动物转移因子在家禽疾病防制中的应用

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1、禽类传染病 腔内接种云斑库蠓和变尾库蠓,发现其可在这2 种库蠓体内复制,并至少维持9 d :用A D v 经 口感染变尾库蠓,也能在其体内复制达到高浓度,并且在感染后7 1 0 d 就可传播该病。此外。 赤羽病还可通过母体垂直传播。赤羽病的发生具有明显的季节性和地区性,历史上有2 次规 模较大的流行,一次是1 9 7 2 1 9 7 5 年,另一次是1 9 8 5 1 9 8 6 年。感染动物发生异常生产的时 期从8 月份到次年的3 月份,其中8 9 月份多为早产和流产,l O 月份一次年1 月份多为体形异 常,次年2 3 月份多为大脑缺损。本病在一个地区一般间隔数年会重复流行但发病的程度 也

2、许有所不同i 一般在首次流行中患病的牛羊,在再次流行时其一般不再发病。 6 防治 该病目前尚无有效的治疗方法,由于该病是通过蚊和库蠓的吸血而传播。因而消灭畜舍 内的蚊子和库蠓对本病有一定的效果。在流行季节到来前对妊娠母牛、母羊以及后备母畜接 种疫苗,可有效地预防本病的暴发流行。K u r o g i 等( 1 9 7 7 ) 将O B E l 株赤羽病病毒接种 H m U J l 细胞,吸附9 0m i n 后加入维持液继续培养。当出现细胞病变时,收集细胞培养液, 3o o Or r a j n 离心1 0m i n 后,取上清液应用或置于8 低温保存备用。制苗时加入0 1 福 尔马林,感作2

3、 4h 使其完全灭活。最后加入氢氧化铝胶作为佐剂。给牛注射2 次间隔4 周, 每次3m L 具有良好的保护作用。犊牛和妊娠羊在接种疫苗后,用强毒攻击不发生病毒血 症和胎儿感染。加强进出口检疫防止病原传人。改善环境卫生彻底消灭吸血昆虫及其孽生地, 制定计划定期进行疫苗接种,是预防本病的三项有效措施。 参考文献略 动物转移因子在家禽疾病防制中的应用 涂岳1 肖显悦2 。李恩龙。孙宏鑫。王华2 ( 1 大连三议生物工程研究所,辽宁大连1 1 6 0 3 6 :2 大连三仪动物药品有限公司,辽宁大连1 1 6 6 ; 3 大连森林动物固,辽宁大连1 1 6 0 1 3 ) 转移因子( 1 h l l

4、s f e r 血c t 0 T F ) 是白细胞中有免疫活性的T 淋巴细胞所释放的一类小分子 可透析物质【lJ ,具有传递免疫信息、激发免疫细胞活性、调节免疫功能、增强机体特异性和 非特异性细胞免疫功能等作用。T F 带有致敏淋巴细胞的特异性免疫信息,在受者体内能够 诱导T 细胞转变为特异性致敏淋巴细胞,因此它能够特异地将供者的细胞免疫力被动地转移 到受者体内,使受者获得特异性细胞免疫功能,即转移和扩大细胞免疫力。T F 不含蛋白质、 含多种氨基酸、分子质量小、无抗原性、无毒副作用、无种属差异,具有增强和调解机体的 细胞免疫和骨髓造血功能等作用,对机体免疫机能呈双向调节作用,是一种新型而又安

5、全的 免疫增强剂。 2 0 世纪七八十年代以来,随着细胞免疫学技术的发展人们对T F 的研究逐步深入并活 跃起来,对动物T F 的应用也进行了广泛的探索,并取得了可喜的进展。1 9 7 2 年、1 9 7 5 年、 1 9 7 6 年相继召开了三次国际性T F 专业性会议。目前研究的主要内容是集中在异种动物特异 性T F 的试制和在临床上应用、T F 的纯化、T F 的活性测定及临床适应症的研究、动物模型 的建立等。大连三仪生物工程研究所江国托博士等( 2 0 0 6 ) 采用新工艺利用异体动物外周血 为原料,应用细胞培养技术富集活化白细胞,提取T F ,实现工业化规模生产。本文分别从 理化性

6、质、生物学功能与作用、对疫苗的免疫增效作用和临床应用效果等方面对T F 作了较 为全面的介绍。 lT F 的理化性质及分类 动物仃的化学本质为一种低分子多肽与核苷酸连接在一起的复合分子嘲。分子质量一般 在1 0 0 0 0D a 以下,可溶、可透析、可超滤;能自由通过半透膜( 不含蛋白质) ;粗制T F 中含 有多肽、氨基酸和低分子多核苷酸物质,含有K 、N a 、C a 、M g ,z n 等金属元素:多核苷酸 中国畜牧鲁医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 含核糖和碱性腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶,但无尿嘧啶,含6 种以上氨基酸口1 T F 不被胰蛋白 酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、肼姐酶和鼢忱酶

7、等分解。T F 不耐热,5 6 、3 0 m i n 可灭活,3 7 时保持稳定6 h 在2 0 以下保存5 年活性不消失1 4 l 。不同动物、不同提取方法及不同抗原 特异性T F 的理化特性、组成成分、肽分子大小和氨基酸种类差别不大,但含量有较大差异 T F 的分类较多,根据不同的分类方法。T F 被分成不同种类。比较常见的有以下两种分类方 法。从免疫特性上分类,包括特异性T F 和非特异性T F 两大类。特异性邗是指采用某种特定 病原感染或免疫人群,动物后。提取的含该抗原特异活性的T F 。非特异性T F 是指用自然人 群或动物自细胞提取的其有多种免疫活性的T F 前者具有对特定疾病的局

8、限治疗,无种属 特异性可以在不同种属之间相互传递。后者则应用广泛。根据细胞来源不同又有不同种类 的T F ,如人转移园子( H 耵) 、猪转移因子( P T F ) 、牛转移因子( B T F ) 、羊转移因子( S T F ) 、 鸡转移因子( C T F ) 等 2T F 生物学功能与作用 2 1 增强细胞免疫功能 李相安、扬林研究发现,鸡脾邗可显著提高雏鸡外周血液A N A E + T 淋巴细胞百分率, 免疫器官脾和法氏囊的相对湿重增加明显f ,J 黄建文、姜艳芬等发现猪或鸡T F 均能明显改善 A I V ( H 9 N 2 ) 临床症状,缩短病程;并且提高淋巴细胞转化率3 1 7 4

9、 3 5 t 3 2 【6 J 。常建军、 孔庆波等发现,T F 对P B M c 有良好的刺燕增殖效果。当T F 浓度为1 5 6 9 ,L 时促淋转效果最佳, 且1 1 P 单独作用于P B M c 的效应明显优于P H A P 的协同作用1 7 l 。肖凌等发现结核特异性T F 具有 增强巨噬细胞促结核抗原预致敏淋巴细胞增殖反应的作用,推断可能与增强巨噬细胞呈递抗 原的作用有关,并且是浓度依赖性的哪。1 1 F 对中性粒细胞、巨噬细胞具有较强的趋化活性, 能够促进多形核中性粒细胞游走,刺激巨噬细胞产生淋巴细胞激活因子,使血液中性粒细胞 和腹腔巨噬细胞吞噬率提高:T F 能促进胸腺细胞分化

10、,调节淋巴细胞m R N A 的合成,使外周 血淋巴细胞转化率明显提高,恢复和增加E 玫瑰花环数,此外T F 还可使K 细胞活性低下者K 细胞活性明显增加H 。 2 2 增强体液免疫功能 T F 能够促进体液免疫,促进B 细胞活性。增加抗体滴度。史秀山将T F 加入到狂犬病疫苗 中发现加入T F 后抗体效价高且抗体产生时间提前,仅用疫苗免疫抗体出现时间较晚,免 疫后7 天抗体仍为阴性,直至第】0 天才出现阳性,而其中加入T F 3 m g 的,在免疫后第7 天抗体 阳转,效价达l :8 6 ,第2 0 天高达l :9 7 6 【1 0 】黄建文、何维明等用L T 油乳剂灭活疫苗免疫雏 鸡和蛋鸡

11、,同时试验组肌注T F ,于免疫后不同时间用L T 种毒攻击,并测定蛋鸡的淋巴细胞 转化率结果试验组免疫后产生保护力时问提前,保护期延长,淋巴细胞转化率提高【1 ”。 此外,赵支国等经实验证明T F 具有增强疫苗免疫效果、促进机钵产生良好的免疫效果、增 强机体的免疫功能等作用”“。由于B 淋巴细胞在实现体液免疫机能需要T 淋巴细胞的辅助, 因此目前普遍认为邛对体液免疫的影响主要是通过诽巴细胞调节机体的免疫机能。 2 - 3 抗免疫抑制、提升白细胞和抗放射的功能 范振青等研究发现,口服和注射可阻断由氢化可的松引起的小鼠的白细胞数、T 淋巴 细胞百分率及脾重指数的下降I l “。T F 作为免疫激

12、活剂进入机体后,可使造血系统在短期内 产生大量的白细胞,同时活化淋巴细胞。增加T 辅助细胞的产生并释放更多的淋巴细胞,促 进啉巴细胞生长和分裂,从面发挥抗放射、抗免疫抑制、增强免疫功能的作用l l 。苗乃法 采用环磷酰胺建立的免疫抑制家兔模型进行猪脾T F 提升白细胞实验,注射后第3 天即可见白 细胞总数迅速上升,第5 天可达最高峰,第8 天后趋向正常。彭贵勇等研究报道:T F 可降低 丝裂霉素对淋巴细胞转化的抑制作用,可协同5 氟脲嘧啶非常显著的增加淋巴细胞转化率。 2 4 诱导、启动干扰素的功能 用T F 启动诱生的干扰素要比只按常规方法诱生的干扰素多1 7 倍。 2 5 促进机体生长发育

13、功能 通过实验研究发现,T F 能够促进机体生长发育,具有明显的增重效果。王建文等报道 禽娄传染病 雏鸡口服O 5 m L I 0 I n U F 租制品,7 天后与未服用盯组相比,增重明显,且口服T F 组鸡精 神活泼,羽毛有光泽I l “江青艳等在试验中发现,注射脾脏T F 对粤黄鸡增重有明显的效果。 动物机体的正常生长发育一般由T 3 、T 4 和G H 协同调控而完成l G H 主要促进组织生长, T 3 、T 4 主要促进器官、组织的分化,并且G H 的促生长作用需要有适量的”、T 4 的存在。由 此推测脾脏盯促进粤黄鸡生长发育的内在机制与血液T 3 、G H 水平的升高有关。 3

14、T F 在家禽疾病中的防制与应用 3 1T F 作为免疫佐剂对鸡疫苗的免疫增效作用 3 1 1 大连工业大学孙宏鑫等“M ( 2 0 0 7 ) 在禽流感病毒特异性T F 对H 5 N l 血清亚型灭 活疫苗的免疫增效试验中。第一组疫苗免疫对照组至试验后7 3 天H I 抗体效价降低2 个滴 度:第二组,即禽流感病毒特异性T F 与疫苗同时注射组,至试验后7 3 天H I 抗体效价降低 0 7 个滴度,而第三组,禽流感病毒特异性T F 口服疫苗免疫组H I 抗体效价没有降低。试验 表明,将禽流感病毒灭活疫苗与禽流感病毒特异性T F 同时使用,对禽流感病毒灭活疫苗的 免疫效果有显著增强作用,能够

15、在一定幅度内提高禽流感病毒抗体的水平,延长抗体保持的 时间。 3 1 2 河北省永清县兽医总站王洪宝等( 2 0 0 5 ) 将T F 进入蛋鸡免疫程序中应用。T F 与禽流感、新城疫、法氏囊炎、喉气管炎等疫苗一起使用预防鸡病取得明显效果。近年来 鸡病毒性疾病发病率较高,其主要原因之一是由于鸡的免疫麻痹造成的。即虽然做了疫苗, 但仍然发病。解决这一问题的主要措施是檄活鸡的免疫系统,使之产生免疫应答T F 就解 决了这一难题 3 1 3 马凤龙等”报道,鸡脾T F 对新城疫I v 系苗( N m L o 忸系) 和传染性法氏囊精 ( I B D ) 疫苗的初免试验具有协同作用。试验组与对照组比较

16、。其琼脂扩散实验( A G P ) 的 平均效价均高于对照组,差异显著( P 0 0 5 ) 或非常显著( P O 0 1 ) 同时,试验组N D H I 的抗体效价也均高于对照组,差异有非常显著( P 如0 1 ) 。在N D I 系疫苗的加强免疫试验中, 鸡脾T F 无论是与疫苗注射,还是口服,对鸡N D I 系疫苗的免疫均有加强作用。试验组H I 效价均高于对照组,差异显著( P 0 0 5 ) 或非常显著( P 如0 1 ) 但肌注组和口服组之间的 H I 效价差异不显著。在E D s 7 6 灭活疫苗免疫试验中,鸡脾T F 对鸡油乳剂灭活疫苗的免疫 同样具有增强作用。试验组的H I 效价均高于对照组,差异显著( P 0 0 5 ) 或非常显著( P 0 0 1 ) 。 3 1 4 日穆得玛等刚报道,乌鸡1 1 P 与鸡新城疫I 系和鸡传染性支气管炎H 1 2 0 二联活疫 苗联合使

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