《简述果胶酶作用,检测果胶酶活性》由会员分享，可在线阅读，更多相关《简述果胶酶作用,检测果胶酶活性（27页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 课题目标： 1、简述果胶酶的作用,检测果胶酶的活性； 2、探究温度和pH对果胶酶活性的影响以及果 胶酶的最适用量。 课题重点：温度和pH对果胶酶活性的影响。 课题难点：果胶酶的最适用量。 制作果汁要解决两个主要问题: 1 果肉的出汁率低，耗时长 2 榨取的果汁浑浊，黏度高，容易出现沉淀 。 基础知识 (一)果胶酶的作用 1、果胶:植物细胞壁及胞间层的主要成分之一 ，是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合 物，它在植物细胞间层和初生壁中与纤维素结 合在一起，是重要的黏合和支撑物质。新鲜水 果、根、叶和绿茎中特别丰富。 果胶本身不溶于水，但由于含有亲水基团，果 胶与水有强大结合力，是有力的凝胶化
2、剂。 2、果胶酶：指分解果胶质的多种酶的总称。 成分: 作用: 能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层。 使榨取果汁变的更容易。而果胶分解成可溶性 的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变的澄清。 包括多聚半乳糖醛酸酶，果胶分解酶 和果胶酯酶等。 二、酶的活性与影响酶活性的因素 1、酶的活性：是指酶催化一定化学反应的 能力。 酶活性的高低可以用在一定条件下酶所 催化的某一化学反应速度来表示： 酶的反应速度常用单位时间内、单位体 积中反应物的减少量或生成物的增加量来表 示。 可用酶活性单位表示,1酶活性单位：指标准状态下 ，1 min使1 ug分子作用物发生转变的酶量。 2、影响酶活性的因素 有温度、p
3、H、酶的抑制剂等。 三、果胶酶的用量 生产果汁时,为了使果胶酶得到充分的利用,节 约成本,需要控制好酶的用量。 实验设计 1、设计实验方案；2、动手实验； 3、记录实验结果；4、得出结论 资料一：探究温度和pH对酶活性的影响 确定温度（或pH）梯度-控制温度（或pH） 的方法措施-确定水果用量-确定果胶酶用 量 （一）温度对果胶酶活性的影响 原理：在一恒定PH下通过设置温度梯度来确 定酶催化反应的最适温度。 为了探究温度对酶活性的影响，某同学设计了 如下实验方案和步骤： 取三支大小相同的试管，编号为A、B、C并分别 加入2mL淀粉溶液。 将A、B、C三支试管分别置于0、60、100 下约5mi
4、n。 分别向三支试管中加入2mL新制的淀粉酶液，振荡。 取出试管，各加入2mL斐林试剂(边加边振荡)。 热水浴检验，观察试管内物质颜色的变化。 流程示意图： 搅拌器搅拌制成苹果 泥均分装入 果胶酶水溶液等量 9支试管 9支试管 各取一支分9组分别放入30，35，40，45，50， 55，60，65，70摄氏度的恒温水箱中恒温加热 待试管内温度稳定后，将果胶酶加入相 同温度的苹果泥内恒温保持10分钟 过滤果汁，用量筒测量果汁的量 做好记录 注意事项 ： 1与其他工业用酶基本相同，果胶酶的适宜温度范 围也比较宽泛，因此，可以选用10 作为温度梯度 ，设置的具体温度为10 、20 、30 、40 、
5、 50 和60 等，也可以尝试以5 作为温度梯度。 2苹果、橙子和葡萄等水果都可以作为反应物，水果 不用去皮。如用苹果为原材料，一般可按每个中等大 小的苹果加水100200 mL的比例进行搅拌，获得稀 的苹果泥。 （二）PH对果胶酶活性的影响 原理：在一恒定温度下通过设置PH梯度来确 定酶催化反应的最适PH。 3果泥的用量可以采用5 mL左右，果胶酶的用量 可采用质量浓度为2%的果胶酶溶液2 mL。 4水浴时间可以为2030 min。 5过滤果汁时，漏斗中应放置滤纸。 6探究pH对果胶酶活性的影响，只须将温度梯度 改成pH梯度，并选定一个适宜的温度进行水浴加热 。反应液中的pH可以通过体积分数
6、为0.1%的氢氧化 钠或盐酸溶液进行调节。 流程示意图： 搅拌器搅拌制成苹果泥均分装入果胶酶水溶液等量 9支试管9支试管 各取一支分9组PH分别为5.0，5.5，6.0，6.5，7.0 ，7.5，8.0，8.5，9.0（可用0.1%的NaOH溶液和 稀盐酸进行调节）在同一温度 待试管内温度稳定后，将果胶酶加入相同 PH的苹果泥内恒温保持10分钟 过滤果汁，用量筒测量果汁的量做好记录 资料二 探究果胶酶的用量 两种设计方案： 自变量的控制：第一种可采用同浓度不 同体积的果胶酶溶液；第二种可采用同体积 不同浓度的果胶酶溶液设计对照实验，其他 无关变量保持一致。 实验流程： 1.准确称取纯的果胶酶1
7、,2,3,4,5,6,7,8,9( mg ) 配制成相等体积的酶的水溶液，取等量放入9 支试管中，依次编号19号。 2.制取苹果泥45克，分别等量装入9支试管，依 次编号为19号。 3.一段时间后将不同浓度的果胶酶分别迅速与各 试管的苹果泥混合，放入恒温水箱中。 4.不断搅拌，约20分钟后，过滤并测量果汁。 苹果泥 试管 123456789 果胶酶 试管 123456789 果汁量 （ml） 5814182020202020 旁栏思考题： 1、可以保证底物和果胶酶混合时的温度是相 同的。可以避免果泥和果胶酶混合时影响混合 物的温度而影响果胶酶的活性的问题。 2、需要。不同的温度梯度或不同的pH
8、梯度之 间就可做对照，这种对照称相互对照。 3、A同学把温度或pH作为自变量，控制不变的 有苹果泥的用量、果胶酶的用量、反应的时间 和过滤的时间等。只在实验中保证一个自变量 ，实验结果才能说明问题。B同学对自变量的处 理与A同学相同，只是因变量不同。 4、果胶酶将果胶分解为小分子物质，小分 子物质可以通过滤纸，因此苹果汁的体积 大小可以反映果胶酶的催化分解果胶的能 力。在不同的温度和pH下，果胶酶的活性 越大，苹果汁的体积就越大。 5、温度。果泥量、果胶酶的浓度和用量、 水浴时间、混合物的pH等其他无关变量应保 持不变。 小结： 1 果胶 存在 果汁出汁率低 果胶酶 半乳糖醛酸 果汁出汁率高，
9、果汁澄清 2 探究果胶酶的活性 （1）温度对果胶酶活性的影响 （2）PH对果胶酶活性的影响 3 探究果胶酶的最适用量 在最适用量前，酶量增加，催化速度加快。 在最适用量后，酶量增加，催化速度不变。 影响果汁产量的因素： 温度、pH、果胶酶的用量、酶催化反应的时间、 苹果泥的用量等。 试用曲线图表示： 影响酶活性的因素 反应速率 酶的浓度 底物浓度 反 应 速 率 受酶浓度 制约 课后练习 主要不同点是： 1、有两次瞬间高温灭毒； 2、酶处理的时间相对较长； 3、有离心分离步骤和浓缩步骤。 练习巩固 1、果胶酶能将植物组织内的果胶分解成 A 透明果汁 B 半乳糖醛酸 C 丙酮酸 D 酶制剂 2、
10、下列哪一项不是影响果胶酶活性的条件 A 温度 B pH C 酶的抑制剂 D 底物的浓度过高 3、酶反应速度可用哪一项来表示 A 单位时间内反应物的减少量 B 单位时间内产物的增加量 C 单位体积内产物的增加量 D 单位时间内、单位体积内反应物的减少 量或生成物的增加量 4、果胶酶是是分解果胶的一类酶的总称 ，它不包括 A 多聚半乳糖醛酸酶 B 果胶分解酶 C 乳糖分解酶 D 果胶脂酶 5、在用果胶酶处理果泥时，为了使果胶酶 能充分地催化反应，应采取的措施是 A 加大苹果泥用量 B 加大果胶酶用量 C 进一步提高温度 D 用玻棒不时地搅拌反应混合物 4.（2003上海高考题）如图，纵轴为酶反应速度，横轴 底物浓度，其中正确表示酶量增加一倍时，底物浓度 和反应速度的是（ ） A B C D B 典型的细胞壁是由胞间层、初生壁以及次生壁组成。很多细 胞只有初生壁，如分生组织细胞、胚乳细胞等。胞间层又称 中胶层，位于两个相邻细胞之间，为两相邻细胞所共有的一 层膜，主要成分是果胶质，有助于将相邻的细胞粘连在一起 。
