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1、实验七 理化物质对离体灌流蛙心的影响,一、实验目的,1. 学习离体蛙心的灌流方法 （离体实验的优势？） 2. 用离体蛙心灌流的方法观察：, 离子浓度(Na+、K+、Ca2+) 酸、碱度 肾上腺素（Adr）乙酰胆碱（ACh）,对心脏活动的影响,二、实验原理,正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。 蟾蜍心脏离体后，用理化特性近似于其血浆的任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变（心脏跳动的频率和幅度）。,三、实验动物及用品,BL-420生物机能实验系
2、统 张力换能器 蛙心夹 蛙心插管 万能支台 蛙类手术器械 滴管,任氏液 0.65NaCl lKCl 1乳酸 2.5NaHCO3 1CaCl2 l：10000肾上腺素 l：10000乙酸胆碱,1.动物的捉拿、捣毁脑和脊髓,毁脑髓,毁脊髓,刺蛙针,枕骨大孔,四、实验步骤,左主动脉,右主动脉,动脉圆锥,心脏,剪皮,2.观察手术过程和解剖结构,剪开胸骨,剪开心包膜,3. 在两个主动脉干下穿一根细线，将心脏翻向 头侧，在静脉窦的远端结扎，阻断静脉回流。,静脉窦,4. 将心脏翻回原位置，结扎右侧主 动脉干, 左侧主动脉干远心端结扎并剪口。,剪口,5. 蛙心插管向左后、向下旋转，于心缩期插入心室内。,泵血,
3、6. 将预置线的活结扎死,并固定于插管壁的小钩 上,于各结扎线远端将心脏连同静脉窦一起剪下。,小钩,扎线,泵血,换液,7. 用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，将心脏机 械活动通过换能器转换为电信号输入到电脑 。,微机操作,（1）启动微机，BL-420,显示软件界面； （2）实验项目循环实验蛙心灌流 （3）挂上蛙心，自动调零， 等待屏幕图形稳定； （4）开始实验，描记正常心搏曲线； （5）滴加药物，观察实验项目。,开 始 做 实 验,加药,加药,五、观察项目,1.记录正常心搏曲线，观察心率及收缩幅度，作为对照,正常心搏曲线,曲线幅度 收缩的强弱 曲线疏密 心率 曲线规律性 心跳的节律性 曲线基线 舒
4、张的程度,2. 完全等量置换0.65%NaCl溶液， 观察心搏曲线变化。,3. 用任氏液换洗三次，待心搏曲线恢复正常后， 加入1%KCl 12滴，观察心搏曲线变化。,4. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后， 加入2CaCl212滴，观察心搏曲线变化。,5. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加 入1:10000 肾上腺素12滴，观察心搏曲线变化。,6. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加 入 1:100000 乙酰胆碱12滴，观察心搏曲线变化。,7.用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加入3%乳酸12滴，观察并记录心搏曲线变化。待效应明显后，再加入2.5% NaHCO3 12滴，观察并记录心搏曲线变化。,六、注意事项,1、连接蛙心夹和张力换能器的手术线松紧适宜。 2、蛙心插管内液面均应保持同一高度。 3、各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。 4、加试剂时，每次不宜太多，先加1-2滴，如作用不明显再补加。 5、随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润状态。,Thank you!,祝同学们实验成功！,结果分析,
