《条件性基因敲除鼠肺腺癌干细胞的分离、鉴定及其microrna表达谱的初步研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《条件性基因敲除鼠肺腺癌干细胞的分离、鉴定及其microrna表达谱的初步研究（158页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、赵振国指导教师陈正堂教授第三军医大学新桥医院肿瘤科，400037申请学位级别博士科学学位专业名称肿瘤学论文提交日期2009年l1月论文答辩日期2009年l1月学位授予单位和日期第三军医大学2009年月答辩委员会主席评阅人二Oo九年十一月第三军医大学研究生学位论文独创性声明秉承学校严谨的校风和科研作风，本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意
2、。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名盎至暨翊日期：7堡Q仝：!：扣论文作者签名噬至垦丝，1日期：7堡Q芏：!：扣第三军医大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解第三军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属第三军医大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为第三军医大学学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名：日目录缩略语索引1英文摘要3中文摘要
3、9论文正文条件性基因敲除鼠肺腺癌干细胞的分离、鉴定及其microRNA表达谱的初步研究前。占14。日U舌”l第一部分重组腺病毒AdCre的扩增、滴度测定以及条件性基因敲除鼠肺腺癌模型的建立17实验材料17实验方法19实验结果一25讨论34小结36第二部分小鼠肺腺癌CD45一CD31一Sca-1+CD34+细胞的分离、培养、鉴定37实验材料37实验方法39实验结果一42讨论52小结56第三部分小鼠肺腺癌发生发展过程中CD45一CD31一Sca一1+CD34+细胞miRNAs表达谱的鉴定及其生物信息学分析57实验材料57实验方法60实验结果66讨仑9l，J、结96第四部分let7a的肿瘤凋亡相关靶
4、基因预测及PCR芯片验证靶点97实验材料97实验方法99实验结果一105讨念114小结115全文总结116致谢117参考文献118文献综述肺癌干细胞研究进展125参考文献129攻读博士学位期间发表及待发表文章132英文论著l33第二军医人学博十学位论文缩略语AdCre缩略语索引英文全名中文全名AdenovirusCRE重组酶腺病毒Lox-stop10 xK-rillsG12DLox-stop-loxKrasG12DKras条件性基因敲除鼠AMLAMOsBACsBADJBASCBSACFEHECSCDEPCESEtOHFCMFCSFITCHSCHIV-lHPCLOWESSLSCMmiRNAAcu
5、temyeloidleukaemia急性髓性白血病AntimiRNAoligonucleotides抗miRNA寡聚核苷酸Bronchioloalveolarcarcinomas细支气管肺泡癌Bronchoalveolarductjunction，终末细支气管肺泡连接区BronchioalveolarstemcellsBovineserumalbuminCloneationefficiencyHaematoxylinandeosinCancerstemcelldiethypyrocarbonateembryonicstemcellsethanolflowcytometryfetalcalfse
6、rumfluoresceinisothiocyanatehaemopoieticstemcell支气管肺泡干细胞牛血清白蛋白克隆形成率苏木素伊红癌干细胞二乙基焦碳酸盐胚胎干细胞乙醇流式细胞术胎牛血清异硫氰酸荧光素造血干细胞humanimmunodeficiencyvirustype1人类免疫缺陷病毒一1hemopoieticprecursorcell造血前体细胞locallyweightedregression局部加权回归microRNANorthernhybridizationnorthernhybridizationMTTNSCLC激光扫描共聚焦显微镜微RNARNA印迹杂交3-(4，5-D
7、imethyl一2-thiazolyl)-2，5-d噻哗蓝iphenyl-2H-tetrazoliumbromidenonsmallselllungcancer非小细胞肺癌第三军医大学博士学位论文ODPBSPEpre-miRNARBlRealtimePCRRISCrpmSCLCSPSPCTACTFTGFBR2TRopticaldensity光密度phosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液phycoerythrin藻红蛋白-premiRNA前体RNAretinoblastoma1肿瘤抑制子real-timepolymerasechainreaction实时定量聚合酶链反应RNAi
8、nducedsilencingcomplexRNA诱导的沉默复合体revolutionsperminute每分钟转速smallcelllungcancer小细胞肺癌sidepopulations侧群细胞surfactantproteinC肺泡表面活性蛋白Ctemporaryamplifiedcell短暂扩增细胞transcriptionfactor转录因子transinggrowthfactorbeta肿瘤生长因子p受体2receptorIItetramethylrhodamine四甲基异硫氰酸罗达明isothiocyanate2第二军医人学博十学位论文Isolation、characteri
9、zationofpulmonaryadenocarcinomastemcellsandidentificationitsmicroRNAexpressionorofile；onditionalknockoutDroleinonitiontmonse一AbstractLungcanceristhemostcommoncauseofcancerrelatedmortalityworldwideTheoverallfiveyearsurvivalrateforthepatientswithlungcancerisstillbelow15althoughthegreatprogressintheear
10、lydiagnosisandchemotherapy，radiotherapy，immunetherapyandtargettherapyhasbeenmadeduringlastfiftyyearsTumorigeniccancerprogenitorcells，alsodesignatedascancerstemcellsorcancer-initiatingcells，hasbeenproposedtobeinvolvedincancerinitiationandprogressiontometastaticdiseasestatesandresistancetoconventional
11、therapies“cancerstemcell”(CSC)displayunlimitedproliferationpotential，abilitytoself-renewandcapacitytogenerateaprogenyofdifferentiatedcellsTherefore，focusingresearcheffortsontheCSCmaydriveimportantadvancesinourunderstandingofcancerbiologyanddevelopingpotentialcuresforthesedevastatingdiseasesCancerste
12、mcellshavebeenfirstisolatedandexpandedfromleukemiaandsubsequentlybeenreportedinseveralhumansolidtumorsincludingmelanoma，breastcancer，brainCanCer，prostateCanCer，retinalglioblastoma，pancreaticcancer，hepatoblastomaandcoloncarcinomaThegastricCanCerstemcellsandthelungCanCerstemcellswerebothidentifiedintheanimalmodelsaswellInlightoftheCanCerstemcells-basedmodel，normalstemcellsmightbeconsideredasprototumorigeniccellsendowedwithsomepropertiestypicalofmalignantcells，includingtheconstitutiveactivationofsurvivalpathwaysandtheabilitytoproliferateindefinitelyOncogenicmutationsOccu
