《人类未成熟卵母细胞体外成熟培养时间的探讨》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人类未成熟卵母细胞体外成熟培养时间的探讨（38页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、华中科技大学 硕士学位论文 人类未成熟卵母细胞体外成熟培养时间的探讨 姓名：刘敏 申请学位级别：硕士 专业：妇产科 指导教师：高颖 20090501 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 摘 要摘 要 目的：目的： 探讨未成熟卵母细胞体外成熟的时间。 方法：方法： 将未成熟卵母细胞在成熟培养液中体外培养成熟，观察未成熟卵母细胞在体外成 熟时间，成熟率及成熟后卵细胞受精率。 结果结果: GV 期成熟率 64.5%(60/93),成熟时间 56.517.7 小时,成熟时间主要集中在 44-52 小时 ,占 58.3%(35/60),受精率
2、51.7%(31/60); MI 期成熟率 77.7%(87/112),成熟时间 34.815.0小时， 成熟时间主要集中在24-32小时,占58.6%(51/87),受精率52.9%(46/87)。 结论结论: 未成熟卵母细胞体外培养成熟时间差异大,GV 期成熟时间主要集中在 44-52 小 时,MI 期成熟时间主要集中在 24-32 小时，此时间段未成熟卵母细胞体外培养成熟后 受精率，卵裂率及优质胚胎形成率均高于同期培养细胞的其他时间段。GV 期与 MI 期未成熟卵在成熟时间及成熟率上有差异 （P0.05） 。 关键词关键词: 卵母细胞；体外成熟；时间；人类 4 华 中 科 技 大 学 硕
3、 士 学 位 论 文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 Abstract Objective: To research the in-vitro maturation time of human immature oocytes. Methods: Put the immature oocytes in the maturation culture,then observe the time of maturity,the rate of maturity and the rate of fertilization. Results: the maturity rate of t
4、he phase of GV oocyte was 64.5%(60/93),the time of maturity was 56.517.7hours,the maturation time was focus between 44 to 52hours, 58.3%(35/60),the rate of the fertilization was 51.7%(31/60); the maturity rate of the phase of MI oocyte was 77.7%(87/112), ,the time of maturity was 34.815.0hours,the m
5、aturation time was focus between 24 to 32hours, 58.6%(51/87),the rate of the fertilization was 52.9%(46/87). Conclusion: The time of in vitro maturation of human immature oocyte was variance, the maturation time of the phase of GV oocyte was focus between 44 to 52hours, the maturation time of the ph
6、ase of MI oocyte was focus between 24 to 32hours，and the rates of these two phases of fertilization,cleavage and high quality embro were all higher than another phases. The maturation time and rate was different between GV stage and MI oocyte（P0.05). 【Key Words】oocyte;in vitro maturation;time;human
7、5 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 中英文缩略词表中英文缩略词表 缩略词 英文全称 中文全称 ART Assisted Reproductive Technology 人类辅助生殖技术 cAMP 3,5-cyclic adenosine monophosphate 环磷酸腺苷 CSF cytostatic factor 细胞静止因子 COCs cumulus-oocyte-complexes 卵冠丘复合物 EGF Epidermal Growth Factor 表皮生长因子 E2 estrogen 雌激素 FSH follicle
8、 stimulating hormone 卵泡刺激素 GM-CSF granulocyte macrophage colony stimulating factor 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 Gn gonadotropin 促性腺激素 GV germinalvesicle 生发泡 HAS human serum albumin 人血清白蛋白 HCG Human chorionic gonadotropin 人绒毛膜促性腺激素 HMG human menopausal gonadotropin 绝经期促性腺激素 HTF human tubal fluid 人输卵管液 ICSI Intracyt
9、oplasma sperm injection 单精子卵胞浆内显微注射技术 IGF-I insulin-like growth factor-I 胰岛素样生长因子-I IGF- insulin-like growth factor- 胰岛素样生长因子- IGF-R insulin-like growth factor-I receptor 胰岛素样生长因子-受体 IGF-R insulin-like growth factor-receptor 胰岛素样生长因子-受体 IL-6 Interleukin-6 白细胞介素-6 IVF-ET In vitro fertilization and em
10、bryo transfer 体外受精胚胎移植 IVM In-vitro maturation 体外成熟 LH luterinizing hormone 黄体生成素 MI metaphase I 第一次减数分裂 1 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 MII metaphaseII 第二次减数分裂 MAS meiosis activation sterol 减数分裂激活甾醇 MMP matrix metalloproteinase 基质金属蛋白酶 MPF maturation promoting factor 成熟促进因子 OHSS O
11、varian.hyperstimulation syndrome 卵巢过度刺激综合征 OMI oocyte maturation inhibitor 卵母细胞成熟抑制因子 PGD Preimplantation genetic diagnosis 胚胎植入前遗传学诊断 TGF2- transforming growth factor 2- 转化生长因子 2- TIMP tissue inhibitor of metalloproteinase 金属蛋白酶组织抑制物 TNF- tumor necrosis factor- 肿瘤坏死因子- VEGF vascular epidermal growt
12、h factor 血管表皮生长因子 2 独创性声明 独创性声明 本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文 中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本 人授权
13、华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密 ，在_年解密后适用本授权书。 本论文属于 不保密。 （请在以上方框内打“” ） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 前 言前 言 1978年7月25日世界上第1例试管婴儿LouisBrown在英国诞生1，从此,这项技术 在欧洲及世界范围内展开。试管婴儿发展到今天已包含有药物刺激超排卵技术、体外 授精与胚胎移植(IVF-ET)及其
14、衍生技术、显微操作技术(ICIS)、冷冻保存技术、胚胎 种植前的遗传学诊断(PGD)等多项技术。 现今不孕不育患者增加，需要通过试管婴儿的治疗方法来助孕的患者不在少数， 试管婴儿的治疗上首先会进行超排卵，但是超排卵有其副作用：如造成卵巢过渡刺激 综合症（OHSS） ，或在超排卵后取卵时发现有多个成熟及未成熟卵细胞生成。如果我 们可以在 OHSS 发生前取未成熟卵细胞进行体外培养， 成熟后再行体外受精胚胎移 植,给患者提供妊娠机会；对于超排卵后，通过采卵得到的未成熟卵可以通过体外培养 成熟，增加卵子利用率，受精后得到更多的胚胎供患者选择，亦可以提供更多的妊娠 机会。 未成熟卵细胞体外成熟培养即
15、IVM 技术（In-vitro maturation）似乎可以很好的解 决超排卵的副作用问题，可以更好的利用得来不易但却未成熟的卵子，并且通过获取 未成熟卵减少 OHSS 的过程中，可以减少患者使用超排卵药的时间和金钱，为患者减 少一定的经济负担，也为患者减少一定的精神压力。 但是目前 IVM 技术尚不成熟 ，主要是培养未成熟卵细胞的成熟液不成熟，其成 熟液成分尚在实验讨论中，未成熟卵细胞的成熟时间也不确切，因为 IVM 体外培养 时间过长或过短均可能使卵细胞错过最佳受精时间，从而影响受精及妊娠，因此合理 的培养时间值得进一步探讨。 3 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 华 中
16、科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 1 绪言绪言 不孕症患者促排卵以获取成熟卵进行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的治疗过程 中常常引起卵巢过渡刺激综合症(OHSS)， 且超排卵可使妇女在一个周期产生多个成熟 和不成熟的卵子，在OHSS发生之前取未成熟卵进行体外成熟可以减少OHSS，或对治 疗周期中所获得的未成熟卵进行体外成熟可以提高患者同一周期卵子利用率。获得的 未成熟卵母细胞，通过体外成熟，再行体外受精胚胎移植,给患者提供妊娠机会。 但是目前人类未成熟卵的体外成熟， 体外受精的结果尚不满意,未成熟卵母细胞体 外成熟时间不确定。 本文通过对所收集的205枚未成熟卵体进行外成熟培养，记录未成熟卵体外成熟 时间，对培养成熟后的卵通过单精子胞浆注射的方法进行受精，观察受精情况，及受 精后卵裂，优质胚胎形成情况。运用统计学方法对比统计GV期及MI期未成熟卵的成 熟时间及成熟率， 统计GV期及MI期未成熟卵主要成熟时间段， 并对GV期及MI期未成 熟卵不同成熟
