《一氧化氮在海水和淡水淹溺型急性肺损伤中的表达研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一氧化氮在海水和淡水淹溺型急性肺损伤中的表达研究（50页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第二军医大学 硕士学位论文 一氧化氮在海水和淡水淹溺型急性肺损伤中的表达研究 姓名：王宇 申请学位级别：硕士 专业：呼吸内科学 指导教师：段蕴铀 20100520 第二军医大学临床型硕士学位论文 摘要 世界卫生组织统计每年发生淹溺死亡事件的约有4 0 万人，是人类意外死亡的重要原因 之一。发生淹溺最常见的液性递质是淡水和海水。淡水淹溺主要常见于浴缸、游泳、水道 及江河等。而在航海作业事故中，因溺水而死亡的约占5 2 - 6 5 ，居各种原因的首位。淹溺 除1 0 - 1 5 弓I 起窒息死亡外，大部分主要为淹溺造成的急性肺损伤。 急性肺损伤时常有大量的N O 自由基的生成，后者可与0 2 -
2、反应生成毒性更强的过氧化亚 硝酸盐( O N O o - ) 。O N 0 0 一除可引发脂质过氧化外，还可抑制N a + - K + 一A T P 酶，线粒体酶等多种酶 活性，引起蛋白硝化，造成D N A 链断裂等，从而造成肺组织的广泛损伤。因此，血清中N O 的浓度可以间接反应淹溺性肺组织的损伤程度。阻断大量N O 自由基的释放对治疗淹溺性月市 损伤有积极的作用。 本课题组在“九五和“十五”期间对海水及淡水淹溺进行了大量研究，成功复制了 海水及淡水淹溺型急性肺损伤模型。本实验采用淡水和海水复制急性肺损伤模型，观察血 清N O 浓度的变化，并对两者的损伤程度进行比较。观察地塞米松对淹溺型急性
3、肺损伤的影 响，并观察不同剂量地塞米松的干预效果。 第一部分N o 在海水与淡水淹溺型肺损伤中的表达研究 目的比较等量淡水和海水灌注对兔肺损伤程度的影响并观察N 0 的变化 方法：健康成年新西兰兔2 1 只随机数字化分为3 组( n = 7 ) ：即对照组、海水灌注组( 经 气管插管灌注配方海水2 m l k g ，约5 m i n 灌注完) 和淡水灌注组( 同淡水灌注组方法灌注淡 水1 2 m l k g ) 。分别于灌注后O h 、0 5 h 、l h 、2 h 、3 h 、6 h 取兔颈总动脉血作血气分析观察 P H 、P a O 。、P a C O ：和血清N O 的变化。于实验终点处
4、死动物，测定肺组织湿干重比( W D ) 、 肺微血管通透指数、肺组织中丙二醛( M D A ) 含量、一氧化氮合酶( N o S ) 、超氧化物歧化酶 ( S O D ) 活性的变化。光镜下观察肺组织病理变化情况。 结果三组P H 指标差异无统计学意义。灌注淡水或海水后动物出现低氧血症及低碳酸 血症，血清N O 水平增高( P 0 0 1 ) ；肺组织湿干重比( P 0 0 1 ) 、肺微血管通透指数( P O 0 1 ) 、 肺组织中N O S 及M D A 含量增高( P 0 0 1 ) ；S O D 活性降低( P O 0 5 ) 。淡水淹溺组病理学改变 与海水淹溺组比较相似，但损伤程
5、度较轻。 N O 在海水和淡水淹溺型急性肺损伤中的表达研究 结论海水淹溺较淡水淹溺所引起的血清N 0 升高更为明显，肺微血管通透 性、低氧血症反应更加严重。 第二部分地塞米松对淡水淹溺型兔肺损伤血清N O 的影响 目的观察淡水淹溺型兔肺损伤中N O 的变化及地塞米松的干预作用。了解地塞米松对 淡水淹溺型兔肺损伤的影响。 方法采用经兔气管内灌注淡水制备淡水淹溺型肺损伤模型。将2 1 只健康雄性新西兰 大白兔随机分为3 组：空白对照组、淡水淹溺组( 经气管插管灌注淡水1 2 m l k g ，约5 m i n 灌 注完) 、地塞米松干预( 5 m g k g ) 组。分别于灌注后O h 、1 h
6、、2 h 、3 h 、6 h 经兔颈总动脉抽 血作血气分析观察P a O 。、P a C O ：和血清N 0 的变化。并于实验终点处死动物，测定肺湿干重 比( W D ) 、肺微血管通透指数、肺组织中丙二醛( M D A ) 含量、一氧化氮合酶( N O S ) 、超氧 化物歧化酶( S O D ) 活性的变化。光镜下观察肺组织病理学变化情况。 结果淡水灌注后动物出现低氧血症和低碳酸血症，血清N 0 水平明显增高( P 0 0 1 ) 。 肺组织湿干重比增高( P 0 0 1 ) 、肺微血管通透指数增高( P 0 0 1 ) ，肺组织中N O S 、M D A 含量增高( P O 0 1 )
7、、S O D 活性降低( P O 0 5 ) H y p o x e m i a a n dh y p e r c a p n i ao c c u r sa f t e ri n f u s i o no ff r e s h w a t e ro r s e a w a t e r ，a n dt h en i t r i co x i d el e v e l si ns e r u mw a si n c r e a s e d ：T h ev a l u eo fW D ， P e r m e a t i o ni n d e xo fp u l m o n a r yc a p i
8、 l l a r y ，M D Aa n d N O Sa c t i v i t yw a se n h a n c e d ： f r e s h w a t e ro rs e a w a t e rd r o w n i n gc a ns i g n i f i c a n t l yp r o m o t ed e c l i n eS O Da c t i v i t y P a t h o l o g ic a lc h a n g e sw e r ef o u n dt ob em o r es e r i o u si ns e a w a t e rd r o w n
9、i n gt h a ni n f r e s h w a t e rd r o w n i n gg r o u p C o n c l u s i o n T h ep u l m o n a r yi n j u r i e si n d u c e db ys e a w a t e rd r o w n i n g ，s u c ha sn i t r i c o x i d el e v e l si ns e r u m ，P M P I ，h y p o x e m i a ，a r em o r es e r i o u sc o m p a r e dt ot h a ti
10、 n d u c e d b yf r e s h w a t e rd r o w n i n g P a r tI IT h ei n t e r v e n ti o no fd e x a m e t h a s o n eo nn it ri cO X i d eo f a c u t e1 gi n 。u r yr a b b t i n d u c e dbf r e s h w a t e rd rowninlung1 n J u r yr a 1t S O y r e s h w a t e r n g O b j e c ti v eT oo b s e r v et h
11、ec h a n g e so fn i t r i co x i d eo nr a b b i t sw i t ha c u t el u n g i n j u r yi n d u c e db yf r e s h w a t e rd r o w n i n ga n de x p l o r et h ei n t e r v e n t i o no fd e x a m e t h a s o n e 5 N O 在海水和淡水淹溺型急性肺损伤中的表达研究 E x p l o r et h ee f f e c t so fd e x a m e t h a s o n eo
12、 na c u t el u n gi n j u r yi n d u c e db yf r e s h w a t e r d r o w n i n g M e t h o d sT h ea c u t el u n gi n j u r ym o d e lw a se s t a b l i s h e db yr a b b i t sw i t hf r e s h w a t e r i n s t i l l e d 2 1h e a l t h yN e wZ e a l a n dr a b b i t sw e r er a n d o m l yd i v i d
13、 e di n t ot h r e eg r o u p s ( n = 7 ，e a c h ) ：c o n t r o lg r o u p ，f r e s h w a t e r d r o w n i n gg r o u p ( i n f u s e dw i t hf r e s h w a t e r ， 1 2 m l k g ) ，a n dd e x a m e t h a s o n eg r o u p ( 5 m g k g ) A l lt h ei n d e x e sw e r eo b s e r v e da tt h e t i m ep o i
14、 n to f0 h 、1 h 、2 h 、3 h 、6 ha f t e ro p e r a t i o n P a 0 2a n dP a C 0 2 c h a n g ew e r ed e t e r m i n e d b yb l o o dg a sa n a l y s i sa n dt h el e v e lo fn i t r i co x i d ei ns e r u mw a sd e t e r m i n e db yo t h e r m e t h o d T h ev a l u eo fW D ，P e r m e a t i o ni n d e
15、 xo fp u l m o n a r yc a p i l l a r y ，m a l o n d i a l d e h y d e ( M D A ) l e v e l sc h a n g eo ft h ea c t i v i t i e so fn i t r i co x i d es y n t h a s e ( N O S ) a n ds u p e r o x i d e d is m u t a s e ( S O D ) i nl u n gtis s u e sw e r ed e t e r m i n e d A tt h ee n do ft h e
16、o p e r a ti o n ，T h e l u n gt i s s u e sw e r ed e t e r m i n e db yl i g h tm i c r o s c o p ye x a m i n a t i o n R e s u lt s H y p o x e m i aa n dh y p e r c a p n i ao c c u r sa f t e ri n f u s i o n o f f r e s h w a t e ro r s e a w a t e r ，a n dt h en i t r i co x i d el e v e l si ns e r u mw a si n c r e a s e d T h ev a l u eo fW D ， P e r m e a t i o ni n d e xo fp u l m o n a r yc a p i l l a r y ，M D Aa n dN O Sa c t
