺激内皮细胞有丝分裂和细胞迁移。 还可增加血管通透性。 *14 PRP成分特点-血小板 血管内皮细胞生长因子（VEGF） 是高度保守的同源二聚体糖蛋白。二条分子量各为24kDa 的单链以二硫键组成二聚体。 作用：作用： 能直接作用于血管内皮细胞促进血管内皮细胞增殖，增 加血管通透性。 诱导内皮细胞的增生和迁移，启动血管生成反应。 *15 P
7、RP成分特点-血小板 成纤维细胞生长因子（FGFs） 作用：作用： 参与血管形成、损伤愈合和胚胎发育等过程，是关节软 骨细胞最具显著效应的有丝分裂刺激原和形态原之一。 *16 PRP成分特点-白细胞 白细胞：参与机体免疫和防御功能 帮助机体清除局部病原体、增强抗感染能力；帮助机体清 除局部坏死组织，加快组织修复。 受血小板分泌生长因子趋化，本身可分泌生长因子直接参 与组织修复。 *17 PRP成分特点-其它 其它成分如： 纤维连接蛋白（FN） 血小板反应蛋白（TSP） 骨连接蛋白（ON） 玻璃体连接蛋白（VN） 作用：作用： 对伤口感染、促进组织修复及增加新生血管内膜 的形成发挥重要作用。 *
8、18 PRP *19 优点一 优点二 来源丰富、取材方便、操作简单、价格低廉 具有自源性，不会出现免疫排斥反应，没有异体移植 传播疾病风险 PRP *20 优点三 优点四 含高浓度多种生长因子，且比例接近正常人，具备最佳 协同效应，（避免单一因子不能良好诱导创面愈合） PRP凝胶具有极好粘附性，使用时可较好的黏附在创面 上而不流失，避免损失，保证局部较高的生长因子浓度。 PRP *21 优点五 优点六 因含有较多的白细胞和单核细胞，可起到防止感染作用。 避免了异体和人工合成组织的致畸危险，同时各种因子 表达良好，避免了诱导肿瘤形成的可能。 PRP临床应用及研究 *22 骨缺损修复 软骨损伤修复
9、 预防骨感染 急性创面 慢性难愈合伤口 皮肤脂肪组织液化 急性运动损伤 慢性运动损伤 颌骨相关疾病 牙周病 上颌窦手术 烧伤 整形科 烧伤创面 脂肪移植 皮肤组织再生 骨科 运动 损伤 普外科 口腔颌 面外科 *23 l口腔颌面外科 *24 研究一 研究一 *25 口腔颌面外科相关研究 *26 Whitman用PRP联合骨移植治疗骨缺损获得成功。 Suba等应用磷酸三钙复合PRP治疗犬牙槽骨缺损，发现PRP可明 显促进骨再生。 Lekovic研究发现PRP能促进牙槽骨再生。 张丽等的研究证实PRP联合植骨术治疗牙周邻面骨缺损效果优于 单纯植骨术。 Philippart等将PRP混合物充填于上颌
10、窦中，6个月组织学观察显示 有活跃的骨新生活动。 Rodrignez等在上颌窦区植入PRP及种植体，移植成功率达92.9% ，表明PRP可加快骨再生速度，提高骨再生质量。 颌骨相关 研究 牙周病 上颌窦 手术 *27 l骨 科 *28 研究二 *29 研究二 骨科相关研究 *30 Marx等发现复合PRP的移植骨修复速度比单纯用移植骨修复快 1.62-2.16倍。 Bielecki等用PRP经皮注射治疗骨不连取得良好疗效。 Drengk等研究显示PRG作为细胞支架能明显促进软骨细胞遇见 充质干细胞的增生和向软骨细胞分化。 Wu等认为PRP可以作为软骨细胞的载体，治疗关节软骨缺损。 Bielec
11、ki的研究显示血小板-白细胞凝胶在体外可抑制金葡、大肠 杆菌生长，提示PRP可作为“生物抗菌制剂”。 骨缺损 修复 软骨损伤 修复 预防骨 感染 *31 l运动医学 *32 研究三 运动损伤相关研究 *33 急性运动损伤 Sanchez的研究发现应用PRP患者在关节活动度、功能恢复及术后 并发症方面均优于单纯修复患者。 耿震的研究表明PRP在改善肌腱愈合质量的同时也加速了愈合进程 。 Radice的研究显示，应用髌韧带进行前交叉韧带重建时应用PRP， 可将韧带成熟时间从12个月缩短到3.6个月。 Sanchez等报道肌肉拉伤运动员在超声波引导下局部注射PRGF后 ，功能恢复时间明显缩短，且运动
12、训练后未出现肌肉纤维化现象。 运动损伤相关研究 *34 慢性运动损伤 Mishra通过对难治性肱骨外上髁炎患者注射PRP发现，只有非激活 状态并同时含有浓缩血小板和白细胞的PRP有效。 Barrett发现慢性跖腱膜炎患者在B超引导下局部注射PRP治疗效果好 。 王虎等的研究表明，和类固醇比PRP治疗跟痛症取得了良好疗效。 Kon E等用PRP和透明质酸盐对照注射入膝关节治疗骨性关节炎，发 现其疗效优于传统的透明质酸盐。 *35 l普外科 *36 研究四 *37 研究四 普外科相关研究 *38 Bhanot S的研究指出，PRP可加速表皮化生长，减轻创伤后局部 肿胀和疼痛，减少术后伤口渗出。 M
13、an D将PRP凝胶用于皮瓣移植术，发现血管创出血被凝胶封闭 ，提高了手术成功率。 Carter CA等用PRP修复马小腿伤口发现，PRP加快上皮细胞增殖， 促进伤口胶原合成以及血管再生。 郭彦杰等应用PRP创面内注射治疗下肢慢性难愈合伤口，疗效显著。 夏江霓等对慢性溃疡患者应用PRP凝胶治疗，发现PRP能更好的促进 伤口处肉芽组织形成。 Giorgio研究认为PRP可激发细胞增殖分化和微血管的形成，增强局部 组织自我修复能力，从而有利于切口愈合。 刘晓韬的研究显示，应用PRP注入脂肪液化切口深部的患者愈合时间 明显减少，提示PRP可以减轻疼痛、术后出血，减少术后并发症。 急性创面 慢性难 愈
14、合伤口 手术切口 脂肪液化 *39 l烧伤整形科 *40 研究五 *41 研究五 *42 研究五 脂肪移植物组织结构观察（苏木精-伊红染色，X100） 对照组 PRP组 10d 90d *43 研究五 *44 烧伤整形科相关研究 Nalbonesi等应用PRP成功治疗了14例因接受面部整形手术导致皮肤和软组 织损伤的患者。 Hum等研究发现，局部注射PRP疗效明显优于抗生素软膏好湿性敷料，可使 伤口愈合率超过80%。 黄云严的将PRP凝胶用于治疗60例面部二度烧伤创面，发现在伤后早期使用 PRP凝胶可使创面愈合速度加快、愈合率提高，减少瘢痕形成。 *45 l其它 *46 研究六 *47 研究六 *48 研究六 *49 研究六 *50 研究七 *51 研究七 *52 研究七 *53 研究八 富血小板血浆治疗症状性宫颈内膜移位的研究 *54 研究八 存在问题 *55 4 如何将PRP更好的与传统的骨再生方式结合。1 2 3 国内无统一标准，需要建立高效稳定的PRP制备方法。 血小板在体外易受外源性刺激而被破坏或活化。 激活剂牛凝血酶和氯化钙，伴随凝血因子抗体的形成。 *56
