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1、促进作用。( 2 ) 添加i 0 6 瑟，i 0 。麓孕酮组与对照组有显著性差异，。1 0 8 麓，i 0 9 骐孕酮 组与对照组差异极显著，i 0 1 1M 孕酮组与对照组无显著性差异。一定浓度的孕酮对培 养的输卵管上皮细胞s B D - 1 的表达有促进 乍用。( 3 ) 摸拟发情期激素浓度组( 添加1 0 8 M1 7 - B 一雌二醇，1 0 9M 孕酮) 与对照组有极显著差异，模拟妊娠期激素浓度组( 添 麴1 0 1 0i1 7 - 一雌二醇，圭O 一7 蘩孕酮) 与对照组有显著差异。1 7 一一雌二醇和孕酮 混合添加对s B D - 1 表达也有促进作用；因此雌性生殖道防御素的表达
2、与雌性动物的生 理周期有关。由此说明，雌激素和孕激素是防街素表达的促进因素之一，僵不是防褥 索表达的必需因素。 5 为了进一步探讨雌激素、孕激素对雌性生殖道叠一防锯素表达的促进作用机 理，培养的输卵管上皮细胞在添加雌激素拮抗剂他莫营芬和孕激素拮抗剂米非司酮处 理后，继续添加相应浓度的雌激素、孕激素，运用荧光定量R T - P C R 方法检测s B D 一1 表达情况。结果显示，添加1 0 6M 他莫昔芬作用一定时间之后，再添加1 0 8M1 7 一B 一 雌二醇对s B D - I 表达没有促进作用；丽添加1 0 一番i 米非司酮一定时间之后，荐添加l O 书 M 孕酮对s B D - 1
3、表达也不产生影响。雌激素、孕激素对B 一防御素表达的促进作用是 通过与相应的雌激素受体和孕激素受体结合实现的。 作者简介：曹贵方，教授，电子邮箱：g u i f a n g c a o 1 2 6 c o r n 体外模拟心肌微环境下胚胎干细胞向心肌样细胞夯蜊研究木 李卫东张晓刚 ( 重庆医科大学第一附属医院心内科重庆4 0 0 0 1 6 ) 目的：探讨完整成熟心肌细胞或心肌细胞裂解物对胚胎于细胞( e m b r y o n i cs t e m c e l l s ，E S C s ) 定向分化为心肌细胞的诱导作用及强度。 方法：收集昆明小鼠3 5 d 和4 d 胚龄的囊胚，分别将其培养
4、在小鼠胚胎成纤维细 胞饲养层上，4 。5 d 后取隆起生长的内细胞团块分离后再培养，观察集落的生长情况 并通过碱惟磷酸酶染色、O C T - 4 染色、等对细胞集落进行鉴定。然后取3 , , - 4 代E S C s ， 先将E S C s 悬浮培养2 3 d 形成拟胚体( e m b r y o i db o d i e s ，E B s ) ，再用大鼠心肌细胞等 诱导因素对其诱导培养。共分5 组进行定向诱导实验，即心肌细胞诱导组、心肌细胞 母霪庆枣叁然科学基金资助 3 l 条件培养液诱导组、心肌细胞裂解液诱导组、胚胎干细胞分化培养液诱导组、和对照 组。E S C s 分纯菇心瓿纲胞的结粟判
5、断，溺褶差曼微镜观察E B s 搏动情混，期免疫细 胞荧光技术检测心肌细胞特异性肌钙蛋白T ( T n T ) 、仪一肌动蛋白( a - A c t i n ) 的表达。 结果：i 采用0 。王锈胰蛋自酶- 0 。0 2 E D T A 室溢作雳2 - 4 m i n 并鞴以祝藏作瘸，分 离克隆E S 效果较好。( 2 ) 心肌细胞涛导组s 诱导分化培养第3 天起有E B s 自发性、有 节律跳动，1 2 d 时有9 3 的E B s 爨现节律性收缩。已分纯的E S C s 特异性嚣莲钙蛋自零， a - A c t i n 阳性表达率5 6 5 1 3 4 4 ，显著高于对照组( 5 O l
6、1 5 8 ) ( P O 0 5 ) 。 ( 3 ) 心脱细腱条件培养液诱导组：1 2 d 时有8 蔼醣E B s 出现节律牲收缩。邑分化的E S C s 肌钙蛋白T 、a - A c t i n 阳性表达率5 2 2 0 1 ，显著低于心肌细胞湃导组( f ) O ，0 5 ) 。4 心胍缨麓裂解液诱导组：1 2 d 时有3 6 的E B s 出现节律性收缩。已分化的E S C s 特异性肌钙蛋白T 、a - A c t i n 阳性表达率8 2 2 。4 5 ，曼著低于心脱缨脆诱导组( P 0 0 5 ) ，显著高于对照组( p 0 5 ) 。S ) 艇 胎干细胞分化培养液诱导组：1 2
7、 d 时有6 的E B s 出现节律性收缩。已分化的E S C s 特 异性飘钙蛋自T 、a - A c t i n 龋性表达率5 。1 。3 8 ，显著低于心飘细照嚣导组 ( P O 0 5 ) 。 结论：( i ) 采震4 d 艇龄的囊胚耪0 。董胰蛋鑫酶- 0 。0 2 E D T A 室温作耀2 - 4 m i n 并辅 以机械作用的消化方法有助于提商昆明小鼠E S 细胞建株能力。( 2 ) 心肌细胞和心肌细 胞裂解液均可诱导E S C s 向心飘缨胞定态分化，虽心服缨胞的诱导作用强于心脱缨飕 裂解液。 作者簿务：张晓瓣，遗讯作者，教授，电予晦簇：z x g O Z 3 3 s i n
8、 a 。c o r n 胶原蛋白一硫酸肝素生物支架猪脑内生物相容性研究螺 唐潲平1陈兴泳2 唐荣华t谢雪微t 盏祥武t穰伟l 李在望t程琼2 王 伟1 ( 1 华中科技大学同济医学院附属阍济医院神经内科武汉4 3 0 0 3 0 ) ( 2 福建磷立医院神经内稃福娜3 5 0 0 0 1 ) 嚣的：探讨胶原蛋融一硫酸翳素支架在猪脑蠹生物福容性。方法：清涪健壤的体重 4 6 K g 的小猪2 0 只，分实验组和对照组，每组l O 只。实验组通过微创手术方法将生物支 国家自然科学基金资助项目( 3 0 5 7 0 6 2 8 、3 0 7 7 0 7 5 1 ) ；华中科技犬学医工医璃交叉基会资助项目 3 2
