高中生物必背实验:dna的粗提取与鉴定

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1、错 题 集 1、原核细胞内只有核糖体这种细胞器,但不是意味着原核细胞内的蛋白质都以肽链的形式存在,如RNA聚合酶等。细菌只是不能产生糖蛋白,原因是没有内质网、高尔基体等内膜系统,但在细胞质中仍然能形成一定的空间构象的蛋白质。 基因工程生产胰岛素(人工组合两条链)、干扰素(与天然有同效)。 2、如何筛选出含某基因的细菌(如何检测细菌是否含有某基因、如何鉴定细菌合成的干扰素功效)。 不要一直用目的基因这词。,3、生态系统的结构、成分。 水稻的在疏密分布 与 群落的空间结构关系? 4、系统中、物质可循环而能量呢? 5、肾上腺素和胰高血糖素(肝脏),肾上腺素和甲状腺激素(脂肪细胞氧化分解),即同一激素

2、因靶不同而功能不同。,肾上腺素主要是强心升压、抑制内脏平滑肌活动和升高血糖。 1对心血管的作用:主要作用于心脏的1受体,使心缩力加强、心率加快、心输出量增加,作用于受体使皮肤、粘膜及肾脏等小动脉收缩,作用于2受体,使冠状动脉、骨骼肌及肝脏的小动脉舒张,结果总外周阻力略减小;血压升高,临床用为强心剂。 2抑制内脏平滑肌活动:使呼吸道、消化道、膀胱及妊娠子宫等平滑肌舒张。 3对代谢的作用:促进肝糖原分解,使血糖升高;促进脂肪组织的脂肪分解,血中游离脂肪酸增多,还抑制胰岛素分泌,对血糖升高起支持作用。这些作用有利于机体获得能量。 乙酰胆碱受体包括两种:M受体使心脏活动抑制 ;N2受体位于骨骼肌终板膜

3、,导致骨骼肌兴奋。 同一信号被不同受体识别可产生不同效应。,6、成熟红细胞对钾离子、葡萄糖吸收;小肠细胞对钾离子、葡萄糖吸收;植物根成熟区细胞不能吸收大分子有机物。 7、光反应与暗反应的关系? 有氧呼吸的三步骤反应式?,DNA的粗提取与鉴定,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,1、DNA的溶解性,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,1、DNA的溶解性,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,1、DNA的溶解性,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,1、DNA的溶解性,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,1、DNA的溶解性,一、基础知识,(一)提取DNA

4、的方法,1、DNA的溶解性,DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,2、DNA在酒精溶液中的溶解性,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,2、DNA在酒精溶液中的溶解性,DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,2、DNA在酒精溶液中的溶解性,DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离,3、DNA对酶、

5、高温和洗涤剂的耐受性,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,2、DNA在酒精溶液中的溶解性,DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离,3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,2、DNA在酒精溶液中的溶解性,DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离,3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响,大多数蛋白质不能忍受6080C的高温,而DNA在80C以上才会变性,一

6、、基础知识,(一)提取DNA的方法,2、DNA在酒精溶液中的溶解性,DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离,3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响,大多数蛋白质不能忍受6080C的高温,而DNA在80C以上才会变性,洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜,去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,4、DNA的鉴定,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,4、DNA的鉴定,DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂,一、基础知识,(一)提取DN

7、A的方法,4、DNA的鉴定,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,4、DNA的鉴定,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(一)实验材料的选取,DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,4、DNA的鉴定,凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但选用DNA 含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(一)实验材料的选取,DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的

8、试剂,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,4、DNA的鉴定,凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但选用DNA 含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(一)实验材料的选取,制备鸡血细胞液:(老师完成),DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,4、DNA的鉴定,凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但选用DNA 含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(一)实验材料的选取,制备鸡血细胞液:(老师完成),在鸡血中加入质量浓度为01g/mL的柠檬酸钠溶液

9、,离心处理,DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,1、动物细胞,动物细胞的破碎较易,例如,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,1、动物细胞,动物细胞的破碎较易,例如,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,1

10、、动物细胞,思考:为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,2、植物细胞,植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,2、植物细胞,植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,2、植物细胞,如:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液,植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,2、植物

11、细胞,思考:加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?,如:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液,植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,2、植物细胞,洗涤剂能溶解细胞膜,有利于DNA的释放; 食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解,思考:加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?,如:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液,植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA

12、的滤液,2、植物细胞,洗涤剂能溶解细胞膜,有利于DNA的释放; 食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解,思考:加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?,如:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液,思考:如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?,植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,2、植物细胞,洗涤剂能溶解细胞膜,有利于DNA的释放; 食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解,思考:加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?,如:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加入一定

13、的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液,思考:如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?,研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少,影响实验结果,(三)去除滤液中的杂质,方案一:,(三)去除滤液中的杂质,方案一:,1溶解细胞核内的DNA:,加入2mol/L的氯化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态,过滤,(三)去除滤液中的杂质,方案一:,1溶解细胞核内的DNA:,加入2mol/L的氯化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态,过滤,(三)去除滤液中的杂质,方案一:,1溶解细胞核内的DNA:,2析出含DNA黏稠物:,加入2mol/L的氯化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态

14、,过滤,(三)去除滤液中的杂质,方案一:,1溶解细胞核内的DNA:,加入蒸馏水,用玻璃棒搅拌,过滤,2析出含DNA黏稠物:,加入2mol/L的氯化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态,过滤,(三)去除滤液中的杂质,方案一:,1溶解细胞核内的DNA:,加入蒸馏水,用玻璃棒搅拌,过滤,2析出含DNA黏稠物:,3将DNA的黏稠物再溶解:,加入2mol/L的氯化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态,过滤,(三)去除滤液中的杂质,方案一:,1溶解细胞核内的DNA:,加入蒸馏水,用玻璃棒搅拌,过滤,2析出含DNA黏稠物:,3将DNA的黏稠物再溶解:,加入2mol/L的氯化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态,(三)去

15、除滤液中的杂质,方案二:,(三)去除滤液中的杂质,方案二:,直接在滤液中加入嫩肉粉,反应1015min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。,(三)去除滤液中的杂质,方案二:,直接在滤液中加入嫩肉粉,反应1015min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。,方案三:,(三)去除滤液中的杂质,方案二:,直接在滤液中加入嫩肉粉,反应1015min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。,方案三:,将滤液放在6075的恒温水浴箱中保1015min,注意严格控制温度范围。,(三)去除滤液中的杂质,方案二:,直接在滤液中加入嫩肉粉,反应1015min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。,方案三:,将滤液放在6075的恒温水浴箱中保1015min,注意严格控制温度范围。,讨论:方案二与方案三的原理有什么不同?,(三)去除滤液中的杂质,方案二:,直接在滤液中加入嫩肉粉,反应1015min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。,方案三:,将滤液放在6075的恒温水浴箱中保1015min,注意严格控制温度范围。,方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开; 方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离,讨论:方案二

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