粪便检查病原学诊断

《粪便检查病原学诊断》由会员分享，可在线阅读，更多相关《粪便检查病原学诊断（80页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、寄生虫病诊断、流行、 防治 与临床,（1）询 问 病 史 (History)：感染史、排虫 史及临床症状,（2）体 格 检 查 (Physical examination)： 皮下包块、皮疹,一、Diagnosis of Parasitosis,患者，男，59岁，高校教师，长沙市人，因生食鱼片1月余在腹部皮肤出现匍行疹。经皮肤组织活检，在切片中发现棘颚口线虫幼虫切面，后从组织块中分离到残存的虫体。,一、寄生虫病诊断(Diagnosis of Parasitosis),（1）询问病史 ( Taking History) 感染史、排虫史及临床症状,（2）体格检查 ( Physical Examin

2、ation) 皮下包块、皮疹,（3）实验室检查 (Laboratory test),实验室检查 (Laboratory test),1、基本原则 ( Basic principle ) 2、注意事项 (Note) 3、病原学检查方法 ( Etiological test),（1）寄生虫通过宿主的排泄物、分泌物、 血 液离开人体，繁殖力强，感染较 重 直接到宿主的排泄物、分泌 物、血液中 查找离体阶段。,1、基本原则( Basic principle ),A. Lumbricoides egg,S. Japonicum egg,B. Malayi Microfilaria,Trichomonas

3、 vaginalis,（2）寄生虫通过宿主的排泄物、分泌物、 血液离开人体。对感染较轻、数量较 少或离体阶段个体太小者，可采取浓 集法查找离体阶段。,1、基本原则( Basic principle ),Ancylostoma egg,Clonorchis. sinensis egg,（3）寄生于体内却在肛周产卵或虫卵在 经过肛门时粘附在肛门周围采 用肛门拭子法查虫卵。,1、基本原则( Basic principle ),Enterobius. vermicularis egg,Taenia egg,（4）有离体阶段的寄生虫在查不到离体 阶段时，又高度怀疑为感染者或进 行大面积人群调查可采用免疫

4、 学检查。,1、基本原则( Basic principle ),Circumoval precipitin test (COPT),（5）寄生于体内却无离体阶段或呈隐性 感染可采用组织活检法查寄生 阶段和血清学检查。,1、基本原则( Basic principle ),Toxoplasma gondii trophozoite,Trichinella spiralis cyst,（1）注意蠕虫卵之间和原虫包囊之间的鉴别， 以及蠕虫卵与各种相似物之间的鉴别；,2、注意事项 (Note),（2）注意各种检查方法的适应对象。,（3）有些寄生虫要注意采集标本的时间及 送检的时间。,（4）有些寄生虫的离

5、体阶段有间隙性排放 的特点，应反复多次检查。,（5）有些寄生虫的离体阶段具有感染性， 实验室检查时应防止实验室感染。,（6）血清学检查应考虑交叉反应、假阳性 和假阴性的存在，仅有辅助诊断意义。,2、注意事项 (Note),寄生虫病实验室诊断 Laboratory diagnosis of parasitic diseases,病原学诊断 免疫学诊断 分子生物学诊断,1.粪便检查* 2.血液检查* 3.活体组织检查 4.其他排泄物或抽取液的检查 5.动物接种,病原学诊断,病原学诊断 粪便检查,原虫的滋养体 多种蠕虫卵,生理盐水直接涂片法,1.直接涂片法,原虫的包囊,生理盐水直接涂片法 碘液直接涂

6、片法,1.直接涂片法,病原学诊断 粪便检查,直接涂片法简便易行，但若用粪量过少，则存在一定的漏检率。,1.直接涂片法,病原学诊断 粪便检查,重力沉淀法,适合于比重大于水的原虫包囊及各种蠕虫卵。,重力沉淀法,1.直接涂片法 2.浓集法,病原学诊断 粪便检查,1.直接涂片法 2.浓集法,病原学诊断 粪便检查,浮聚法,饱和盐水浮聚法 硫酸锌浮聚法,饱和盐水浮聚法,病原学诊断 粪便检查,1.直接涂片法 2.浓集法,钩虫 粪类圆线虫 毛圆线虫,钩蚴培养法,1.直接涂片法 2.改良加藤氏法 3.浓集法 4.线虫幼虫培养法,病原学诊断 粪便检查,1.直接涂片法 2.改良加藤氏法 3.浓集法 4.线虫幼虫培养

7、法 5.毛蚴孵化法,病原学诊断 粪便检查,棉拭子法 透明胶纸法,1.直接涂片法 2.改良加藤氏法 3.浓集法 4.线虫幼虫培养法 5.毛蚴孵化法 6.肛门拭子法,病原学诊断 粪便检查,病原学诊断 粪便检查,病原学诊断 血液检查,疟原虫 丝虫 利什曼原虫 弓形虫,病原学诊断 血液检查,1.薄血膜法(查疟原虫）,采血,推片,画线,染色,镜检,病原学诊断 血液检查,2.厚血膜法(查疟原虫和微丝蚴）,采血,涂片,溶血,染色,镜检,1.薄血膜法(查疟原虫）,病原学诊断 血液检查,注意事项： 1.玻片的洁净程度对涂制血膜的质量有直接关系，因此要求严格按规程清洗玻片。,2. 采血时间：疟疾现症病人可随时取血

8、，一般以 寒热发作时或发作后数小时取血为好；夜现周 期型淋巴丝虫感染调查则应在212时之间采 血。,病原学诊断 组织活检, 皮肤,皮肤利什曼病 皮肤阿米巴病 猪囊尾蚴病 肺吸虫病 棘腭口线虫病 盘尾丝虫病 疥疮,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓,杜氏利什曼原虫,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓 淋巴结,内脏利什曼病 锥虫病 弓形虫病 丝虫病,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓 淋巴结 肌肉,旋毛虫病 囊虫病 裂头蚴病 肺吸虫病,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓 淋巴结 肌肉 直肠,溶组织内阿米巴 血吸虫卵,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓 淋巴结 肌肉 直肠 肺,卫氏并殖吸虫成虫/虫卵

9、 溶组织内阿米巴 卡氏肺孢子虫,痰液,病原学诊断 其他标本检查,卫氏并殖吸虫 蛔虫幼虫 钩虫幼虫 粪类圆线虫幼虫 卡氏肺孢子虫 溶组织内阿米巴滋养体,痰液 尿液,埃及血吸虫卵 肾膨结线虫卵 阴道毛滴虫 艾氏小杆线虫成虫,病原学诊断 其他标本检查,痰液 尿液 阴道分泌物,阴道毛滴虫 溶组织内阿米巴滋养体,病原学诊断 其他标本检查,痰液 尿液 阴道分泌物 十二指肠抽取液,蓝氏贾第鞭毛虫 华支睾吸虫卵 肝片形吸虫卵 布氏姜片虫卵 溶组织内阿米巴大滋养体,病原学诊断 其他标本检查,痰液 尿液 阴道分泌物 十二指肠抽取液 鞘膜积液,班氏微丝蚴,病原学诊断 其他标本检查,痰液 尿液 阴道分泌物 十二指肠抽

10、取液 鞘膜积液 脑脊液,弓形虫 耐格里属阿米巴 广州圆线虫,病原学诊断 其他标本检查,病原学诊断 动物接种,在怀疑弓形虫感染时，可采取血液、骨髓、淋巴结、脑脊液沉淀的涂片染色镜检，但阳性机会不大，因此常将上述材料接种小白鼠以分离病原体。,1.皮内试验(IDT) 2.间接血凝试验(IHA) 3.免疫荧光法（IF） 4.免疫酶染色试验（IEST） 5.酶联免疫吸附试验（ELISA） 6.胶体金免疫测定技术（CGIA）,免疫学诊断,免疫学诊断,酶联免疫吸附试验（ELISA）,1) 抗原包被 2) 加样（一抗） 3) 洗涤 4) 加酶标抗体（二抗） 5) 洗涤 6) 加底物显色 7) 观察结果,免疫学

11、诊断,胶体金免疫测定技术（CGIA）,Dipstick,+ ,C T,免疫学诊断,存在的问题 1. 不同寄生虫之间的交叉反应， 2. 难以区分现症感染与既往感染。,解决办法 1. 单一组分抗原， 2. 检测短程抗体。,分子生物学诊断,1.核酸分子杂交技术,*,虫体 DNA模板,标记的 DNA 探针,分子生物学诊断,2. PCR技术,分子生物学诊断,2. PCR技术,50l反应体系 10PCR缓冲液 5l P1 0.2mol/L P2 0.2mol/L dNTP 200mol/L Taq酶 2U 样本DNA 0.1g H2O 补足50l,分子生物学诊断,2. PCR技术,94 4 94 1 56

12、 1 72 1 72 8,35 Cycles,分子生物学诊断,2. PCR技术,PCR技术具有高度的敏感性，有严格的操作要求，若操作不当，很容易出现假阳性和假阴性，因此，在试验中应严格遵守操作规程，并同时设立阳性、阴性和空白对照。,湖 南 63794 76.705 4652.9,湖 南 63794 76.705 4652.9,感染虫种数 感染人数 平均感染率（%） 构成比（%） 1 499871 33.8267 56.6709 2 256684 17.3700 29.1005 3 96225 7.3009 10.9091 4 24109 1.6315 2.7332 5 4372 0.2959

13、0.4957 6 686 0.0464 0.0778 7 95 0.0064 0.0108 8 16 0.0011 0.0018 9 2 0.0001 0.0002,单一与多虫感染的感染率及构成比,（二）寄生虫病的流行特点,1、地方性：,a. 中间宿主与媒介昆虫的分布,（二）寄生虫病的流行特点,1、地方性：,a. 中间宿主与媒介昆虫的分布,b. 生活习惯和生产方式 ( 血吸虫的感染方式),（二）寄生虫病的流行特点,1、地方性：,a. 中间宿主与媒介昆虫的分布,b. 生活习惯和生产方式 ( 血吸虫的感染方式),c. 气候,2、季节性：,a. 媒介昆虫的季节性所致,b. 人类生产、生活活动形成感染

14、季节性,（二）寄生虫病的流行特点,2、季节性：,a. 媒介昆虫的季节性所致,b. 人类生产、生活活动形成感染季节性,c. 寄生虫在外界发育及活动的季节性,（二）寄生虫病的流行特点,3、自然疫源性,a. 基本概念： 有些人体寄生虫无明显宿主特异性， 可寄生于多种动物，这些寄生虫可在 无人参与的情况下在动物之间相互传 播。这种性状称自然疫源性。,b. 人兽共患寄生虫病(parasitic zoonoses): 在脊椎动物与人之间自 然传播的寄生虫病。,c. 意义：(a) 反映寄生虫在自然界的演化过程； (b) 反映寄生虫病在流行病学和防治中 的复杂性；,（二）寄生虫病的流行特点,（三）流行三环节,1、传 染 源 体内有寄生虫生存、繁殖，并能将 寄生虫排出体外的人和动物。,2、传播途径 寄生虫由传染源排出以后，经过一 定的方式再侵入其他易感者所经过 的途径。,经口感染,蛔虫、蛲虫、溶组织内阿米巴、肺吸虫、 肝吸虫、带绦虫等,感染方式小结,经 口 感 染,自 体 外 感 染,自 体 内 感 染,输 血 感 染,经 胎 盘 感 染,直 接 接 触 传 播,由 节肢 动物 传 播,经皮肤、粘膜感染,蛔虫、蛲虫、溶组织内阿米巴、肺吸虫、肝吸虫、带绦虫等,钩虫、血吸虫、丝虫等,丝虫、疟原虫、利氏曼原虫,阴道毛滴虫、疥螨,弓形虫,