刚地弓形虫肌动蛋白基因的克隆、表达及重组蛋白的保护性免疫

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1、分类号: 密级: 学校代码:1 0 1 1 4 学号:2 0 0 9 1 0 1 7 3 刚地弓形虫肌动蛋白基因的克隆、表达 及重组蛋白的保护性免疫 研究生: 郝海霞 指导教 师: 殷国荣教授 申请学位门类级别: 医学硕士 专业名称: 痘厦生物堂 研究方向:生塑王程瘗苴 所在学院: 基础医学院 2 0 1 2 年5 月2 0 日 T H E S I SF O RM A S T E R SD E G R E E o FS H A N X IM E D I C A LU N I V E R S I T YI N2 0 1 2 C l o n i n ga n dP r o k a r y o t

2、i cE x p r e s s i o n o fA c t i nG e n eo f T o x o p l a s m ag o n d i ia n d P r o t e c t i v eI m m u n i t yo f N a m e R e c o m b i n a t i o nP r o t e i n R e c o mb i no t e l n S u p e r v i s o r M a j o r H A oH a iX i a P r o f Y I NG u o R o n g P a t h o g e nB i o l o g y F i e l

3、 do fR e s e a r c h B i o e n g i n e e r i n gV a c c i n e D e p a r t m e n tC o l l e g eo fP r e c l i n i c a lM e d i c i n e M a r c h ,2 0 1 2 学位论文独创性声明 本人声明,所呈交的学位论文系在导师指导下本文独立完成的研究成果。文中任何引 用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的 任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的 同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中

4、作了明确的说明并表示谢意。 本文如违反上述声明,愿意承担以下责任和后果: 1 、交回学校授予的学位证书; 2 、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报; 3 、本文按照学校规定的方式,对因不当取得学位给学校造成的名誉损害,进行公开 道歉。 4 、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。 论文作者签名:日期:塑! 二年舅旦日 学位论文版权使用授权书 本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家 有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山西医科 大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印 或其他复制手

5、段保存论文和汇编本学位论文。 本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位 仍然为山西医科大学。 ( 保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名: 指导教师签名: R 期:二竺三年上旦日 F | 期:趁垒年月翌日 ( 本声明的版权归山西医科大学所有,未经许可,任何单位及任何个人不得擅自使用) 目录 缩略词1 摘要3 A B S T R A C T ! ; 综述刚地弓形虫肌动蛋白研究进展8 肌动蛋白参与的滑行运动8 肌动一肌球蛋白动力系统8 刚地弓形虫肌动蛋白的特征一9 肌动蛋白动力学的调控机制1 0 结语11 参考文献1 2 实验一1 5 刚地弓形虫肌动蛋白基因

6、的克隆、表达、鉴定及抗原性分析1 5 前言1 6 材料与方法16 实验方法2 0 结果2 6 讨论:;4 参考文献3 4 实验二3 6 重组弓形虫肌动蛋白( r T g A C T ) 滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答3 6 前言3 7 材料与方法3 8 结果4 0 J 、结4 4 参考文献4 5 实验三4 7 重组弓形虫肌动蛋白( r T g A C T ) 滴鼻免疫小鼠诱导的免疫保护作用一4 7 实验材料4 8 实验方法4 8 实验结果4 9 讨 仑5 0 ,J 、结5 0 参考文献5 0 附录IE L I S A 主要试剂溶液配制方法5 2 附录I I 实验数据5 3 致谢5 5 个人简历5

7、6 山西医科大学硕士学位论文 缩略词 ( A b b r e v i a t i o n ) _ 一 缩略词 英文全称 中文全称 。一 a aA m i n o a c i d氨基酸 A D F A F A P A C T b p p M E C C K 8 c D N A D A B d N T P E C O l i E D T A F a c t i n F B S G A P s I E L I F N Y I g A I g G I L 。2 I L 4 I P T G L B A c t i nD e p o l y m e r i z i n gF a c t o r A c t

8、 i nf i l a m e n t A m m o n i u mP e r s u l f a t e A c t i n B a s eP a i r 3 - m e r c a p t o e t h a n o l C e l lC o u n t i n gK i t 一8 C o m p l e m e n t a r yD N A 3 ,3 - d i a m i n o b e n z i d i n e D e o x y r i b o n u c l e o t i d et r i p h o s p h a t e E s c h e r i c h i ac o

9、 l i E t h y l e n ed i a m i n e t e t r a a c e t i ca c i d F i l a m e n t o u sa c t i n F e t a lb o v i n es e r u m G l i d i n g a s s o c i a t e dp r o t e i n s I n t e s t i n a li n t r a e p i t h e l i a ll y m p h o c y t e s I n t e r f e r o n g a m m a I m m u n o g l o b u l i n

10、A I m m u n o g l o b u l i nG I n t e r l e u k i n 2 I n t e r l e u k i n 4 I s o p r o p y l t h i o - p D g a l a c t o s i d e L u r i a B e r t a n im e d i u m 肌动蛋白解聚因子 肌动蛋白丝 过硫酸铵 肌动蛋白 碱基对 B 巯基乙醇 C C K 8 试剂盒 互j b D N A 二氨基联苯胺 脱氧核糖核苷三磷酸 大肠杆菌 乙二胺四乙酸钠 短肌动蛋白 胎牛血清 滑动相关蛋白 肠上皮内淋巴细胞 Y 一干扰素 免疫球蛋白A 免疫

11、球蛋白G 白介素一2 白介素一4 异丙基硫代一p D 一半乳糖 培养基 山西医科大学硕士学位论文 一一 M i n M r M y o A O D P B S P A G E P C R r T g A C T I U - P C R S D S S D S P A G E S T A g T B S M i n u t e M o l e c u l a rw e i g h t m y o s i n A O p t i c a ld e n s i t y P h o s p h a t e - b u f f e r e ds a l i n e P o l y a c r y l a m i d eG e lE l e c t r o p h o r e s i s P o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n R e c o m b i n a t i o nT o x o p l a s m ag o n d i ia c t i n R e v e r s eT r a n s c r i

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