《水稻抗疑团莫释性条斑病和白叶枯病相关基因osdrxoc8的克隆和功能鉴定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《水稻抗疑团莫释性条斑病和白叶枯病相关基因osdrxoc8的克隆和功能鉴定（74页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
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2、 保密论文在解密后应遵守此规定。 导师签名： 恤易暂 中文 jbs t 1 前言 1 1 水 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 4 细条病抗性评价方法3 1 1 2 水稻细条病的抗性鉴定与抗源筛选。3 1 1 3 水稻细条病的抗性生理研究4 1 1 4 水稻对细条病抗性的遗传和Q T L 定位研究5 1 1 4 1 水稻抗细条病的经典遗传研究5 1 1 4 2 水稻抗细条病Q T L 定位研究5 1 1 5 水稻抗细条病Q T L 的标记辅助育种6 1 2 基因家族和基因功能冗余6 1 2 1 基因家族的有关概念6 1 2 2 基因功能冗余的有关概念7 1 2 3 基
3、因家族与基因功能冗余的关系8 1 3 水稻白叶枯病及其相关的抗性研究8 1 3 1 水稻白叶枯病的发现及发病特点8 1 3 2 水稻对白叶枯病的抗性9 1 4 候选抗性基因11 1 4 1 候选抗性基因预测11 1 4 2 候选基因分析1 1 1 5 植物小分子热激蛋白及其抗逆功能1 2 1 5 1s l t S P s 的分类与结构1 2 1 5 2s t l S P s 的生物学功能1 3 2 7G U S 染色2 4 2 8 转基因植株P C R 检测2 4 2 9 植物总R N A 的提取2 5 2 1 0R T - P C R 和定量R T P C R 分析2 5 2 1 2 细条病
4、菌和白叶枯病菌菌液准备2 6 3 结果与分析2 6 3 1 基因O s D R x o c 8 结构与功能预测2 6 3 2O s D R x o c 8 基因超量表达片段2 6 3 3 5 5 5 5 6 8 8 9 9 0 0 0 l l 1 2 2 3 3 1 1 l l l l l 1 l l l 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 一 一 一 一 j ；：= 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 3 3R N A i 抑制表达片段的的扩增 3 4 植物超量表达载体的构建及鉴定 3 5R N A i 表达载体的构建及鉴定 3 6 超量重组载体和R N A i
5、重组载体的农杆菌E H A l 0 5 的转化及鉴定 3 7 水稻遗传转化再生体系的建立 3 8 转化后愈伤组织G U S 基因表达检测 3 9T 0 代转基因植株P C R 检测 3 1 0 ，r 0 代转基因植株中O s D R x o c 8 的表达量分析检测 3 1 1T 。代转基因植株对细条病菌R S l 0 5 的抗性鉴定 3 1 2T 1 代转基因植株对白叶枯病菌P X 0 9 9 的抗性鉴定3 4 3 13O s D R x o c 8 基因影响水稻植株的发育3 6 3 1 4O s D g x o c 8 基因功能冗余3 7 。 4 讨论3 9 4 1O s D R x o
6、c 8 在植物发育和抗病反应中的双重角色3 9 4 2O s P R x o c 8 基因参与水稻抗细条病和白叶枯病的路径存在差异3 9 4 3 小分子热激蛋白可能参与了水稻与细条病菌的互作反应3 9 ： 4 4O s D R x o c 8 基因属于水稻基因组中C l a s sIs H S P s 的一个亚基因家族4 0 5 结论4 1 参考文献4 2 附录I 常用缓冲液及培养基的配制5 l 附录I I 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器6 l 敛谢6 3 损伤，增强植物的抗逆性。我们通过水稻愈伤组织的遗传转化获得O s D R x o c 8 基 洲的超量表达和抑制表达转基因植株，对T
7、，代的转基因植株进行细条病菌R S l 0 5 和白叶枯病菌P X 0 9 9 的接种发现，超量表达O s D R x o c 8 基因能够增强水稻对 细条病和白叶枯病的抗性，抑S q O s D R x o c 8 基因的表达能够增强水稻对白叶枯病 的感病性，但是没有增强水稻对细条病的感病性，O s D R x o c 8 基因在水稻基因组 内有1 5 个相似度在7 1 0 以上的同源基因，属于水稻的一个超基因家族。因此推 测O s D R x o c 8 基因在细条病存在功能冗余现象。 通过对T ，代转基因植株表型分析发现，O s D R x o c 8 基因在水稻的株高，叶长， 叶宽，分
8、蘖等性状方面影响水稻的生长发育，超量表达转基因植株与野生型对照 相比出现植株矮化、叶片较短、叶宽较窄、分蘖较少的表型，而抑制表达转基因 j ! l I 【株农型与野生型对照相比无明显差异，进一步说明O s D R x o c 8 基因存在功能冗 余性。 这些的研究结果都表明O s D R x o c 8 基因是参与调控水稻抗病和生长发育的 一个重要的影响因子。 关键词：O s D R x o c 8 ，小分子热激蛋白，功能冗余，抗病性，发育 i m p r o v i n gr i c ed e f e n s es y s t e m I nt h i ss t u d y ，w eh a
9、v ec l o n e da n dc h a r a c t e r e dar i c e d i s e a s er e s i s t a n c er e l a t e dg e n e s ，O s D R x o c 8 ，w h i c hr e s u l t si ne n h a n c i n gr e s i s t a n tt o b o t hX o oa n dX o ci nt r a n s g e n i cr i c e I ti s s u p p o s e dt o e l u c i d a t et h er e s i s t a n
10、 t m e c h a n i s mo fr i c ed i s e a s ea n dt oc u l t i v a t er e s i s t a n tr i c ev a r i e t yw i t hO s D R x o c 8g e n e i nt h ef u t u r e O s D R x o c 8e n c o d e da18 1K D as H S P ，w h i c hb e l o n g st ot h eS a c c h a r o m y c e sy e a s t s m a l lh e a ts h o c kp r o t
11、e i n2 6 ( S c H s p 2 6 ) g e n ef a m i l y A sac h a p e r o n e ，s H S Pc a l li n h i b i t e x c e s s i v ea c c u m u l a t i o no fp r o t e i n ，p r e v e n tc e l ld a m a g e ，e n h a n c es t r e s sr e s i s t a n c ei n p l a n t s T h r o u g hA g r o b a c t e r i u mt u m e f a c i
12、 e n s - m e d i a t e dt r a n s f o r m a t i o ns y s t e m ，t h ew e a n dr e p r e s s e de x p r e s s i o nt r a n s g e n i cr i c el i n e s A f t e r p a t h o g e na s s a y e df o rR S 10 5a n dP X 0 9 9w i t hT 1 g e n e r a t i o no ft r a n s g e n i cl i n e s ， w h i c hh a v eb e e ns c r e e n e do u tt oa f f e c tt h ee x p r e s s i o no fO s D R x o c 8w i t hq u a n t i t i v e R 一1 - P C R T h eo v e r e x p r e s s i o nl i n
