《植物雌激素α玉米赤霉醇对骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞的作用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《植物雌激素α玉米赤霉醇对骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞的作用（56页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 密 级： 学校代码:10075 分类号： 学 号:20091386 医学硕士学位论文 植物雌激素 -玉米赤霉醇对骨髓间充 质干细胞来源的成骨细胞的作用 学位申请人：刘未华 指 导 教 师 ：段 斐 教授 学 位 类 别 ：医 学 硕 士 学 科 专 业 ：药 理 学 授 予 单 位 ：河 北 大 学 答 辩 日 期 ：二一二年六月 Classified Index: Code: 10075 U.D.C: NO: 20091386 A Dissertation for the Degree of Medical Science Effects of Phytoestrogen -zeranol
2、 on osteoblast derived from bone marrow mesenchymal stem cells Candidate: Liu Wei-hua Supervisor: Prof. Duan Fei Academic Degree Applied for: Master of Medical Science Specialty: Pharmacology University: Hebei University Date of Oral Examination: June, 2012 摘 要 I 摘 要 目的目的目的目的 本研究利用植物雌激素 -玉米赤霉醇及雌激素受体
3、拮抗剂，作用于大鼠成骨细胞， 通过其分泌细胞因子的影响， 来研究植物雌激素 -玉米赤霉醇对绝经后骨质疏松症防治 作用的机制。 方法方法方法方法 通过在成骨细胞培养体系中加入不同浓度的 -ZAL（10-5mol/L10-10mol/L）， 利用 Elisa 法和半定量 RT-PCR 的方法，分别于 24h、48h、72h 检测 -ZAL 对大鼠成 骨细胞分泌 OPG、IL-6、TNF- 的变化及其 mRNA 表达的影响。通过在成骨细胞培 养体系中加入 -ZAL（10-6mol/L）与不同浓度的雌激素受体拮抗剂（10-5mol/L、 10-7mol/L、10-9mol/L），利用 Elisa 法和
4、半定量 RT-PCR 的方法，分别于 24h、48h、 72h 检测其对大鼠成骨细胞分泌 OPG、 IL-6、 TNF- 的影响， 及其 72h 对 OPG mRNA 表达的影响。 结果结果结果结果 1、不同浓度的 -ZAL（10-5mol/L10-10mol/L）作用于成骨细胞后，随着 -ZAL 浓 度的增加，作用时间的延长，OPG 的分泌量及其 mRNA 的表达均有不同程度的增加， IL-6、TNF- 则有不同程度的降低。-ZAL 可促进成骨细胞 OPG 的分泌及其 mRNA 的 表达，抑制 IL-6、TNF- 的分泌及 IL-6 mRNA 的表达。 2、 -ZAL （10-6mol/L）
5、 与不同浓度的雌激素受体拮抗剂 （10-5mol/L、 10-7mol/L 10-9mol/L） 作用于成骨细胞后， 当 -ZAL 单独作用时， OPG 的分泌及其 mRNA 的表达量均增加， IL-6、 TNF- 的分泌量降低； 当 -ZAL 与雌激素受体拮抗剂共同作用时， OPG 的分泌及其 mRNA 表达均有不同程度的降低，IL-6、TNF- 的分泌量均有不同程度的升高。 结论结论结论结论 1、-ZAL 具有类似雌激素的作用，能够刺激成骨细胞释放 OPG，抑制破骨细胞的 分化细胞因子 IL-6、TNF- 的释放，从而降低破骨细胞的活力，抑制破骨细胞的分化与 成熟，导致成骨细胞性骨形成能力
6、增强和破骨细胞性骨吸收能力的下降。 2、成骨细胞中 OPG、IL-6、TNF- 的表达可被雌激素受体拮抗剂所阻断，这就提 摘 要 II 示 -ZAL 对成骨细胞的作用是通过雌激素受体介导的。 关键词 -ZAL 绝经后骨质疏松症 成骨细胞 破骨细胞 骨保护素 雌激素受体拮抗剂 Abstract III Abstract Objects： This paper is discussed about the influence of plant estrogen alpha zeranol and estrogen receptor antagonist to rat osteoblasts sec
7、rete cells factors, Study of the mechanism of plant estrogen alpha zeranol on postmenopausal osteoporosis prevention and cure function Methods: 1、Add the different concentration of -ZAL （10-5mol/L10-10mol/L） in osteoblast culture system, use Elisa and half quantitative RT-PCR method to detect the se
8、cretion changes and the influence of the mRNA expression of OPG, IL-6, TNF-alpha of rats osteoblast, respectively in 24h, 48h, 72h 2、Add the -ZAL （10-6mol/L） and different concentration of estrogen receptor antagonists （10-5 mol/L, 10-7 mol/L, 10-9 mol/L） in osteoblast culture system, use Elisa and
9、half quantitative RT-PCR method to detect the secretion changes of OPG, IL-6, TNF-alpha of rats osteoblast respectively in 24h, 48h, 72h，also detect the influence of the mRNA expression of OPG in 72h Result: 1、 The results found that the different concentration of -ZAL （10-5mol/L10-10mol/L） act on o
10、steoblasts, along with the increase of the concentration of -ZAL and the extension of effect time, the secretion capacity and mRNA expression of the OPG have a different degree of increase, but IL-6, TNF-alpha have a different degree of reduced-ZAL can promote the osteoblast to secrete and express m
11、RNA of the OPG, restrain IL-6, TNF-alpha secretion and IL-6 mRNA expression 2、The results showed that -ZAL（10-6mol/L） and different concentration of estrogen receptor antagonists（10-5 mol/L, 10-7 mol/L, 10-9 mol/L）act on osteoblasts, when -ZAL separate function, the secretion and mRNA expression of
12、the OPG are increased, the secretion capacity of IL-6, TNF-alpha are reduced; When -ZAL in company with estrogen receptor antagonists function, the secretion and mRNA expression of OPG have different rate of reduction, the secretion capacity of IL-6, TNF-alpha have different rate of increases Conclu
13、sion: Abstract IV 1、 -ZAL has a similar effect like estrogen, which can stimulate the osteoblasts to release OPG, restrain the broken bone cells to release the differentiation of cytokines IL-6, TNF-alpha, thereby it can reduce the vitality of broken bone cells, inhibit the differentiation and matur
14、e of the broken bone cells, which lead to enhance the bone formation ability of osteoblasts and decrease the absorption ability of broken bone cells 2、The above results suggest that the osteoblasts express OPG, IL-6, TNF-alpha can be blocked by estrogen receptor antagonist, which suggests the role o
15、f -ZAL is mediated through estrogen receptor Key words -ZAL PMOP Osteoblast Osteoclast OPG Estrogen Antagonists 英文缩略词表 V 英文缩略词表 缩略词 英文全称 中文全称 -ZAL -zearalanol -玉米赤霉醇 OPG osteoprotegerin 骨保护蛋白 E2 17-estradiol 17-雌二醇 ER estrogen receptor 雌激素受体 HRT Hormone Replacement Therapy 激素替代疗法 TNF tumor necrosis factor 肿瘤坏死因子 PMOP postmenopausal osteoporosis 绝经后骨质疏松症 RANKL Receptor activator of NF-B ligand 核因子-B 受体活化因子配体 RANK Receptor activator of nuclear factor-B 核因子-B受体活化子 RT-PCR everse transcription polymerase chain reaction 反转录聚合酶
