饮料中霉菌和酵母菌的测定

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1、饮料中霉菌和酵母菌的测定一、目的要求1、学习测定饮料中霉菌和酵母菌检测程序、方法。2、掌握霉菌、酵母菌检测结果的报告方式。二、实验原理霉菌和酵母菌菌数的测定是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1mL检样中所含的霉菌和酵母菌菌落数（粮食样品是指1g粮食表面的霉菌总数）。三、实验器材马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基，无菌水。三角瓶，试管，平皿，吸量管（1mL，10mL），酒精灯。四、检验程序霉菌和酵母计数的检验程序：检样25g（mL样品）+225mL无菌蒸馏水，均质10倍系列稀释选择2个3个适宜稀释度的样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养皿内每皿中加入15mL20mL马铃薯-葡萄糖-琼脂

2、培养基培养（281，5d）菌落计数报告五、操作步骤1、样品稀释（1）以无菌吸管吸取25mL样品至盛有225 mL 无菌蒸馏水的锥形瓶（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。（2）取1 mL 1:10 稀释液注入含有9 mL 无菌水的试管中, 另换一支1 mL 无菌吸管反复吹吸,此液为1:100 稀释液。（3）按（2）操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管。（4）根据对样品污染状况的估计，选择2 个3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10 倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1 mL 样品匀液于

3、2 个无菌平皿内。同时分别取1 mL样品稀释液加入2 个无菌平皿作空白对照。（5）及时将15 mL20 mL 冷却至46 的马铃薯-葡萄糖-琼脂（可放置于461恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。2、培养待琼脂凝固后，将平板倒置，281培养5d，观察并记录。3、菌落计数肉眼观察，必要时可用放大镜，记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母数。以菌落形成单位（colony forming units，CFU）表示。选取菌落数在10 CFU150 CFU 的平板，根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记录为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均数。4、报告（1）菌落数在100 以内时，按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字报告。（2）菌落数大于或等于100 时，前3 位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2 位数字，后面用0 代替位数来表示结果；也可用10 的指数形式来表示，此时也按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字。（3）称重取样以CFU/g 为单位报告，体积取样以CFU/mL 为单位报告，报告或分别报告霉菌和/或酵母数。六、实验结果霉菌测定结果：稀释度平板12平均12平均 12平均霉菌菌落数根据试验结果，报告检测结果：每1mL饮料中的霉菌数是_。酵母菌测定结果： 稀释度平板12平均12平均 12平均酵母菌落数每1mL饮料中酵母菌数是_。3