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1、生理学实验 实验一 神经干动作电位的引导及传导速 度和不应期的测定 【实验目的】 v1.学习和掌握制备蛙类神经干制作方法。 2.学习使用BL-420生物机能实验系统引导 蛙类坐骨神经干动作电位的方法。 分析神经干动作电位的基本波形、幅值 、时程，测定神经兴奋的传导速度和不应期 。 【实验原理】神经干动作电位是神经兴奋 的客观标志。它是由粗细不等、兴奋性不 同的神经纤维所组成的，故在神经干表面 记录的动作电位为复合性动作电位。这种 电位的幅度在一定范围内可随刺激强度的 增加而加大。 处于兴奋部位的膜外电位负于静息部位， 当神经冲动通过后，该处的电位又恢复到 静息水平，这一可扩布的、一过性的电位
2、变化，即动作电位。如果将两个引导电极 分别置于神经干表面，当神经干一端兴奋 时，兴奋波先后通过两个引导电极处，记 录到两个方向相反的电位偏转波形，称为 双向动作电位。 v【实验对象】 蟾蜍或蛙 v【实验器材】蛙类手术器械（粗剪刀，眼科 剪，手术剪，镊子，探针，蜡盘，玻璃分针 ，大头针，）培养皿，神经屏蔽盒，引导线 ，刺激电极，任氏液，BL-420生物机能实验 系统，废液缸，张力换能器。 【实验步骤】 1.制备坐骨神经腓神经标本 （1）破坏脑脊髓 （2）剪除躯干上部及内脏 （3）剥皮及分离下肢 （4）制备坐骨神经-腓神经标本。 2.仪器连接 v（1）开机并启动BL-420生物机能实验系统 v（2
3、）本实验采用双通道记录，将两对引导 电极分别与通道1和通道2连接，刺激电极 连接至刺激器输出接口。 连接方法如见图： BL-420生物机能实验系统 神经屏蔽盒 CH1 CH2 刺激输出 刺激电极地线C1 C2 C3 C4 仪器连接示意图 v（3）将坐骨神经腓神经标本放入神经屏蔽 盒（坐骨神经中枢端放在刺激电极上，外周 端放在引导电极上）。 v【实验项目】 v1、观察细胞外引导双相动作电位的波形特点 、测定幅值及时程。 v2、测定神经干动作电位传导速度。 v3、测定不应期： v记下第二个动作电位刚消失时的两个刺激脉 冲之间的波间隔，此时的波间隔值即为绝对 不应期。用不应期减去绝对不应期即可得出
4、相对不应期 v【结果分析】 v1.解释双相动作电位产生的机制，记录动作 v 电位的时程、幅值。(3) v2.测定神经干动作电位传导速度:V=S/T (m/s) 。（4） v3.动作电位不应期的测量（5） v4.刺激强度与复合动作电位幅值的关系（6） 【注意事项】 1.破坏蟾蜍的脑和脊髓时，应防止其耳后腺及 皮肤分泌的蟾酥毒液射入操作者的眼内或污染 实验标本。 2.制备神经标本过程中，应避免用手捏神经或 镊子夹伤神经。 3.为了防止神经标本干燥，制备过程中需不断 滴加任氏液，使其保持良好的兴奋性。 v4.将神经干放入屏蔽盒之前，用刀片轻刮引 导电极，以保证电极和神经干密切接触。 v5制作标本过程
5、中，切勿伤及神经干及其分 支，避免牵拉和其它不良刺激， v6实验过程中，应经常在标本上滴加任氏液 以保持湿润，使其保持良好的兴奋性。 v7每次刺激标本以后，必须让肌肉休息1-2 分钟，以防标本疲劳。 双向动作电位 v传导速度：动作电位在神经干的传导速度， 可用电生理学方法进行测量。测定神经冲动 在神经干上传导的距离（S）和通过该距离所 需时间（t），即可计算出神经冲动的传导速 度(V)，VS/t。 v 不应期：当双脉冲的间隔时间为20ms 左 右时，示波器荧光屏上呈现两个同样大小的 动作电位。逐渐缩短双脉冲之间的间隔，第 二个动作电位逐渐向第一个动作电位靠近， 振幅也随之降低，最后可因落在第一
6、个动作 电位的绝对不应期内而完全消失。 刺激强度与复合动作电位幅值的关系 v一根神经纤维在受到阈值以上刺激产生动作 电位不随着刺激强度增大而增大, v 但是坐骨神经干是有许多神经纤维组成的, 在受到阈值以上刺激时,由于引起不同数目神 经纤维产生动作电位,随着刺激强度增大,神经 纤维产生动作电位的数目也越多,动作电位的 幅度也就越大,当全部神经纤维都产生动作电 位时,动作电位的幅度就不会增大了 v 故在一定范围内,坐骨神经干动作电位的幅 度为何随着刺激强度增大而增大 实验报告要求 神经干动作电位引导及其传导速度和不应期测定 一、实验目的 二、实验器材 三、实验步骤 四、实验结果 1.动作电位的时程 及幅度 2. 写出阈刺激 、最大刺激强度 ； 3.相对不应期 、绝对不应期 4.传导速度： 五、思考题 1.双相动作电位产生机制。 2.动作电位随刺激增大机制，与全或无是否矛盾？
