实验dna和rna在细胞中的分布

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1、 观察DNA和RNA在 细胞中的分布 2011-10-8 实验 2011-10-8 实验原理: DNA主要分布在内,RNA大部分存在于 中。 甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的 不 同,甲基绿使 呈现绿色, 使 呈 现红色。利用 染色剂将细胞染 色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。 盐酸 能改变 加速染色剂进 入细胞 能使染色质中的 分离有 利于 结合 细胞膜的通透性 DNA和蛋白质 DNA和染色剂 细胞核 细胞质 亲和力 DNA吡罗红RNA 甲基绿吡罗红混合 目的要求 :初步掌握观察DNA和RNA在细胞中 分布的方法 实验材料 :人的口腔上皮细胞; 洋葱鳞片叶内表皮细胞; 1、

2、能否用哺乳动物成熟的红细胞? 2、能否用紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞? 无细胞核 避免颜色干扰 尽量避免材料上 带叶肉组织细胞 方法步骤: 一、制片 2、用消毒牙签刮漱净的口腔内侧壁取 口腔上皮细胞后涂NaCl液滴上 3、将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒 精灯上烘干 1、在载玻片上滴一滴质量分数为0.9% 的NaCl溶液(生理盐水) 目的:维持口腔上皮细胞的正常形态 思考:如果用植物细胞的话 ,需要滴加生理盐水吗? 目的:将细胞固定在载玻片上 注意事项:1、烘烤时要来回移动玻片,以 免受热不均炸裂;2、烘烤后,等玻片冷却 后再放入盛HCl的烧杯中,以免炸裂。 二、水解 1、在小烧杯中加入30ml质量

3、分数为 8%的HCl,将烘干的载玻片放入小烧 杯中; 2、再将小烧杯放入盛有30温水大 烧杯中保温5min。 目的:杀死细胞,改变细胞膜的 通透性,加速染色剂进入细胞; 使染色质中DNA与蛋白质分离,有 利于DNA与染色剂的结合 注意事项 : 时间长,会严重破坏细胞结构 ,干扰DNA和RNA的观察; 时间短,水解不彻底,染液不 易进入细胞,染色不充分。 三、冲洗 取出载玻片,用蒸馏水的 缓水流冲洗载玻片10秒 注意事项:冲洗时一定要用缓流 ,防止细胞被冲走 目的:防止HCl与染色剂发生 中和作用而影响观察效果 四、染色 1、将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴 于擦干的载玻片上,染色5min 2、吸去多

4、余的染色剂,盖上 盖玻片 (1)先用低倍镜观察,选择染色均匀、颜色浅 的区域进行观察 (2)换用高倍镜观察,观察细胞核和细胞质的 染色情况 五、观观察 实验现象:绿色部分主要集中在细胞核内 ,红色部分主要集中在细胞质中。 实验结论:DNA主要分布在细胞核中, RNA大部分存在于细胞质中. 1、在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中,将口腔 上皮细胞置入8的盐酸溶液中水解的主要目的是 A使细胞中的DNA水解成脱氧核苷酸 B使细胞中物质全部水解 C利用盐酸改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞 D使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于蛋白质与染 色剂结合 2、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中,水解步骤需要 的条件是 5的盐酸 8的盐酸 10的盐酸 20温水 30温水 40温水 保温5min 保温10min A B C D 3、利用甲基绿和吡罗红对细胞中的DNA、RNA染色时,试 剂的正确使用方法是 A先加甲基绿,再加吡罗红 B先加吡罗红,再加甲基绿 C混合在一起同时使用 D将两种试剂分开单独使用 4、“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的实验中,没有用的 试剂( ) A.0.9NaCl B.8的HCl C. 吡罗红、甲基绿染色剂 D.斐林试剂 吡罗红甲基绿混合染色剂与斐林试剂 使用方法相似,都是混合使用、现配 现用。

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