内毒素肺损伤小鼠肺内清道夫受体a表达及其作用研究

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1、第三军医大学 硕士学位论文 内毒素肺损伤小鼠肺内清道夫受体A表达及其作用研究 姓名:田玉恒 申请学位级别:硕士 专业:内科学(呼吸系病) 指导教师:徐剑铖 20030501 第三军医大学硕士学位论文 英文缩写 A L I A R D S S I R S M O D S L P S C D S R A M M 。 T N F d E L I S A P B S F I T C W D P a 0 2 H E 0 D r p m 2 F 8 P M A 主要英文缩写一览表 英文全称 A c u t el u n gi n j u r y A c u t e r e s p i r a t o r

2、yd i s t r e s ss y n d r o m e S y s t e m i ci n f l a m m a t o r yr e s p o n s es y n d r o m e M u l t i p l eo r g a nd y s f u n c t i o ns y n d r o m e L i p o p o l y s a c c h a r i d e C l u s t e ro fd i f f e r e n t i a t i o n S c a v e n g e rr e c e p t o r A l v e o l a r m a c r

3、 o p h a g e M a c m p h a g e T u m o tn e c r o s i sf a c t o r0 【 E n z y m a l i n k e di m m u n o s o r b e n ta s s a y P h o s p h a t e b u f f e rs o l u t i o n F l u o r e s c e i n i s o t h i a c y a n a t e W e t d r yw e i g h tr a t i o A r t e r yo x y g e np a r t i a lp r e s s

4、u r e H e m a t o x y l n O p t i c a ld e n s i t y R e v o l u t i o n s p e rm i n u t e 2 F 8a n t im o u s e s c a v e n g e rr e c e p t o rc l a s sA m o n o c l o n a la n t i b o d y P h o r b o l1 2 - m y r i s t a t e1 3 - a c e t a t e 中文全称 急性肺损伤 急性呼吸窘迫综合症 全身炎症反应综合症 多器官功能障碍综合症 脂多糖 白细胞分化抗

5、原 清道夫受体 肺泡巨噬细胞 巨噬细胞 肿瘤坏死因子a 酶联免疫吸附测定 磷酸盐缓冲液 异硫氰酸荧光素 湿干重比值 动脉氧分压 苏木素一伊红染色 光密度 每分钟转数 2 F 8 抗小鼠清道夫受体A 单 克隆抗体 佛波酪 蔓三兰墨盔兰堡主兰垡堡塞 T h e e x p r e s s i o n a n dr o l eo f s c a v e n g e rr e c e p t o r c l a s sAi n m i c ew i t ha c u t el u n gi n j u r y i n d u c e d b y L P S A b s t r a c t W eo b

6、 s e r v e dt h ee x p r e s s i o no fs c a v e n g e rr e c e p t o rc l a s sA ( S R - A ) i nl u n gt i s s u ea n d a l v e o l a rm a c r o p h a g e ( A M ) i nm i c ew i t ha c u t el u n g 蛐U r yi n d u c e db yL i p o p o l y s a c c h a r i d e ( L P S ) T h e m i c er e c e i v e d a r t

7、 i n t r a p e r i t o n e a l ( i p ) i n j e c t i o n o fL P S ( 5m g k g ) W e i n v e s t i g a t e di t S r o l eo fc l e a r i n gL P Sa n de f f e c to nm a c r o p h a g et op r o d u c ei n f l a m m a t i o n c y t o k i n e s I na d d i t i o n ,b yt h es t u d y o nm o u s e m a c r o p

8、 h a g el i n eJ 7 7 4 A 1 ,a f t e re n h a n c i n g t h e e x p r e s s i o no fS R - A o nm a c r o p h a g e ,W ei n v e s t i g a t e di fi tc o n t r i b u t et oc l e a r i n gL P Sa n d d e c r e a s i n g t h e p r o d u c t i o no fi n f l a m m a t i o nc y t o k i n e s ,a n d t od e t

9、e r m i n et h er o l e sa n d m e c h a n i s m sO fS R A M a i nr e s u l t s s h o w e d :S R - Aw a sw i d e l ye x p r e s s i o ni nm o u s el u n g ,i n c l u d i n g a l v e o l a rm a c r o p h a g e ,p u l m o n a r yv a s c u l a re n d o t h e l i a lc e l l s ,v a s c u l a rs m o o t h

10、m u s c l ec e l l s , l u n ge p i t h e l i a l ,p o l y m o r p h o n u c l e a rn e u t r o p h i l I m m u n o h i s t o c h e m i c a ls t a i n i n gs h o w e dt h a t , d u r i n gt h ec o u r s eo fA L Id e v e l o p i n g ,t h eS R - Ae x p r e s s i o nw a sg r a d u a l l yd o w n r e g

11、u l a t e d w i t ht h et i m ea f t e ri pi n j e c t i o nL P S ,t h es e p a r a t e dA Ms h o wt h es a m er e s u l t w h i l eg r o u p s 4 ha n d8 h ,s h o w e dr e m a r k e do n e I nv i t r o ,a f t e rt r e a t e dw i t hL P S ,e x p r e s s i o no fS R Ao n J 7 7 4 A 1c e l l sd e c r e

12、a s e d j u s ta sO l lA M L P S c o u l eb ed e t e c t e di nt h el u n ga t3 0 m i na f t e r i pi n j e c t i o nL P S ,t h el e v e lw a sl l 。0 9 2 ,7 6 E U m l ,t h e r ew e r en od i f f e r e n c ea m o n gt h e g r o u p s o f m i c ea tl h 、2 h 、4 h 、8 ha f t e r i pi n j e c t i o nL P S

13、 T h e l e v e l so f T N F ai nt h el u n g w a s u p 。r e g u l a t e dg r a d u a l l yi nt i m ed e p e n d e n tf a s h i o n C o m p a r e dw i t ht h el e v e li nt h el u n g o fs a l i n e i n s t i l l e da n i m a l s t h el e v e lo f T N F ai nt h el u n go f L P S i n j e c t e dm i c

14、ei n c r e a s e d s i g n i f i c a n t l y ,t h ep e a ke x p r e s s i o na p p e a r e da t2 ha f t e ri pi n j e c t i o no fL P S P M AC a n u p r e g u l a t e dm a c r o p h a g eS R - Ae x p r e s s i o n ( 直) A f t e ri n c r e a s i n gt h ee x p r e s s i o no fS R - A b y P M A ,W ea d

15、d e dL P S t os e r u R l - f r e em e d i u m ,a n d d e t e c t e dt h el e v e l so fL P Si nt h em e d i u m T h er e s u l ts h o w e dt h a tt h el e v e l so fL P Sw a sl o w e ri nP M A g r o u p st h a ni nP M A f r e e g r o u p s I na d d i t i o n ,W ef o u n dt h ee f f e c tC a nb er e

16、 s t r a i n e db yS R - Am A b ( 2 F 8 ) 适) E L I S A r e s u l t ss h o w e dt h a t ,i nt h es c r a m f r e em e d i u mw i t h o u tL P S ,t h el e v e lo f T N F w a sv e r y l o w ;i n c r e a s e dw h e nL P Sw a sa d d e d T h el e v e lo fT N F - d i n c r e a s e ds i g n i f i c a n t l y , a n d u p 。r e g u l a t e dg r a d u a l l yi nat i m ed e p e n d e n tf a s h i o n T h ep e a ke x p r e s s i o na p p e a r e da t l 2 第三军医

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