乳酸芽孢杆菌益生素的制备及对断奶仔猪生产性能和血清学指标的影响

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1、国内图书分类号： S 8 1 6 7 9 国际图书分类号： 6 3 6 4 密级： 保密期间： 全日制硕士学位论文 乳酸芽孢杆菌益生素的制备及对断奶仔猪 生产性能和血清学指标的影响 硕士研究生： 指导教N - 学位类 别： 学科： 研究方向： 培养单位：堵乔早位： 授予学位单位： 论文提交日期： 韩伟 徐春厚教授 农学 动物营养与饲料科学 动物营养与免疫 农学院 广东海洋大学 2 0 1 0 年4 月2 0 日 C l a s s i f i e dI n d e x ：$ 8 16 7 9 U D C ： 6 3 6 4 S e c u r i t yC l a s s i f i c a

2、t i o n ： S e c u r i t yP e r i o d ： D i s s e r t a t i o nf o rt h eM a s t e r SD e g r e e P R E P I A R A T I o NO FB A C I L L U SL A C T A T E P R o B I O T I CA N DI T SE F F E C T So N G R O W T HP E R F o R M A N C E A N DS E R o L I N D I C A r r o RI NW E A N E DP I G L E T S H a nW |

3、e i P r o f X UC h u n h o u A g r i c u l t u r e A n i m a lN u t r i t i o n & I m m u n i t y G u a n g d o n gO c e a nU n i v e r s i t y A p f i l2 0 1 0 ： - U ： n 篡时一? 一 妇体船m嘶砖一一? 一胁 圳 叩畔妇胁咖 C & 跚R U & 广东海洋大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得 的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个 人或集体已

4、经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承 担。 作者签名： f 2 0 细年 厂t 一、 6 具| 丫B 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和 借阅。本人授权广东海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于1 、保密口，在年解密后适用本授权书。 2 、不保密团。 ( 请在以上相应方框内打“4 ”

5、) 作者签名： 导师签名： 月 月 孑日 fY E t年年 彳h O O 2 2 乳酸芽孢杆菌益生素的制备及对断奶仔猪 生产性能和血清学指标的影响 摘要 本文对3 株乳酸芽孢杆菌的产酶性能和芽孢形成率、3 株菌共生发酵的液体培养 基和半固体培养基的成分、3 株菌共生发酵液的抑菌活性及胞外代谢产物的成分进行 了试验研究，用断奶仔猪对乳酸芽孢杆菌益生素作了应用试验，为乳酸芽孢杆菌益生 素的开发与应用奠定了基础。 用不同的产酶发酵培养基培养乳酸芽孢杆菌S C 、S L l 和N T 株，通过测定待测 粗酶液的酶活性表明：3 株菌均产生蛋白酶和纤维素酶，不产淀粉酶、脂肪酶和D 甘露聚糖酶；在发酵7 2

6、h 后乳酸芽孢杆菌S C 、S L l 和N T 株的蛋白酶活力分别为 1 4 2 6 2 9 2 、1 4 4 9 2 9 、1 4 3 9 3 2 6U m L ，纤维素酶活力分别为7 6 2 、6 6 4 、4 5 2U m L 。 通过测定发酵液p H 值，确定3 株菌在发酵1 2h 后产酸量达到平衡状态，并维持3 6h 。 通过测定芽孢形成率，确定3 株茼随着发酵时I 、日J 的延长，芽孢形成率逐渐提高。 用牛津杯双层平板定量扩散法检测3 株菌代谢产物的抑菌活性，结果表明：代谢 产物有抑菌活性，对金黄色葡萄球菌有极强的抑制作用，对大肠埃希菌抑制作用较弱。 通过G C M S 分析，表

7、明3 株菌胞外代谢产物中含有抑菌物质和芳香类物质，初步确 定抑菌物质为：烯丙基苯酚、沙丁胺醇、2 异丁基4 甲基噻唑；芳香类物质为：1 4 ( 1 ，1 二甲基乙基) 2 ，6 二甲基3 ，5 二硝基苯基 乙酮和丌米司酮。 用豆粕、豆汁、玉米粉、麸皮、白糖、K 2 H P 0 4 、M g S 0 4 、M n S 0 4 、N a C I 等 成分配制不同的液体发酵培养基，通过测定3 株菌共生发酵液中的蛋白酶、纤维素 酶、p H 值和芽孢形成率筛选出适宜的液体发酵培养基配方为：1 0 豆汁1 0 0m L L ， 白糖6 0 L ，K 2 H P 0 41 5 L ，M g S 0 40 6

8、g L ，M n S 0 40 1 L ，N a C l5g L ，p H 值自然。 用不同添加量的豆粕、麸皮、鱼粉、白糖和水分配制半固体发酵培养基，通过 测定3 株菌共生发酵物中的蛋白酶、纤维素酶、p H 值和细菌总数筛选出适宜的半固 体发酵培养基配方为：按豆粕6 0 0g k g 、麸皮2 0 0g k g 、鱼粉1 0 0g k g 、白糖1 0 0g k g 配制成固形物，按固形物与水的比例为1 ：1 2 ( g m L ) 添加自来水，p H 值自然。在3 株 乳酸芽孢杆菌共生发酵后的半固体发酵培养基中添加3 0 0g k g 麸皮，搅拌均匀，4 5 烘干，粉碎，测定其中的芽孢数，即

9、为乳酸芽孢杆菌益生素。 选用4 5 头2 8 + 2 日龄杜长大三元杂交断奶仔猪，分为5 组，每组设3 个重复， 每重复3 头仔猪；对照组饲喂基础日粮；抗生素组在基础日粮中添加2g k g 阿莫西林； 3 个试验组在基础同粮中添加乳酸芽孢杆菌益生素，添加量分别为5 、1 0 、2 0g k g ； 试验期为2 8d 。试验结果表明：1 0g k g 益生素添加量的仔猪日增质量提高最多，比 l 对照组增加1 1 5 4 ( P 0 0 5 ) 。 广东海洋大学硕士学位论文 表6 - 5 乳酸芽孢杆菌益生素对断奶仔猪血清l g G 和I g A 的影响 T a b l e6 5E f f e c

10、t so f1 a c t a t eb a c i l l u so nI g Ga n dI 烈o fw e a n e dp i g l e t s ( g L ) 项目 日龄 对照组 抗生素组 5g k g 益生素1 0e C k g 益生素2 0g k g 益生素 2 3乳酸芽孢杆菌益生素对断奶仔猪粪便大肠埃希菌数的影响 乳酸芽孢杆菌益生素对断奶仔猪粪便大肠埃希菌数的影响，结果见表6 - 6 。由表 6 - 6 可以看出：试验1 4d 时，抗生素组粪便大肠埃希菌数最低，5 、1 0 、2 0g k g 益生 素添加组粪便大肠埃希菌数均比空白组低，且下降一个数量级；试验2 8d 时，抗

11、生 素组大肠埃希菌数有所上升，5e C k g 和1 0g k g 益生素添加组在1 4d 时差别不大，这 表明饲喂低剂量乳酸芽孢杆菌能够维持肠道中大肠埃希菌数，2 0g k g 添加组粪便大 肠埃希菌数和抗生素组同在一个数量级，均比空白组低，这表明饲喂高剂量的乳酸芽 孢杆菌益生素和抗生素效果相当。 表6 - 6 乳酸芽孢杆菌益生素对断奶仔猪粪便人肠埃希菌数的影响 T a b l e6 6E f i e c t so f1 a c t a t eb a c i l l u so nE s c h e r i c h i sc o l ii nf a e c e so fw e a n e dp

12、 i g s ( C F U g 、 采样时间对照组抗生素组 5 k g 益生素 1 0g k g 益生素2 0g k g 益生素 4 2 日龄 1 8 9 x 1 0 7 5 1 1 0 33 8 1 0 61 1 8 1 0 01 2 5 x 1 0 0 ， 乏 5 6 日龄 1 3 4 x 1 0 8 1 4 7 1 0 5 1 2 5 x 1 0 69 4 1 0 63 3 x 1 0 3 讨论 3 1乳酸芽孢杆菌益生素对断奶仔猪生产性能的影响 周映华等【8 0 J 研究结果表明：在仔猪基础日粮中添加0 1 复合益生菌制剂( 主要 成分为纳豆芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌和酵母菌) ，日增质最

13、比对照组提高6 5 3 ，料 重比下降3 9 ，腹泻率下降1 5 5 5 。戴荣国等峭l J 研究结果表明：在仔猪饲粮中添 加O 5 益生菌组合( 主要成分为地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和蜡 状芽孢杆菌) ，平均日增重提高1 5 7 8 ，耗料增重比降低6 4 ，腹泻率降低5 1 3 1 。 D a v i s 等【8 2 】研究结果表明：在生长育肥猪日粮中添加0 0 5 益生素( 主要成分为枯草 芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌) ，采食量较对照组下降，平均日增质量比显著提高。本试 验结果表明：在仔猪基础同粮中添加1 0g k g 和2 0g k g 乳酸芽孢杆菌益生素，平均R 增质量比对

14、照组分别提高1 1 5 4 和7 3 3 ；料质量比降低0 和3 9 5 ；腹泻率降 4 5 乳酸芽孢杆菌益生素的制备及对断奶仔猪生产性能和血清学指标的影响 低2 4 ：平均日增质量高于周映华等峭U J 报道的试验结果，但低于戴荣国等l J 报道的 试验结果；本试验与D a v i s 等【8 2 1 试验结果不同，可能与添加益生菌剂量较大或使用菌 种不同有关；腹泻率降低很少，仅为2 4 ，原因是对照组仔猪腹泻率很低，故没有 很好地反映出乳酸芽孢杆菌益生素对断奶仔猪腹泻的治疗效果。 3 2 乳酸芽孢杆菌益生素对断奶仔猪血清学指标的影响 血糖浓度与动物的生长性能有一定的正相关，血清葡萄糖升高意味

15、着仔猪肠道对 饲料碳水化合物的消化吸收作用增强。试验结果表明：在仔猪基础日粮中添加5g k g 和1 0g k g 乳酸芽孢杆菌益生素，血清葡萄糖含量比对照组提高2 5 5 9 ( P 0 0 5 ) ，说明乳酸芽孢杆菌能提高断奶仔猪对淀粉和非淀粉多糖的消化率。 血清总胆固醇水平高低反映了胆固醇合成及日粮中脂类在机体内的吸收利用状 况。猪在不同日龄时血脂含量不同，1 月龄时含量最高，之后明显降低瞵引。试验结 果表明：4 2 日龄仔猪的血清总胆固醇含量明显高于5 6 日龄，与研究报道的相同。日 粮中添加乳酸芽孢杆菌益生素可使仔猪血清总胆固醇含量提高，说明仔猪脂类代谢处 于较高水平，这可能是仔猪生

16、产性能得到改善的原因之一。 血清白蛋白是血浆中含量最丰富的载体蛋白【洲，血清总蛋白可反映动物机体营养 与免疫状况。本试验结果表明：在日粮中添加5g k g 益生素可使4 2 日龄仔猪的血清 白蛋白含量比对照组提高2 8 3 4 ，且差异显著；在5 6 日龄时，3 个试验组仔猪的血 清白蛋白含量均极显著高于对照组和抗生素组。对于仔猪血清总蛋白，在4 2 日龄时， 1 0g k g 和2 0g k g 益生素添加组的含量极显著高于对照组；在5 6 日龄时，3 个试验组 的含量均极显著高于对照组，这一结果与梁明振等峭5 J 报道的相同。 血清中I g G 和I g A 含量反映出机体的免疫机能状况。孙鸣掣8 6 峙艮道，在基础日 粮中O 1 合生素，仔猪血清中I g G 和I g A 含量与对照组相比