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1、动物繁殖学实验实习指导动物科学专业用江中良 王立强 李青旺 编西北农林科技大学二零零四年五月前 言随着现代动物繁殖技术的不断兴起和发展，要求动物科学及相关专业的本科学生在生产中能够掌握相应的专业知识和实践技能，有效控制动物繁殖过程，以达到提高动物繁殖率的目的。为此，我们编写了这本实验实习指导，让学生在学习动物繁殖生理及繁殖原理等基础知识的过程中，重点掌握动物繁殖技术的操作方法。课程实验是为了加深、验证动物繁殖理论和各种繁殖技术的操作要领，教学生产实习是在生产实践中，进一步系统地掌握动物的人工授精技术、发情鉴定与控制技术、妊娠诊断技术、胚胎移植技术及动物繁殖率的统计研究等实践活动，使学生在与生产
2、实践的感性接触中，将抽象的理论知识和实践生产相结合，达到一方面提高学习兴趣，另一方面了解畜牧生产和基本掌握现代动物繁殖技术的目的。由于时间仓促，加之水平有限，书中疏漏和不足之处在所难免，恳请老师和同学们提出宝贵意见。 编 者2004年4月目 录实验指导实验一 未孕母畜生殖器官观察1实验二 公畜生殖器官观察8实验三 精液品质的感观检查及精子活率、密度检查、 理化因素对精子的影响12实验四 精子数量计算和畸形率的测定15实验五 人工授精器械识别及假阴道的安装20实验六 母马（驴）、母牛生殖器官的直肠检查（一）23实验七 母马（驴）、母牛生殖器官的直肠检查（二）27实验八 母马（驴）、母牛生殖器官的
3、直肠检查（三）28实验九 动物胎膜的识别29实验十 家畜骨盆及分娩时胎儿与产道的关系32实验十一 母牛直肠把握输精法35实验十二 超数排卵、同期发情及胚胎移植 37实习指导实习一 发情母畜的外部观察和阴道检查40实习二 母畜妊娠诊断（一）43实习三 母畜妊娠诊断（二）46实习四 配种站见习48实习五 家畜繁殖率统计51实习六 精子存活时间及存活指数的测定54附：家畜人工授精技术操作规程56一、牛冷冻精液人工授精技术操作规程56二、猪人工授精技术操作规程58三、羊人工授精技术操作规程61四、马（驴）人工授精技术操作规程65五、犬人工授精技术操作要点68六、狐人工授精技术操作要点69七、兔人工授精
4、技术操作要点71实验指导实验一 未孕母畜生殖器官观察一、实验目的观察各种未孕母畜生殖器官的解剖特点，了解各部分的相互关系；认识子宫动脉的来源及其分布；观察卵巢、输卵管和子宫的组织构造。为了解生殖器官生理及掌握直肠检查和妊娠诊断奠定基础。二、实验材料1. 各种未孕成年母畜生殖器官标本、模型与挂图；卵巢、输卵管、子宫的组织节片。2. 解剖刀、剪、镊子、探针和搪瓷盘。三、实验内容（一）生殖器官的组成及其自然位置母畜的生殖器官包括卵巢、输卵管、子宫、阴道、尿生殖前庭、阴唇和阴蒂。前四部分称为内生殖器官，后三部分称为外生殖器官，也称外阴部。母畜的整个生殖器官均位于骨盆及其前方的腹腔内，上面为直肠和小结肠
5、，下面是膀胱，前下方为小结肠和大结肠。牛的左前侧为瘤胃，马的右前侧为盲肠。所以当手臂伸入直肠时，除了可以触摸到上述器官外，还可以清楚地摸到大部分的生殖器官。子宫以前的内生殖器官靠子宫阔韧带连接在体壁的上方，保持其在腹腔及骨盆腔内的自然位置。子宫颈及以后的各部分，依靠结缔组织及脂肪固定在骨盆侧壁上。母牛、母马、母羊、母猪的生殖器官1.卵巢2.输卵管3.子宫角4.子宫颈5.直肠6.阴道7.膀胱（二）卵巢1. 卵巢的形态结构观察（1）观察未孕母畜发情周期内各时期卵巢的外形。（2）作卵巢的水平切面，观察其内部构造。牛卵巢呈椭圆形、似青枣大。排卵后多不形成红体（血凝块），形成的黄体凸出于卵巢表面并大部分
6、深嵌入卵巢的髓质部。卵巢位于两侧子宫角尖端的外侧下方、耻骨前缘附近。猪卵巢有很发达的卵巢囊，卵巢和输卵管伞有时包在卵巢囊内，其形状随母体成熟的程度而有不同，幼小母猪卵巢的形状很像肾脏，在接近性成熟时，由于卵巢上有许多小的卵泡，因此形状很象桑椹，体积逐渐增大。达到性成熟时，卵巢上有许多大的卵泡及红体或黄体，很象一堆葡萄，在此期间卵巢体积最大。羊卵巢比牛卵巢的形状圆，体积也小，其他特点同牛。马卵巢形状似豆形，体积如鸽蛋大，成熟卵巢的一边（自由缘）内陷形成排卵凹。根据发情周期的不同时期，卵巢的直径大小为37cm不等。由于卵泡发育，卵巢的外形亦随之改变，带有黄体的卵巢体积虽增大，但外形变化不明显。卵巢
7、的位置在两侧子宫角尖端的外侧上方，排卵后首先形成红体，在黄体组织初形成时，皱襞状包着红体，然后在黄体形成过程中，红体逐渐被吸收，老黄体的体积缩小，一端指向排卵凹。 哺乳动物卵巢组织构造模式图1.原始卵泡 2.初级卵泡 3.次级卵泡 4.三级卵泡 5.成熟卵泡6.红体 6、.黄体正在形成，红体逐渐被吸收 7.黄体 8.白体 9.闭锁卵泡 10.间质细胞 11.输卵管伞 12.放射冠细胞 13.卵子 14.细胞核 15.卵丘 16.粒膜细胞 17.内鞘膜 18.外鞘膜驴的卵巢特点同马。犬卵巢呈卵圆形像一个蚕豆。长约2cm，直径1.5cm。卵巢系于腹膜皱褶包裹着神经、血管的卵巢系膜上。卵巢的形状决定
8、于其上存在的卵泡及黄体。卵巢及其附件的长度受年龄及妊娠的影响。两侧卵巢分别包被在脂肪覆盖着的卵巢囊中，发情期的成熟卵泡直径可达6mm。母驼鸟卵巢只有一个，位于左肾上方，卵巢形状大小因机能状态及年龄而有很大变化。小卵泡为珠白色，此后，白卵黄和黄卵黄交替聚集。当性成熟时卵黄形状如葡萄串。卵泡不形成卵泡腔。母狐卵巢位于第三和第四腰椎处，肾脏后缘，左侧卵巢比右侧卵巢稍前，呈扁平状、灰红色。发情期卵巢长2cm、宽1.5cm，卵巢被脂肪组织所覆盖。2. 卵巢切片的观察 先用低倍镜作概略观察，找出卵巢的生殖上皮和白膜，卵巢的实质可分为皮质和髓质，髓质位于卵巢中央，主要由结缔组织、血管和神经所组成。皮质在周围
9、，占卵巢的大部分，由许多大小不等的卵泡、少量黄体以及结缔组织所构成。挑选较清楚的各种卵泡移至高倍镜下仔细观察。（1）原始卵泡 位于生殖上皮层内，中间为一卵原细胞，周围有一层扁平卵泡细胞所围绕。（2）初级卵泡 卵泡呈球形，直径为3050m，卵原细胞位于卵泡中央，周围包着一层立方或柱状的卵泡细胞。卵原细胞的体积较大，中央有个圆形的泡状核，核内染色质稀少，着色较浅，核仁明显。胞浆中除含有少量线粒体和内网器以外，还含有少量卵黄颗粒。（3）次级卵泡 初级卵泡经过发育和成长即成为次级卵泡。其主要变化是卵原细胞，体积增大，此时称为初级卵母细胞，卵泡细胞的层数增多。（4）生长卵泡 出现小的卵泡腔。随着生长，许
10、多小腔合并为一个大卵泡腔包围着卵母细胞。注意观察： 卵母细胞 在生长期的初级卵母细胞渐次增大，胞浆中线粒体和卵黄颗料增多。内网器很发达。平滑内质网较糙面内质网多。致密的板层结构减少，而核原粒增多。 卵泡细胞 由单层增至多层，细胞呈立方形。可见有丝分裂现象，胞浆内的内网器发达，常偏向含有卵泡液的一侧，因此可能与卵泡液的形成有关。 透明带 为较均匀一致的半透膜。位于卵细胞和卵泡细胞之间。此膜主要由卵泡细胞所分泌，但亦有人认为是由卵细胞产生。透明带周围的卵泡细胞呈柱状，作辐射状排列或为放射冠细胞。 卵泡腔 当卵泡不断增大卵泡细胞也不断增多时，在卵泡细胞间出现小腔，腔内含有少量的由卵泡分泌的卵泡液。许
11、多小腔相互融合形成一个大腔即为卵泡腔。卵细胞及其周围的一部分卵泡细胞被挤压至卵泡的一侧，形成突向卵泡腔内的隆起称为卵丘。其余的卵泡细胞排列成数层构成卵泡壁的颗粒细胞层。 卵泡膜 在卵泡的生长期，卵泡周围的结缔组织呈有规则的排列形成卵泡膜。卵泡膜分为内外两层，外层称为外膜，含有致密的结缔组织和梭形细胞，内层为内膜，含有疏松结缔组织、丰富的血管和许多圆形或多角形的内膜细胞；其胞体较大，核呈椭圆形。（5）成熟卵泡 卵泡发育到最后阶段，其体积很大突出于卵巢表面。此时初级卵母细胞长大成熟，核呈空泡状，染色质较少，核仁明显。胞浆内富有卵黄颗粒。排卵前即进行第一次成熟分裂，结果形成大小不等的两个细胞。大细胞
12、称为次级卵母细胞，小的称为第一极体，呈椭圆形，位于透明带与次级卵母细胞之间，主要由核质构成，以后逐渐退化。成熟期卵泡膜的内外两层分界明显。内膜增厚，内膜细胞肥大，类脂质颗粒退化。由于卵泡液增多使卵泡腔扩大，颗粒层随之变薄，细胞排列整齐。有时可见到细胞分裂，透明带增厚，放射冠与周围的卵泡细胞之间出现裂缝，彼此的联系松驰，以适于卵细胞的排出。（6）黄体 黄体有颗粒黄体和鞘黄体之分。细胞呈多面形，含有球形细胞核，鞘黄体细胞较少，它们包围在颗粒黄体细胞外面或者分布在颗粒黄体细胞之间，鞘黄体细胞的外面则是黄体的被膜。在黄体的中央有结缔组织。（三）输卵管1. 输卵管的形态结构观察 输卵管的子宫端与子宫角尖
13、端相连接，称为宫管结合部，输卵管的前1/3段较粗，称为输卵管壶腹部；后2/3段变细，称为输卵管峡部，两者的连接部分称作壶峡结合部。马及猪的输卵管与子宫角之间有明显界限，牛羊则不明显，从马的子宫角内部观察，可见到输卵管开口于一粘膜乳头上。注意观察输卵管的形态及其与卵巢、子宫的关系。马的输卵管有很多弯曲，输卵管的腹腔端扩大呈漏斗状，其边缘不整齐，称为伞。伞附着在排卵凹旁边，卵巢囊比较发达。牛羊的输卵管弯曲较少，亦有漏斗状扩大部分，伞不发达。猪的输卵管有许多弯曲，其伞的开口接近卵巢囊的底部。犬的输卵管平均长度为410cm，直径12mm，具有漏斗状的伞部开张在卵巢旁。开始一段沿卵巢囊外侧向前走向，然后转向到卵巢囊的内侧，再沿内侧向后走向。输卵管的弯曲度较小，直而细的峡部与子宫的圆形起始部相接，所以输卵管与子宫之间的界限是非常明显的。狐输卵管长57cm，被脂肪组织所覆盖，与犬的相似。驼鸟输卵管为一弯曲长管，它从卵巢附近向后一直延伸到泄殖腔，可以明显分
