侵染烟草、萝卜的芜菁花叶病毒cp基因序列差异及烟蚜传毒能力研究

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1、M a s t e rD i s s e r t a t i o n S t u d yo nt h ed i f f e r e n c e so fg e n e s t r u c t u r eo fT u M VC P i n f e c t e dt ot o b a c c o a n dr a d i s ha n dt h ev i r u ss p r e a d i n ga b i l i t y o f M y z u sp e r s i c a e M a s t e rc a n d i d a t e :L iX i a l i a n S u p e r v

2、 i s o r :P r o f L i uY i n g h o n g M a jo r :B i o s a f e t y F i e l d :B i o s a f e t y S o u t h w e s tU n i v e r s i t y , C h o n g q i n g ,C h i n a M a y2 0 1 2 独创性声明 i I l l l1 1 1 l r l l i Ill l l f l i P r rl i j f l l l I l r l l f Y 2 0 8 6 6 7 8 学位论文题目:堡鎏塑茎! 蔓b 鲍羞董蕉生痘壹堡里基固庄到羞

3、异及烟蚜传毒能力研究 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果,文中已加 了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同 仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。 学雠文橼痞殛 签字魄硼z 年占月1 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规 定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允 许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院( 筹) 可以将学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密

4、的学位论文在解密后适用本授权书,本论文:口不保密, 口保密期限至年月止)。 学位论文作者签名:露i L 翌导师签名:多1 磺阢 签字日期:加f 年石月f 日 签字日期:乃,2 _ 年月厂日 目录 摘要I A b s t r a c t I I I 第一章文献综述1 lT u M V 的研究进展1 1 1T u M V 的生物学特性1 1 2T u M V 基因组结构和功能1 1 3T u M V 的C P 基因研究进展。l 1 4T u M V 的检测鉴定技术2 2 烟蚜的研究进展3 2 1 烟蚜的生物学、生态学特性3 2 2 对烟株的危害3 2 3 烟蚜传播非持久性病毒的蚜传机理3 弓I 言

5、1 l 哥i ” 第二章武隆地区烟草花叶病和介体蚜虫发生情况田间调查9 l 材料与方法。9 1 1 试验材料9 1 2 试验地点。9 1 3 试验设计9 1 4 试验方法9 1 5 数据处理1 0 2 结果与分析1 0 2 1 蚜虫田间种群数量消长动态。l O 2 2 有翅蚜发生与烟草花叶病的关系。1 2 3 讨论1 3 第三章烟草花叶病毒病样品的病原种类检测1 5 1 材料及方法15 1 1 供试材料1 5 1 2 试验方法1 5 2 结果与分析1 5 2 1 病原种类。1 5 2 2 烟草T u M V 流行分析1 6 3 讨论17 第四章侵染烟草和萝卜的T u M VC P 基因序列分析

6、1 9 1 材料与方法1 9 1 1 试验材料1 9 1 2 试验方法2 0 2 结果分析2 4 2 1R T - P C R 结果。2 4 2 2R T P C R 产物的克隆及重组子鉴定2 6 2 3 序列测定与分析2 6 3 讨论i :1 9 第五章烟蚜不同实验种群传播烟草T u M V 的能力3 l 1 材料与方法3 1 1 1 试验材料31 西南大学硕士学位论文 j I I I - “ 萱;i 暑i i 暑眚i ;i i ;i 宣i 暑宣昌i 暑暑宣i i i i i i 嗣暑蕾宣宣i 宣宣i ;i 宣i 昌i 葺暑昌萱暑暑暑暑宣置i 暑i 宣i 毒 1 2 方法31 1 3 试验方

7、法3 2 2 结果与分析3 2 2 1 取食不同寄主的烟蚜传毒效率测定3 2 2 2 不同虫口密度下烟蚜传毒效率测定。3 6 3 讨论4 2 结论与讨论4 5 摘要 侵染烟草、萝I 、的芜菁花叶病毒C P 基因序列差 异及烟蚜传毒能力研究 研究生:李夏莲 指导教师:刘映红研究员 摘要 烟草是我国重要的经济作物。在烟草生产中烟草花叶病发生普遍,对烟叶产量和烤烟 质量造成巨大损失,严重制约烟区烟叶生产。烟草花叶病可由烟草花叶病毒( T o b a c c om o s a i c v i r u s ,n 删) ,马铃薯Y 病毒( P o t a t ov i r u sY ,P V Y ) 、黄

8、瓜花叶病毒( C u c u m b e rm o s a i cv i r u s , C M V ) 以及近年来新发现的芜菁花叶病毒( T u r n i pm o s a i cv i r u s ,T u M V ) 侵染引起。田间 主要由烟蚜( M y z u sp e r s i c a eS u l z e r ) 进行非持久性传播。目前,T u M V 在烟田发生已呈现 出逐年扩散的趋势。田间症状表现更加复杂并已造成严重危害,已成为烟草作物上的一种 新的病毒病害。T u M V 主要侵染十字花科作物,田间侵染烟草的T u M V 是否发生变异,介 体蚜虫传毒能力有何变化,目前尚

9、无研究和报道。本论文以侵染烟草的芜菁花叶病毒和介 体烟蚜为对象,应用媒介昆虫学及分子生物学的相关技术手段,比较研究了重庆地区烟草 花叶病病原种类、烟田有翅蚜发生动态与烟草花叶病发生的关系、影响蚜虫传毒能力的侵 染烟草和萝卜的T u M V 外壳蛋白C P 基因序列差异,烟蚜不同实验种群传播烟草T u M V 的 能力,为蚜传非持久性病毒传毒机制研究以及烟草T u M V 的综合治理提供依据。本论文主 要研究结果如下: 1 武隆烟区有翅蚜发生动态与烟草花叶病发生的关系 通过对武隆烟区烟田黄板诱蚜及鉴定发现,诱集的有翅蚜主要有4 种,即烟蚜、萝 卜蚜、大豆蚜,棉蚜。其中烟蚜数量最多,所占比例最大。

10、但仅有烟蚜能够在烟株上定殖。 田间烟草花叶病的发生与有翅蚜的迁入动态紧密相关。2 0 1 1 年武隆烟区烟草花叶病在7 月 上旬始发,到7 月中下旬盛发,至7 月底8 月初烟草花叶病的发生趋于平稳。而有翅蚜迁 入烟田的高峰期为7 月中旬,加上烟草花叶病的潜育期,结果表明烟草花叶病的发生和有 翅蚜迁入数量的增加在时间上相吻合。 2 烟草花叶病病原的检测鉴定 从武隆烟区采集的1 0 0 多个烟草花叶病样品中随机选取2 4 个待测样品进行间接E L I S A 检测。结果表明,2 4 个检测样品均感染了T M V 、C M V ,P V Y ,T u M V ,4 种病毒1 0 0 复 西南大学硕士

11、学位论文 合侵染,但各病毒含量有显著的差异。其中P V Y 含量最高,T u M V 次之,C M V 最低。结 果表明武隆烟区田间烟草花叶病病毒复合侵染现象严重,P v Y 、T u M V 已成为武隆烟区的 A b s t r a c t S t u d yo nt h ed i f f e r e n c e so fg e n es t r u c t u r eo f T u M VC Pi n f e c t e dt ot o b a c c oa n dr a d i s ha n d t h ev i r u ss p r e a d i n ga b i l i t yo fM y z u sp e r s i c a e M a s t e rc a n d i d a t e :L iX i a l i a n S u p e r

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