糖类脂质蛋白质的鉴定实验讲解

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1、1实验实验 原理 某些化学试剂试剂 能够够使生物组织组织 中的有关有 机化合物产产生特定的颜颜色反应应。 实验实验 ：检测检测 生物组织组织 中的糖类类、 脂肪和蛋白质质 简记 “三特”： “特定的物质与特定的试剂反应产生特定的颜色”。 物质质试剂试剂颜颜色 还还原糖斐林试剂试剂砖红砖红 色沉淀 脂肪 苏苏丹液橘黄色 苏苏丹液红红色 蛋白质质 双缩脲试缩脲试 剂剂 紫色 淀粉碘液蓝蓝色 (1)糖类 (2)脂肪苏苏丹染液橘黄色 脂肪苏苏丹染液红红色 (3)蛋白质质双缩脲试剂缩脲试剂 紫色 (4)淀粉+碘液蓝色 (二)目的要求 初步学会用化学试剂检测 生物组织中的糖类、 脂肪和蛋白质。 (三)实验

2、仪器和试剂 (1)仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试 管架，试管夹，大、小烧杯，小量筒，滴管， 玻璃漏斗，酒精灯，三角架，石棉网，火柴， 研钵，石英砂，纱布，载玻片，盖玻片，毛笔 ，吸水纸，显微镜。 (2)试剂：斐林试剂，苏丹染液，双缩脲试 剂。 验证验证 性实验实验 和探究性实验实验 (1)验证验证 性实验实验 ：是指实验实验 者针对针对 已知的实验结实验结 果而 进进行的以验证实验结验证实验结 果、巩固和加强有关知识识内容 、培养实验实验 操作能力为为目的的重复性实验实验 。 (2)探究性实验实验 ：是指实验实验 者在不知晓实验结晓实验结 果的前 提下，通过过自己实验实验 、探索、分析

3、、研究得出结论结论 ，从而形成科学概念的一种认识认识 活动动。 (3)验证性实验的实验结果通常是已知的，探究性实验 的实验结果是未知的，这是两类实验的最大区别。 (四)方法步骤 A还原性糖的鉴定 1选材：本实验最理想的实验材料是含 糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织 的颜色较浅，或近于白色的，如苹果和梨 的果实。经试验比较，颜色反应的明显程 度，依次为苹果、梨、白萝卜。 2方法步骤： (1)制备生物组织样液 先根据选材预测实验结果，然后再实验验证，因此 本实验属验证性实验。 (2)实验 操作的方法和观察 向试管内注入样液2 mL 结论结论 ：可溶性还还原糖与斐林试剂试剂 在加热热的过过程中

4、 生成砖红砖红 色沉淀，说说明组织样组织样 液中有可溶性还还原 糖。 (2)脂肪的检测检测 和观观察 方法一：花生种子匀浆浆3滴苏苏丹染液橘黄色 方法二： 取材：花生种子(浸泡)，将子叶削成薄片 1选材： 实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花 生种子(取其子叶)。供实验用的花生种子 ，必须提前浸泡34h。浸泡时间短了， 不容易切成片；浸泡时间过长，则组织太 软，切下的薄片不易成形。 2方法步骤： (1)制备生物组织实验 材料(组织 切片) (2)实验 操作方法和观察 观察脂肪小颗粒：用显微镜观 察薄片 最薄处(最好一层细 胞) (3)结论 ：该颗 粒可被苏丹染液染成橘 黄色，它是生物组织 中的

5、脂肪物质。从而 鉴定花生种子(子叶)组织 中有脂肪存在。 注意：花生子叶切片切得要薄(最薄处最 好是一层细 胞)，因为切片较厚就观察不 清脂肪颗粒。 特别别提醒 实验实验 用的花生种子需提前浸泡34 h，浸泡时间时间 太短，不易切片；浸泡时间时间 太长长，则组织则组织 太软软 ，切下的薄片不易成形。 (3)蛋白质质的检测检测 和观观察 选选材与制备备：鲜鲜肝提取液或黄豆浆滤浆滤 液 1选材： 选材：实验材料最好选用富含蛋白质的生 物组织(或器官)，植物材料常用的是大豆 ，动物材料常用的是鸡蛋清或新鲜肝脏研 磨液(因为里面富含酶，而酶的成份主要是 蛋白质)。如用大豆，必须提前浸泡12d ，这样容

6、易研磨成浆。有条件的话，可以 直接采用现成的大豆磨成的豆浆，如果用 稀释的鸡蛋清或研磨的新鲜肝脏液做实验 材料，实验效果会更好。 2方法步骤： (1)制备生物组织样 液 (2)实验 操作方法和观察 向试管内注入组织样 液2 mL(或蛋白稀 释液2 mL) (3)结论：组织样 液加入双缩脲试剂 A后，颜色 变化为无色，再加双缩脲试剂 B后，颜色的变 化是紫色。这说明组织样 液中含有蛋白质。从 而鉴定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的 肝脏中有蛋白质。 注意：做鉴定蛋白质的实验时 ，在鉴定之前， 要留出一些黄豆组织样 液，以便用来与化学试 剂发生反应后的颜色作对比，增强说服力。 若不用豆浆，用蛋白

7、稀释液或新鲜肝脏提取液 做实验材料，应稀释到一定程度，如果稀释不 够，与双缩脲试剂发 生反应后会粘固在试管的 内壁上，使反应不容易彻底，并且试管不易刷 干净。 实验生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定实验生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定 一、实验原理：一、实验原理： 1 1、还原糖斐林试剂 、还原糖斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀 （还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖）（还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖） 2 2、脂肪苏丹、脂肪苏丹IIIIII 橘黄色 橘黄色 脂肪苏丹脂肪苏丹IVIV 红色 红色 3 3、蛋白质双缩脲试剂 、蛋白质双缩脲试剂 紫色反应 紫色反应 4 4、淀粉、淀粉+ +碘液碘液 蓝色蓝色

8、 实验生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定实验生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定 试剂试剂 ： 1 1、斐林试剂、斐林试剂 （现配现用）（现配现用） A A液 质量浓度为液 质量浓度为0.1g/mL0.1g/mL的的NaOHNaOH溶液溶液 B B液 质量浓度为液 质量浓度为0.050.05g/ g/ mLmL的的CuSO4CuSO4溶液溶液 2 2、双缩脲试剂、双缩脲试剂（先加（先加A A液，再加液，再加B B液）液） A A液 质量浓度液 质量浓度0.1g/mL0.1g/mL的的NaOHNaOH溶液溶液 B B液 质量浓度液 质量浓度0.010.01g/mLg/mL的的CuSO4CuSO4溶

9、液溶液 3 3、苏丹、苏丹III III （或苏丹（或苏丹IVIV）染液）染液 4 4、体积分数为、体积分数为50%50%的酒精溶液的酒精溶液 5 5、碘液 、碘液 斐林试剂双缩脲试剂 甲液乙液A液B液 成分 0.1g/mL NaOH溶液 0.05g/mL CuSO4溶液 0.1g/mL NaOH溶液 0.01g/mL CuSO4溶液 鉴定物质 还原糠蛋白质 添加顺序 甲乙两液等量混匀后立即 使用 先加入A液1mL，摇匀， 再加入B液4滴，摇匀 反应条件 水浴5065加热不需加热，摇匀即可 反应现 象样液有砖红 色沉淀产生样液变紫色 3 3、蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 （1 1）植物组织样液：黄

10、豆种子或用豆浆）植物组织样液：黄豆种子或用豆浆 （2 2）动物组织样液：鸡蛋清 ）动物组织样液：鸡蛋清 1 1、糖类的鉴定糖类的鉴定：含还原糖较高，颜色较浅或近于白色：含还原糖较高，颜色较浅或近于白色 （如：苹果、梨匀浆）（如：苹果、梨匀浆） 2 2、脂肪的鉴定脂肪的鉴定：富含脂肪（植物油）的种子：富含脂肪（植物油）的种子 （如花生、核桃、蓖麻等的种子）（如花生、核桃、蓖麻等的种子） 二、实验材料选用二、实验材料选用 下列关于检测检测 “生物组织组织 中糖类类、脂 肪、蛋白质质”实验实验 操作步骤骤的叙述中，正确 的是( ) A用于鉴鉴定还还原糖的斐林试剂试剂 甲液和乙液 ，可直接用于蛋白质质

11、的鉴鉴定 B若要鉴鉴定花生种子细细胞中是否含有脂肪 ，一定需要用显显微镜观镜观 察 C鉴鉴定可溶性还还原糖时时，要加入斐林试剂试剂 ( 甲液和乙液等量混合均匀再加入) D用双缩脲试剂鉴缩脲试剂鉴 定蛋白质时质时 ，需水浴加 热热2 min才能看到紫色 例例2 2 【思路点拨拨】 【尝试尝试 解答】 _ 【探规寻规寻 律】 斐林试剂试剂 和双缩脲试剂缩脲试剂 的 比较较 (1)从成分方面比较较，两种试剂试剂 都是由NaOH 溶液和CuSO4溶液组组成的，但NaOH溶液浓浓 度相同，CuSO4溶液浓浓度不同； (2)从试剂试剂 的使用方面比较较，使用斐林试剂试剂 时时，甲、乙两液等量混匀后立即使用

12、。使用 双缩脲试剂时缩脲试剂时 ，先加入A液1 mL，再加入B 液4滴，摇摇匀； C (3)从使用条件比较较，斐林试剂试剂 与还还原糖混合后 需50 65 水浴加热热，而用双缩脲试剂鉴缩脲试剂鉴 定 蛋白质时质时 不需要加热热。 跟踪训练训练 检测检测 生物组织组织 中还还原糖、脂肪和 蛋白质质的实验实验 中，以下操作错误错误 的是( ) A只有脂肪的鉴鉴定需要使用显显微镜镜 B用双缩脲试剂检测缩脲试剂检测 蛋白质质不需要加热热 C使用斐林试剂试剂 和双缩脲试剂缩脲试剂 最好是现现配 现现用 D可溶性还还原糖的鉴鉴定，可用酒精灯直接 加热产热产 生砖红砖红 色沉淀 解析：选选D。本题题在于考查

13、查学生的动动手能力 ，实验实验 操作是否正确、规规范。正确回答这类这类 题题目除了要亲亲自动动手完成实验实验 外，熟记实记实 验过验过 程的操作程序是解题题的关键键。脂肪的检检 测选测选 用的材料是花生子叶，切片后，染色制 片用显显微镜观镜观 察。可溶性还还原糖和蛋白质质的 检测检测 都是将生物材料制成样样液，然后检测检测 ， 不用显显微镜镜。需要隔水加热热的是检测检测 可溶性 还还原糖的实验实验 ；斐林试剂试剂 的甲液和乙液要先 混合再使用，且要现现配现现用；双缩脲试剂缩脲试剂 中 的A液和B液不需混合，但也要现现配现现用。实实 际际上，该实验该实验 中有许许多可对对比记忆记忆 的知识识 点

14、，同学们们在平时时学习习中要善于去归纳总结归纳总结 。 3下列各项作为鉴定生物组织中还原性糖的 理想材料是( ) A韭菜 B鸢尾 C菠菜 D梨 解析：鉴定生物组织中还原性糖的实验，最理 想的实验材料是含还原糖量较高的生物组织(或 器官)，而且组织的颜色较浅或近于白色。因此 韭菜、鸢尾、菠菜的叶片中叶绿素的含量较多 ，颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖 作用，导致实验现象不明显，不是理想的实验 材料。而只有梨符合条件。 答案：D 在用斐林试剂鉴 定还原性糖时，溶液的 颜色变化过程为： _。 答案：浅蓝色 棕色 砖红 色(沉淀) 解析：由于斐林试剂的甲液(氢氧化钠的质量浓 度为0.1 g/mL

15、的溶液)和乙液(硫酸铜的质量浓度 为0.05 g/mL的溶液)两者混合后，立即生成浅蓝 色的Cu(OH)2沉淀，将蓝色的甲液和乙液的混合 液(刚配制的斐林试剂)注入盛有苹果组织样液的 试管中，振荡试管，溶液混合均匀，此时呈现 蓝色是Cu(OH)2的颜色。当将这支试管进行水浴 加热时，仔细观察会看到：溶液的颜色由开始 时的浅蓝色首先变成棕色，随后又逐渐变成了 砖红色沉淀。开始时的浅蓝色是Cu(OH)2的颜色 ；中间出现棕色是蓝色Cu(OH)2和砖红色的Cu2O 混合的颜色，最后出现砖红色(沉淀)是Cu2O的颜 色。 4某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片 ，当转动细 准焦螺旋时，有一部分细胞看得清 晰，另一部分细胞较模糊，这是由于 ( ) A反光镜未调节好 B标本切得厚薄不均 C细调节 器未调节好 D显微镜物镜损坏 解析：有一部分细胞看得清楚，说明物镜完好 无损，反光镜和细调节器也已调节好。而另一 部分细胞模糊的原因可能是由于切片厚薄不均 匀，厚的模糊而薄的则清楚。 答案：B 在脂肪的鉴定实验中，花生种子浸泡的时间是( ) A12 h B34 h C67 h D89 h 答案：B 解析：实验前将供实验的花生种子浸泡的目的 是容易切成完整的薄片，浸泡时间短了，不容 易切成片(易碎)；浸泡时间过长，则组织太