《自动捎膪与化分析仪操作方法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《自动捎膪与化分析仪操作方法（7页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、四 血液临床酶学诊断1 血清酶的总活性测定酶是由组织细胞合成的具有特殊催化功能的蛋白质，是对化学反应具有强化的催化性，对作用物由严格选择性的生物催化剂。酶的活性是对酶的催化能力大小的度量。酶活性的测定就是酶催化某一化学反应的反应速度。由于酶是蛋白质，其催化的反应速度受温度，PH，离子强度，底物浓度等多种因素的影响，故酶的活性都是用在特定条件下，单位时间内，酶促反应中低物的消耗量或产物的生成量来进行测定。酶活性的测定采用手工或自动生化分析仪的两种方法进行测定。自动生化分析仪分为半自动分析仪和全自动分析仪两种。半自动分析仪由手工完成样品及反应混合体递送，部分操作由仪器自动完成。全自动生化分析仪则是
2、从加样到出结果的全过程完全由仪器自动完成。按仪器复杂的程度及功能分类分为小型，中型，大型自动分析仪。小型一般分为单通道，中型为多通道，常同时可测 210 各项目，大型多通道的仪器可同时测 10 个以上项目，分析项目可自由选择。MD100 型半自动分析仪简介：本仪器是由美国 Sysmtey 生化仪器公司生产。该仪器采用单一通道，可连程测试 20 个以上的项目。该仪器主要分为计算机控制系统，吸样泵，光学系统比色池三个部分。MD-100 型半自动分析仪操作：1接通电源，约 30 分钟。2用专用清洗液或自配 3%84 消毒液清洗仪器。如仪器久未使用需打开仪器侧小门，取下吸样泵小管，用注射器来回推入清洗
3、液，清洗吸样通道。3进入所测项目的界面，点击轻轨鼠标右键编辑项目参数。4点击轻轨鼠标左键进入运行项目。 5按仪器提示的方法进行下一步操作，依次吸取空白试剂、标准试剂、样本试剂测试。 6本项目测试完毕，需用专用清洗液或自配 3%84 消毒液清洗。7退出项目测试，在根目录下关闭电源。乳酸脱氢酶（LDH-L）测定a 原理L-乳酸+NAD 正离子丙酮酸+NADH+氢离子b 试剂原装诊断试剂盒c 方法取一定量的 R2（Tris 缓冲液 PH8.9，100mmol/L;KCl 100mmol/L;L-乳酸锂 52mmol/L）加入R1（NAD 6.5mmol/L）轻轻摇动，并倒置几次，完全溶解后，即为工作
4、液。空白管 样品管工作液 1.00ml 1.00ml蒸馏水 0.02ml -样品 - 0.02ml混合均匀，在 37保温 30 秒钟，读取初始吸光度（波长 340nm） ，同时开始计时，在精确的1，2，3 分钟时，分别读取吸光度，确定每分钟平均吸光度的变化（A/分）d 上机操作程序1按试剂盒说明书编辑参数：点右键进入编辑参数界面。移动鼠标至温度设置处，设定温度为 37 度；再次移动鼠标至试剂吸入量处，设定试剂吸入量为 1.00ml;移动鼠标至样品吸入量处，设定样品吸入量为 0.02ml;移动鼠标至保存处，按键点击保存。移动鼠标至读数时间处，设定读数时间为 1min，延迟时间 30 秒。2点击轻
5、轨鼠标左键，进入运行界面，按仪器提示，先行清洗吸入空白试剂，仪器自动测试空白管，再按提示吸入测定试剂，仪器自动测试样品管。3仪器自动计算结果，人工记录或仪器自动输出结果。4本项目测试完毕，点击退出键，仪器提示清洗，清洗完毕，仪器自动退出界面。e 计算LDH（U/L）=（A 样品/分A 空白/分）FF=V1（V2消光系数）1000=8095V1=反应总体积 V2=样品体积NADH 在 340nm 的毫克分子消光系数=6.3f 注意事项1当A/分超过 0.19 时，用 0.3ml 生理盐水稀释 0.1ml 样品，在重新测定，结果乘以 4。2复溶后溶液变混浊，或初始吸光度大于 0.5,则不能使用。g
6、 临床意义乳酸脱氢酶总活性升高见于急性心肌梗死、充血性心力衰竭、肺梗死、肝炎、贫血、肌营养不良、肾病综合症。天门冬氨酸氨基转移酶（AST/GOT）测定a 原理L-天冬氨酸+-酮戊二酸草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+氢离子L-苹果酸+NAD 正离子+水b 试剂原装诊断试剂盒c 方法波长：340nm温度：37比色杯光径：1cm取一定量 R2（Tris 缓冲液 PH7.8,80mmol/L;L-天门冬氨酸 240mmol/L）复溶 R1（-酮戊二酸12mmol/L;NADH0.18mmol/L;苹果酸脱氢酶1000U/L；LDH5000U/L）空白管 样品管工作液 1.00ml 1.00ml
7、蒸馏水 0.10ml -样品 - 0.10ml混合均匀，在反应温度保温 1 分钟，读取初始吸光度，同时开始计时，在精确的 1，2，3 分钟时，分别读取吸光度，确定每分钟平均吸光度的变化（A/分） 。d 上机操作程序1按试剂盒说明书编辑参数：点右键进入编辑参数界面。移动鼠标至温度设置处，设定温度为 37 度；再次移动鼠标至试剂吸入量处，设定试剂吸入量为 1.00ml;移动鼠标至样品吸入量处，设定样品吸入量为 0.1ml;移动鼠标至保存处，按键点击保存。移动鼠标至读数时间处，设定读数时间为 30 秒，延迟时间 30 秒。2点击轻轨鼠标左键，进入运行界面，按仪器提示，先行清洗吸入空白试剂，仪器自动测
8、试空白管，再按提示吸入测定试剂，仪器自动测试样品管。3仪器自动计算结果，人工记录或仪器自动输出结果。4本项目测试完毕，点击退出键，仪器提示清洗，清洗完毕，仪器自动退出界面。e 计算AST（U/L）=（A 样品/分A 空白/分）FF=V1（V2消光系数）1000=1746V1=反应总体积 V2=样品体积NADH 在 340nm 的毫克分子消光系数=6.3f 注意事项1测定时间 1 分钟，A/分大于 0.400；测定时间 3 分钟，A/分大于 0.200 时，样品用生理盐水稀释后重新测定，结果乘稀释倍数。2若试剂空白吸光度小于 1.000，勿用。3仅用于体外诊断，内含迭氮钠，避免直接接触皮肤和眼睛
9、，切勿吞咽。4应在 28条件下贮存，避免在 28以上及 0下存放。g 临床意义GOT 酶总活性升高，见于急性肝中毒、钩端螺旋体、流行性出血热、副伤寒、上呼吸道感染、急性心肌炎、慢性肾盂肾炎。葡萄糖（Glu）测定a 原理Glu+氧气+水葡萄糖酸+双氧水双氧水+4-氨基安替吡啉+酚醌亚胺+水b 试剂原装诊断试剂盒c 方法波长：505nm温度：37比色杯光径：1cm将 10 mlR1（葡萄糖氧化酶13000U/L；过氧化物酶900U/L）与 90mlR2 混合均匀，为工作液。空白管 标准管 样品管工作液 1.50ml 1.50ml 1.50ml蒸馏水 0.01ml - -标准 - 0.01ml -样
10、品 - - 0.01ml分别混匀，37保温 10-15 分钟，用半自动生化分析仪检测，读取 A 标准和 A 样品操机d 上机操作程序1按试剂盒说明书编辑参数：点右键进入编辑参数界面。移动鼠标至温度设置处，设定温度为 37 度；再次移动鼠标至试剂吸入量处，设定试剂吸入量为 1.50ml;移动鼠标至样品吸入量处，设定样品吸入量为 0.01ml;移动鼠标至保存处，按键点击保存。移动鼠标至读数时间处，设定读数时间为 2 秒，延迟时间 2 秒。2点击轻轨鼠标左键，进入运行界面，按仪器提示，先行清洗吸入空白试剂，仪器自动测试空白管，再按提示吸入标准试剂，仪器自动测试标准管，接下来按提示吸入测试试剂， 仪器
11、自动测试样品管。接下来按提示吸入测试试剂， 仪器自动测试样品3仪器自动计算结果，人工记录或仪器自动输出结果。4本项目测试完毕，点击退出键，仪器提示清洗，清洗完毕，仪器自动退出界面。e 计算葡萄糖浓度=A 样品A 标准标准浓度葡萄糖标准液 5.55mmol/L(100mg/dl)f 注意事项1样品葡萄糖浓度超过 22.2mmol/L(400mg/dl)时，样品量可减半，改为 5ul，标准量不变，重新测定，结果乘以 2。2仅用于体外诊断，内含迭氮钠，避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。3应在 28条件下贮存，避免在 28以上及 0下存放。g 临床意义 1血糖升高见于糖尿病、应激、暂时性高血糖症、内分
12、泌紊乱、慢性肝脏疾病、马疝痛。2血糖降低见于仔猪低血糖、牛酮血症、肾上腺皮质功能减退、甲状腺功能降低、进行性肝病、严重肾性糖尿病。总蛋白（TP）测定a 原理在碱性条件下，蛋白质多肽链中的肽键与铜离子络合形成紫红色化合物。b 试剂原装诊断试剂盒c 方法波长：546nm温度：25比色杯光径：1cm空白管 标准管 样品管试剂 1.00ml 1.00ml 1.00ml生理盐水 12.5ul - -标准 - 12.5ul -样品 - - 12.5ul混匀，保温 10 分钟，用半自动生化分析仪检测，读取 A 标准和 A 样品。 d 上机操作程序1按试剂盒说明书编辑参数：点右键进入编辑参数界面。移动鼠标至温
13、度设置处，设定温度为 37 度；再次移动鼠标至试剂吸入量处，设定试剂吸入量为 1.00ml;移动鼠标至样品吸入量处，设定样品吸入量为 12.5l 移动鼠标至保存处，按键点击保存。移动鼠标至读数时间处，设定读数时间为 2 秒，延迟时间 2 秒。2点击轻轨鼠标左键，进入运行界面，按仪器提示，先行清洗吸入空白试剂，仪器自动测试空白管，再按提示吸入标准试剂，仪器自动测试标准管，接下来按提示吸入测试试剂， 仪器自动测试样品管。接下来按提示吸入测试试剂， 仪器自动测试样品3仪器自动计算结果，人工记录或仪器自动输出结果。4本项目测试完毕，点击退出键，仪器提示清洗，清洗完毕，仪器自动退出e 计算总蛋白浓度=
14、A 样品A 标准标准浓度（g/L）f 注意事项1样品蛋白浓度超过 100g/L，可用生理盐水稀释样品，再重新测定，结果乘以稀释倍数。2温度高于 25，测定值偏高。白蛋白（A）测定a 原理在 PH4.2 环境中，溴甲酚绿在有非离子去垢剂聚氧乙烯月桂醚存在时，可与蛋白形成蓝绿色复合物。b 试剂原装诊断试剂盒c 方法波长：630nm温度：37比色杯光径：1cm空白管 标准管 样品管试剂 1.50ml 1.50ml 1.50ml生理盐水 5ul - -标准 - 5ul -样品 - - 5ul混合均匀，保温 5 分钟后，用半自动生化分析仪检测，读取 A 标准和 A 样品。d 上机操作程序1按试剂盒说明书
15、编辑参数：点右键进入编辑参数界面。移动鼠标至温度设置处，设定温度为 37 度；再次移动鼠标至试剂吸入量处，设定试剂吸入量为 1.50ml;移动鼠标至样品吸入量处，设定样品吸入量为 5.00l;移动鼠标至保存处，按键点击保存。移动鼠标至读数时间处，设定读数时间为 2 秒，延迟时间 2 秒。2点击轻轨鼠标左键，进入运行界面，按仪器提示，先行清洗吸入空白试剂，仪器自动测试空白管，按提示吸入测试试剂，仪器自动测试样品管。3仪器自动计算结果，人工记录或仪器自动输出结果。4本项目测试完毕，点击退出键，仪器提示清洗，清洗完毕，仪器自动退出界面。e 计算白蛋白浓度= A 样品A 标准标准浓度（g/L）f 注意事项1样品白蛋白浓度超过 60g/L 可用生理盐水稀释样品，再重新测定，结果乘以稀释倍数。2仅用于体外诊断，内含迭氮钠，避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。3应在 28条件下贮存，避免在 28以上及 0下存放。g 临床意义 1血清总蛋白，白蛋白及球蛋白/球蛋白比值减低者见于肝功能损害如脂肪肝、肝硬化、肾炎、恶性贫血、恶病质。2
