四川省宜宾市一中2016-2017学年高中生物 专题2 课题1 微生物的实验室培养教学设计

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1、微生物的实验室培养考点、知识点1.培养基的概念、种类、成分。2.无菌操作技术。3.消毒和灭菌的常用方法。4.制备培养基和分离纯化大肠杆菌的实验操作及注意事项。5.实验结果分析。学习目标1 基础知识方面(1)能说出培养基的种类和划分依据。(2)通过展示图片,学生了解无菌操作技术的环境和实验室常用的消毒灭菌方法,能说出各种消毒灭菌方法的使用对象和条件。(3)掌握用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养方法。2基本技能方面(1)培养和发展学生实验技能和素养。3情感态度与价值观(1)激发学生实验的兴趣,培养勇于探究未知的科学精神。重、难点重点:培养基的制备方法及微生物的接种方法。难点:纯化大肠杆

2、菌的操作过程。学习环节和内容学生活动建议教师活动建议调整记录引入新课微生物无处不在,与我们的生活、健康密切相关。前面我们学习的传统发酵技术就是利用不同微生物得到发酵产品,满足我们的生活需要。巴斯德通过实验发现并解决了葡萄酒变质变酸的问题,那么如何在实验室将微生物进行分离纯化从而应用于生产呢?这就是本专题我们要学习的内容“微生物的培养和应用”。课题1 微生物的实验室培养要获得纯净的培养物,在实验室培养微生物要满足哪两方面呀? 阅读课题背景。引导进入新课1、 基础知识(一)、培养基1.培养基概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,我们把这个基质称为-培养基。2.培养

3、基配制:(1)营养构成:不同的培养基共同的营养物质有哪些?四大营养要素,重点分析:碳源和氮源那么培养基到底需要添加哪些营养物质呢?各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。思考:为什么大多数培养基都含有这四种营养成分?这就要从细胞的化学元素组成来看,任何生物组成都离不开元素,回忆一下必修一我们学过组成细胞主要元素有哪些?是C,H,O,N,P,S,培养基是提供营养物质的一个场合。我们都知道生物生命活动离不开水,C是组成生物的最基本元素,N是主要元素,无机盐是维持细胞内外浓度平衡的重要因素。(2)不同需求:在提供以上几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足不同微生物生长的需求

4、,如对PH、特殊营养物质(如维生素)以及氧气的需求。举例说明:3.培养基的种类但是不同微生物适宜生长的环境也有差异,因此培养基的种类也多种多样,按照不同的划分方式,可分为以下多种类型的培养基:按物理状态来分:固体培养基和液体培养基。按功能来分:选择培养基和鉴别培养基。按成分来分:天然培养基和合成培养基。特别注意:选择培养基和鉴别培养基的区别和应用,举例说明【扩展】4.培养基配制原则目的要明确:根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。营养要协调:培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。pH要适宜:细菌培养基pH中性或偏碱性,霉菌培养基呈酸性。(二)、无菌技术1.获得纯净培养物

5、最关键的一步是什么?防止外来杂菌入侵。如何避开杂菌呢?(强调无菌操作措施)2.消毒和灭菌(掌握两个概念)消毒:指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌:指使用强烈的物理因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。了解消毒与灭菌的概念及两者的区别。并完成下面表格。比较项作用强度消灭微生物的数量芽孢孢子能否被消灭消毒较为温和部分活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能l 实验室常用的消毒方法: 煮沸消毒法:生活用具。 巴氏消毒法:牛奶。 化学试剂消毒:酒精擦手、氯气消毒水源等。 紫外线消毒:无菌室等。l 实验室常用的灭菌方法: 灼烧灭菌:接种环、接种针、试

6、管口及其他金属用具。 干热灭菌:玻璃器皿(吸管、培养皿等)和金属用具。 高压蒸汽灭菌:培养基、无菌水、敷料等。阅读教材14页最后一段阅读练习册P16(表解)思考并回答问题阅读教材P15相关内容结合练习册学习阅读教材并回答问题完成表格教师分别对各类培养基进行讲解课件展示内容、图片2、 实验操作用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养的实验,可分成两个阶段进行:(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基播放培养基制作视频1.实验步骤(1)计算(2)称量(3)溶化(4)调PH(5)灭菌(6)倒平板(无菌操作)倒平板具体操作:分别强调各步骤注意事项及操作方法思考(17页):培养基灭菌后,需要冷却到50左右时,

7、才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?平板冷凝后,为什么要将平板倒置?4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖和皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?观看视频思考并回答问题结合视频和教材进行讲解课内巩固 基础训练 第1-5题 通过做题回忆所学内容指引(二)微生物接种及大肠杆菌的纯化1.微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。2.平板划线法(1)原理:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。(2)其操作步骤是(视频): 将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。在酒精灯火焰旁冷却接种环,并

8、打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。 将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。 将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。 将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙,把接种环伸入平板内划35条平行线,盖上皿盖,不要划破培养基。灼烧接种环,冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。将平板倒置放在培养箱中培养。讨论:(1)为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线结束时,仍然需要灼烧接种环吗?取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物;除第一次划线外,其余划线前都要灼烧接种环的目的是消

9、灭接种环上残留菌种;取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行,其目的是防止高温杀死菌种;最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。(2)在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?以免接种环温度太高,杀死菌种。(3)在第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是获得由单个细菌形成的标准菌落。3.稀释涂布平板法:(1)原理:将菌液进行一系列梯度稀释,并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌落。(2)系列稀释操作:取盛有9mL水的无菌试管6支,编号101、102、10

10、3、104、105、106。用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中,并吹打3次,使之混匀。从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀,获得102倍液。依此类推。注意:操作中试管口和移液管应在离火焰12cm处。整个操作过程中使用了1支移液管。(3)涂布平板操作(视频)1、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中.2、取少量菌夜(不超过0.1ml)滴加到培养基表面.3、将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却810s.4、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面,涂布时可转动培养皿,使菌液分布均匀.注意:1.将涂布器末端浸在盛有体积分数为百分之七十的酒精的烧杯中.取

11、出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃.观看视频思考并回答问题视频展示实验过程强调实验注意事项三、结果分析与评价1.培养未接种培养基的作用是对照,若有菌落形成,说明培养基灭菌不彻底。2.在肉汤培养基上,大肠杆菌菌落呈白色,为圆形,光滑有光泽,边缘整齐。3.培养12h和24h后的菌落大小不同(相同、不同);菌落分布位置相同(相同、不同)。原因是时间越长,菌落中细菌繁殖越多,菌落体积越大;菌落的位置不动,但菌落数增多。4.在某培养基上出现了几种特征不同的菌落,原因有培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。【课题延伸】频繁使用的菌种利用临时保藏法保存,长期保存菌种的方法是甘油管藏法。前者利用固体斜面培养基培养后,保存在4冰箱中,每36个月转种培养一次,缺点是保存时间较短,容易发生污染和变异;后者将菌种与无菌体积等量混合后保存在20冷冻箱中。思考可能出现的现象及原因引导归纳课堂总结回顾指导小结归纳本课题主要内容巩固练习:完成点金训练课内巩固 基础训练题完成作业督促检查完成情况洗手,那还不简单。但是,并非每个人都知道正确的洗手方法。我们在数名家长中调查时发现,大多数家长都会叮嘱孩子常洗手,但对于正确的洗手方法和洗手时间的长短,并不太了解。很多家长这样理解洗手:饭前便后要洗手、每次用流动水冲洗等。5

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