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1、. . . .镇江市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/SOP 004版本/修改状态B/0第1 页 共 1页编制者陈伟审核者陈鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01卡式ABO、抗D血型鉴定标准操作程序1.目的：检测受检者红细胞表面有无A或B、D抗原。2.适用范围：适用于本科日常工作中ABO正定型、抗D血型鉴定试验。3.职责：输血科全体工作人员。4.溯源：见操作说明书。5.操作程序：本实验用“长春博迅生物技术有限责任公司”提供的coombs卡。适用抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合检测红细胞ABD抗原，适用于抗凝血。5.
2、1实验原理：这是抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合的产物。通过调节葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许游离分子通过，从而达到分离凝集红细胞和游离红细胞的目的。即将红细胞和血清加在凝集的上部反应离心以后，凝集红细胞将受到凝胶的阻碍而停止在凝集的上部或凝胶中，则证明发生凝集反应为阳性，反之判断凝集反应为阴性。5.2 实验试剂：5.2.1 Coombs卡每份标本用4孔。6. 测定步骤：6.1 在ABD孔分别加入已配制的3%病人红细胞悬液25ul（或1滴）。6.2离心，定时9分钟。6.3 结果判断见原理。6.4 注意事项：6.4.1结果不明显时，或有拖尾现象，应用试管法核查，并核查何种
3、疾病的病人标本，找出原因6.4.2 实验前应将卡离心。镇江市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/SOP 005版本/修改状态B/0第1 页 共 1页编制者陈伟审核者陈鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01Rh血型鉴定标准操作程序1.目的：检测待检红细胞上有无D抗原。2.适用范围：适用于本科急诊Rh血型鉴定试验。3.职责：输血科全体工作人员。4.溯源：全国临床检验操作规程（第三版）。5.操作程序：本实验用“长春博迅生物技术有限责任公司”提供的RhD（IgM）血型定型试剂盒（单抗隆抗体）检测红细胞上有无D抗原。6.实验原理
4、：用已知的标准血清（抗D）检测待检红细胞上有或无D抗原。临床上凡带有D抗原者，称为Rh阳性。不带D抗原者，称为Rh阴性。7. 试剂：抗D标准血清。8. 操作：8.1.1 取小试管1支，加2d抗D血清，再加2d 35%红细胞悬液。8.1.2 900G离心15秒。9.结果观察： 若有凝集，则表明受检者红细胞上有D抗原，Rh阳性。 若无凝集，则表明受检者红细胞上无D抗原，Rh阴性。9.1 注意事项：抗D标准血清应保存于28冰箱内。 镇江市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/SOP 006版本/修改状态B/0第1 页 共 1页编制者陈伟审核者陈鹏批准者蔡玲
5、发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01ABO血型反定型鉴定标准操作程序1、目的：检测受检者血清中有无抗A,抗B抗体2、适用范围：适用于本科日常工作中ABO血型反定型3、职责：输血科全体工作人员。4、溯源：全国临床检验操作规程(第三版).5、操作程序：(试管法)本实验用长春博迅生物技术有限责任公司提供的人ABO反定型红细胞试剂盒。5.1 实验原理：用已知的红细胞检测受检者血清中有无抗A,抗B抗体,根据血清中有无抗A,抗B抗体将血型分为A型.B型. 长春博迅生物技术有限责任公司AB型及O型4种.5.2试剂组成： A.B.O红细胞5.3 测定步骤: 5.3.1 将抗凝血离心5.3.
6、2 取小试管3支.分别标上A.B.O5.3.3 在上述小试管中分别加入A.B.O红细胞悬液2d.和已离心好的受检者血清2d.5.3.4 900G离心15秒,观察结果.5.3.5 结果观察 受检者血型受检者血清+试验红细胞A细胞B细胞O细胞A型+B型+O型+AB型注：+：凝集；：不凝集5.3.6 注意事项：如果凝集很微弱或结果不明显,应重复做镇江市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/SOP 007版本/修改状态B/0第1 页 共 2 页编制者陈伟审核者陈鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01凝聚胺配血标准操作程序1.目的
7、： 为规范凝聚胺试验的技术操作，保证试验结果准确，依据输血实验室管理程序4.1.8（1）条款的要求制定本规程。2.适用范围： 适用于医疗机构输血科采用凝聚胺法进行血型血清学试验。3.职责：医疗机构输血科技术人员负责凝聚胺法血型血清学试验。4.溯源：见试剂操作说明书。5.操作程序:本实验用“合肥天一生物技术研究所”提供的聚凝胶胺试剂盒。6.1原理: 凝聚胺法是利用低离子介质(LIM)来降低介质的离子强度,进而减少红细胞之间距,以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体及生物特异性结合,接着加入凝聚胺(Polybrene),使红细胞间发生非特异性凝集,最后加入重悬液(resupending)使之中和凝聚胺
8、(Polybrene)所引发的非特异性凝集,倘若没有凝集发生,则判定为阴性;若有凝集,则得知存在特异性之抗原抗体反应,则判为阳性。6.2.试剂盒组成: 8.1 LIM (low lonic trength medium)低离子介质溶液8.2. POLYBRENCE凝聚胺8.3 RESUSPENDING 重悬液8.4 POSITIVE CONTROL阳性对照6.3交叉配血实验:6.3.1 取小试管2支,标主次侧,主侧管加病人血清(血浆)2d,加供血者35%红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)2d,次侧管反之6.3.2各加LIM0.7ml,混合均匀后,再各加polybrene溶液2d，并混合均匀。6.3
9、.4 1000G离心15秒,然后把上清液倒掉不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。6.3.5 轻轻摇动试管，目侧红细胞有无凝集。如无凝集，则必要重做。6.3.6 最后加入resuspending2d，轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果在10930秒内凝集散开，代表是由polybrene引起的非特异性凝集配血结果相对;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相对。如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。7. 注意事项:7.1若病人血清含肝素高则应加入双倍量的POLYBRENE液中和肝素。7.2 试剂使用前,应恢复室温再做。7.3由于某些病人血清中可能含有冷凝集素等因素,
10、而导致假阳性的结果出现。若有怀疑,建议在最后滴入RESVSPENDING液时,将试管立即置入37水浴中,轻轻转动试管混合,并在30秒内观察结果。镇江市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/SOP 008版本/修改状态B/0第1 页 共 2 页编制者陈伟审核者陈鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01手工配血系统交叉配血试验标准操作程序1.目的：为规范微柱凝胶卡在血型血清学试验中的应用，保证试验结果的准确性和有效性，依据输血实验室管理程序4.1.8（1）条款的要求制定本规程。2.适用范围：适用于输血科采用微柱凝胶卡进行血型血
11、清学试验。3.职责：医疗机构输血科技术人员负责微柱凝胶卡在血型血清学试验中的应用。4.溯源：见操作说明书5.操作程序： 本实验用“长春博迅生物技术有限责任公司”提供的combs卡6.1原理： 本实验是抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合的产物。通过调节葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许游离分子通过，从而达到分离凝集红细胞和游离红细胞的目的。血清和红细胞发生凝集的受到凝胶阻碍的而停止在微管的上端，反之则红细胞沉在微管的底部，通过有无凝集而判断交叉配血试验可否配合。6.2 试验准备：凝胶卡处理 ：实验前，将新的Combs 卡离心。使微柱内壁上端粘有的凝胶离心下来。6.3实验步骤：6
12、.3.1 平行向后撕拉Diana Gel Combs卡上端的锡纸膜，直至所需孔完全露出为止。6.3.2 在主侧孔悬空加入献血员1红细胞悬液50ul，病人血浆25ul6.3.3 在次侧孔悬空加入病人1红细胞悬液50ul，献血员血浆25ul。6.3.4 在病人自身对照孔加入病人1红细胞悬液50ul，病人血浆25ul。6.3.5 在Diana孵育器内37下孵育15分钟。6.3.6 将卡放到Dianafuge离心机中1100转/9分钟离心。6.3.7 离心结束后在白色背景前观察结果。7.结果判定： 100的红细胞沉在微管的底部。+/- 100的红细胞沉在微管的下端1/3之内。1+ 80 的红细胞沉在微
13、管的下端2/3之内。2+ 80 的红细胞沉在微管的上端2/3之内。3+ 80 的红细胞沉在微管的上端1/3之内。4+ 凝集的细胞全部处于微管的顶部8. 注意：8.1 红细胞悬液不能超过1，避免假阳性。8.2 配制红细胞悬液时加样枪头应沿壁插到管底吸取压积红细胞，避免吸入白细胞和血小板，避免假阳性。8.3 受检血样要充分离心，避免纤维蛋白影响结果判断。镇江市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/SOP 009版本/修改状态B/0第1 页 共 2 页编制者陈伟审核者陈鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01血型抗体效价检测标准操作程序1.目的：为规范红细胞血型抗体效价测定的技术操作，依据输血实验室管理程序相关条款的要求制定本规程。2.适用范围：适用于医疗机构输血科测定IgG抗-A抗-B及IgG或IgM类红细胞不规则抗体效价，用以评估胎-母血型不合适妊娠时发生胎儿及新生儿免疫溶血性疾病（HDN）的风险程度及其他临床需要。3.职责：医疗机构输血科技术人员负责红细胞血型抗体效价的测定。5.
