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1、实验室安全守则一般规定 1、上课第一天请先熟悉环境，察看紧急冲洗站、洗眼站、灭火器、急救箱及安全梯等的位置，牢记“安全”是进行任何实验最重要的准则。 2、在实验室內请穿着实验服，避免穿凉鞋、拖鞋。留有长发者，戴帽套将头发捲入套內，或以橡皮筋束于后，以防止引火危险或污染实验。 3、在实验室内禁止吸烟、饮食、化妆、嚼口香糖、嬉戏奔跑，食物饮料勿存放于实验室的冰箱中，实验桌上勿堆放书包、书籍、衣服及杂物等。 4、所有实验仪器、耗材、药品等均属实验室所有，不得带出实验室。每组分配的仪器、耗材请确定清点与保管，课程结束后如数清点缴回。公用仪器请善加爱惜使用，实验前后，请把工作区域清理擦拭，并随时保持环境
2、卫生。 5、实验前详阅实验内容，了解实验细节的原理及操作规程，注意上课所告知的注意事项。实验进行中有任何状况或疑问，随时发问，切勿私自变更实验程序。打翻任何药品试剂及器皿时，请随即清理。实验后，确切记下自己的结果，严禁抄袭，确定关闭不用的电源、水、酒精灯及煤气等。 6、睡眠不足、精神不济或注意力无法集中，请立即停止实验。实验时间若延长，请注意时间的管制及自身的安全，不可自行逗留实验室过夜。 7、实验完毕，请清理实验室、倒垃圾、灭菌、关闭灯光及电源，离开实验室前记得洗手。 8、任何意外事件应立即报告师长，并应熟知相关的应急措施。 药品1、使用任何药品，请先看清楚标示、注意事项，翻阅物质安全资料表
3、，查明是否对人体造成伤害，使用完毕请放回原位。 2、新配制的试剂请清楚注明内溶物、浓度、注意事事项及配制日期，为避免污染，勿将未用完的药剂倒回容器内。 3、挥发性、腐蚀性、有毒溶剂（如甲醇、丙酮、醋酸、氯仿、盐酸、硫酸、b-mercaptoethanol、酚等）要在通风橱中戴手套量取配制，取用完后随即盖好盖子，若不小心打翻试剂，马上处理。 4、有毒、致癌药剂例如acrylamide（神经毒）、ethidium bromide（突变剂）、SDS、秋水仙素请戴手套及口罩取用，并勿到处污染，脱下手套后，应养成洗手的好习惯。 5、接触到病原材料或细菌，应迅速消毒。所有被污染的物品，在丢弃或重复使用前均
4、需先灭菌，固体培养基不得倒入水槽或下水道中。 6、使用刻度吸管取物时，切勿用嘴吸取，请用自动吸管或安全吸球。 仪器1、使用仪器前先了解其性能、配置及正确操作方法，零件及附件严禁拆卸，勿私自调整，并注意插座电压（110V或220V）之类别。 2、使用离心机时，离心管要两两对称、重量平衡，锁紧离心机转陀。冷冻离心机于开机状态时，务必盖紧盖子，以保持离心槽之低温并避免结霜。 3、实验时不要用潮湿有汗的手去操作电器，不要用手紧握可能荷电的电器，不应以两手同时触及电器，电器设备外壳均应接地。万一不慎发生触电事故，应立即切断电源开关，对触电者采取急救措施。 4、使用微波炉加热时，不可有铝箔等金属物品，瓶盖
5、必须松开，以免爆炸。加热后戴防热手套取出瓶子。5、使用UV灯时，不要以眼睛直视UV，应隔着挡板观察，完毕立即关灯。 6、超净工作台內的酒精有机溶剂及易燃物（如甲醇、乙醇、乙醚、瓦斯等）要远离火苗，不可留置火焰燃烧，万一着火，应力持镇定，沉着处理。酒精或乙醚等着火时，应使用泡沫灭火剂或湿毛巾覆盖，勿使用水冲洗。 7、使用震荡器震荡培养时，注意三角瓶务必对称放置，并用橡皮筋等夹紧，勿使其摇晃摔出台面，否则需拆开并清除玻璃碎片与培养液。 急救措施1、急性呼吸系统中毒：应使中毒者迅速离开现场，移到通风良好的地方，呼吸新鲜空气。如有休克、虚脱或心肺机能不全，必须先作抗休克处理，如人工呼吸、给予氧气、喝兴
6、奋剂（如浓茶，咖啡）等。2、经由口服而中毒：需立即用3-5%小苏打溶液或1：5000高锰酸钾溶液洗胃，洗胃时要大量地喝，边喝边使之呕吐，最简单的催吐办法是用手指或筷子压舌根，或给中毒者喝少量（15-25毫升）1%硫酸铜或硫酸锌溶液（催吐剂）。使之迅速将毒物吐出。洗胃要反复进行多次，直至吐出物中基本无毒物为止。再服解毒剂，一般解毒剂有鸡蛋清、牛奶、淀粉糊、桔子汁等。另外有些特殊解毒剂专对某种中毒而用。如磷中毒时用硫酸铜，钡中毒时用硫酸钠，氰化物中毒时用硫代硫酸钠等。3、皮肤、眼、鼻、咽喉受毒物侵害时，应立即用大量自来水冲洗，然后送医院请各专科医生处理。4、一度烧伤：只损伤表皮，皮肤呈红斑，微痛，
7、微肿，无水泡。如被化学药品烧伤，应立即用大量水冲洗，除去残留在创面上的化学物质，并用冷水浸沐伤处，可减轻疼痛，最后需要消毒，保护创面不受感染。 5、二度烧伤：损伤表皮及真皮层，皮肤起水泡，疼痛，水肿明显。创面如污染严重，先用清水或生理盐水冲洗，再以1：1000新洁尔灭消毒，不要挑破水泡，用消毒纱布轻轻包扎好，请医生治疗。 6、三度烧伤：损伤皮肤全层，包括皮下组织，肌肉，骨骼，创面呈灰白色或焦黄色，无水泡，不痛，感觉消失。在送医院前，主要防止感染和休克，可用消毒纱布轻轻包扎好，给伤者保暖和供氧，必要时注射吗啡止痛。7、炸伤：其急救措施基本同烧伤处理。但炸伤后伤口往往大量出血，应立即将伤口上部扎紧
8、，防止流血过多。如发生昏迷、休克等，应进行人工呼吸，给氧，并送医院治疗。8、电击伤：急救时首先使触电者脱离电源，为此可拉下电闸或用木棍将触电者从电源上拨开。当心别把触电者摔伤。断开电源后，检查伤员呼吸和心跳情况，若呼吸停止，立即进行人工呼吸。对心跳亦停止者要同时进行心脏挤压。电击伤比较轻微者，很快能恢复健康，重者必需请医生治疗。应该注意，触电者在进行急救时，一般不要注射强心针和喝兴奋剂。 9、一个人呼吸停止后24分钟内便会死亡，在这种情况下，如果对病人实行口对口的人工呼吸，将有起死回生的可能。 人工呼吸方法很多，有口对口吹气法、俯卧压背法、仰卧压胸法，但以口对口吹气式人工呼吸最为方便和有效。
9、A口对口或(真)吹气法：此法操作简便容易掌握，而且气体的交换量大，接近或等于正常人呼吸的气体量，对大人、小孩效果都很好。 操作方法： (1)病人取仰卧位，即胸腹朝天，颈后部(不是头后部)垫一软枕，使其头尽量后仰。 (2)救护人站在其头部的一侧，自己深吸一口气，对着伤病人的口(两嘴要对紧不要漏气)将气吹入，造成吸气。为使空气不从鼻孔漏出，此时可用一手将其鼻孔捏住，在病人胸壁扩张后，即停止吹气，让病人胸壁自行回缩，呼出空气。这样反复进行，每分钟进行1416次。如果病人口腔有严重外伤或牙关紧闭时，可对其鼻孔吹气(必须堵住口)即为口对鼻吹气。 救护人吹气力量的大小，依病人的具体情况而定。成人每次吹气量
10、应大于800毫升，但不要超过1200毫升。低于800毫升，通气可能不足；高于2000毫升，常使咽部压力超过食管内压，使胃胀气而导致呕吐，引起误吸。一般以吹进气后，病人的胸廓稍微隆起为最合适。口对口之间，如果有纱布，则放一块叠二层厚的纱布，或一块一层的薄手帕，但注意，不要因此影响空气出入。 每次吹气后抢救者都要迅速掉头朝向病人胸部，以求吸入新鲜空气。对小孩3秒一次，一分钟20次。要规律地、正确地反复进行。45次人工呼吸后，应摸模颈动脉、腋动脉或腹股沟动脉。如果没有脉搏，必须同时进行心脏按摩。 B、俯卧压背法：此法应用较普遍，但在人工呼吸中是一种较古老的方法。由于病人取俯卧位，舌头能略向外坠出，不
11、会堵塞呼吸道，救护人不必专门来处理舌头，节省了时间(在极短时间内将舌头拉出并固定好并非易事)，能及早进行人工呼吸，气体交换量小于口对口吹气法，但抢救成功率高于下面将要提到的几种人工呼吸法。目前，在抢救触电、溺水时，现场还多用此法。但对于孕妇、胸背部有骨折者不宜采用此法。 操作方法： (1)伤病人取俯卧仕，即胸腹贴地，腹部可微微垫高，头偏向一侧，两臂伸过头，一臂枕于头下，另一臂向外伸开，以使胸廓扩张。 (2)救护人面向其头，两腿屈膝跪于伤病人大腿两旁，把两手平放在其背部肩胛骨下角(大约相当于第七对肋骨处)、脊柱骨左右，大拇指靠近脊柱骨，其余四指稍开。 (3)救护人俯身向前，慢慢用力向下压缩，用力
12、的方向是向下、稍向前推压。当救护人的肩膀与病人肩膀将成一直线时，不再用力。在这个向下、向前推压的过程中，即将肺内的空气压出，形成呼气，然后慢慢放松全身，使外界空气进入肺内，形成吸气。 (4)按上述动作，反复有节律地进行，每分钟1416次。实验操作须知1、实验室设计与要求 实验室设计是由工作的目的和规模决定的，要合理布局，通常按自然工作程序先后安排成一条连续的生产线，避免有的环节倒排增加日后工作的负担或引起混乱。房屋可规划为洗涤室、灭菌室、配制室、无菌操作室、培养室、鉴定室、驯化移栽室等。1. 1准备室 需备有的设备有：鼓风干燥箱、落水架、工作台、水池、水桶、水盆、试管刷等，主要用于玻璃器皿、用
13、具和培养材料清洗；还需要有高压水龙头用于冲洗。1.2灭菌室需备有高压蒸汽灭菌装置、细菌过滤器、用于培养基及培养器械的灭菌。1.3配制室 需备有冰箱、化学实验台、药品柜、器械柜、物品存放架以及各种玻璃器皿和用具，包括各种不同容积的容量瓶、烧杯、量筒、移液管、三角瓶、磨口瓶、广口瓶、各种类型培养瓶、玻璃棒、移液管架、试管刷、电炉、微波炉等。1.4无菌操作室(接种室) 无菌操作室在工作方便的前提下，宜小不宜大，宜精细密闭，忌粗陋放散，是植物组织培养研究或生产工作中最关键的部分，关系到培养物的污染率，接种工作效率等重要指标。要求如下:(1)地面、天花板及四壁尽可能光洁、避免积染灰尘，易于采取各种清洁措
14、施。 (2)干爽、安静、清洁明亮，在适当的位置吊装紫外灯1-2盏，用以经常照射灭菌，使室内保持良好的无菌、低密度有菌状态。 (3)最好安置一小型空调机，使室内温度保持在26左右，这样就可以在工作时或不工作时都把工作室的门窗紧闭，保持与外界相对隔绝的状态，尽量减少与外界的空气对流，减少尘埃与微生物侵入。 (4)经常采用消毒措施，达到较高的无菌水平，以利完全操作提高工作的质量与效率。 (5)无菌室外应留有缓冲间，进入无菌室前在此更衣换鞋洗手及处理外界采回准备消毒培养的材料等。无菌操作室应备有超净工作台或接种箱、固定式载物台、移动式载物台、广口瓶、酒精灯、纱布、器械支架、手术剪、解剖刀、解剖针、镊子
15、等。1.5培养室应尽量安排在楼层较高处，以利于采光，减少尘埃和杂菌污染的机会。此外应考虑清洁、干燥，培养室保温隔热。培养室中距离窗户较远处的培养架应适当安装人工辅助照明的日光灯。应设计能有效通风的窗户、定期或需要时加强通风散热，如在室内地板稍高处设置进风气窗，在气窗的对侧近天花板设置排风窗，也可安装小功率的排风扇。室内应备有制冷设备、加热设备、控光设备、固定式培养架、旋转式培养架、摇床等。1.6鉴定室需备有高倍显微镜、倒置显微镜、相差显微镜、解剖镜、恒温箱、切片机、烤片台、恒温水浴、滴瓶、染色缸、载玻片、盖玻片等。1.7驯化移植室 应备有温室、弥雾装置、荫棚、移植床、钵、盆、塑料布、草炭、蛭石、粗沙等，用于试管小植株的锻炼和移植。2、操作前的准备工作接种室在接种前4-5 d必须通风换气。在接种前一天对接种室进行全面消毒，一般用40%福尔马林进行全面喷雾，并密闭24 h，然后打开换气窗10-15 min.。 接种前1 h打开超净工作台和棚面的紫外灯照射30 min。 杀菌结束后，先关掉棚面的紫外灯，再打开风机，最后关掉超净工作台上的紫外灯。在接种后体息时，要先打开台面的紫外灯，再关风机，最后打开棚面紫外灯。不能将风机与台面上的紫外灯同时关闭或先关闭风机再开紫外灯。不可穿工作服离开接种室，接种期间两边的门切记要关闭。3
