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1、上海交通大学 硕士学位论文 纳米复方中药制剂用于根管消毒的基础研究 姓名：李婷婷 申请学位级别：硕士 专业：口腔临床医学 指导教师：夏文薇 20080501 上海交通大学硕士学位论文 I 纳米复方中药制剂用于根管消毒的基础研究 摘 要 目的目的：将冰片、雄黄、珍珠粉三者配伍制成纳米复方中药制剂，观 察其对感染根管内常见细菌的体外抑制作用，探讨纳米复方中药制剂用 于根管内封药的可行性。 方法方法：冰片、雄黄、珍珠粉按 3：1：1 的重量比，分别制备成粒径 为 1.35m 和 782nm，浓度为 166.67mg/ml 和 250mg/ml 的两组纳米复方 中药制剂作为实验组，选择黏性放线菌（Ac
2、tinomyces viscosus, Av） ATCC 19246、变形链球菌（Streptococcus mutans, Sm）UA 159、金黄 色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, Sa)ATCC 25923、牙龈卟啉单胞菌 （Porphyromonas gingivalis, Pg ） ATCC 33277 、 具 核 梭 杆 菌 (Fusobacterium nucleatum, Fn)ATCC 25286 等 5 种标准菌株作为实验 菌株；采用纸片扩散法及液体二倍稀释法，分别测定不同粒径纳米中药 制 剂 对 上 述 标 准 菌 株 的 抑 菌 作 用 以 及
3、最 小 抑 菌 浓 度 (minimal inhibitory concentration，MIC)和杀菌浓度(minimal bactericidal concentration，MBC)；纸片法中以 500mg/ml 的氢氧化钙作为阳性对照 组，液体二倍稀释法中以 250mg/ml 氢氧化钙作为阳性对照组；结果采用 SAS6.12 软件包进行统计。 结果结果： （1）通过纸片扩散法测得两组中药制剂对 Av、Sm 和 Fn 有明 显抑制作用，其中同一粒径的中药制剂对于不同种属细菌生长的抑制作 用有显著性差异（P=0.00060.01） ；该两组中药制剂对 Sa 和 Pg 未产生有效的抑制作用
4、； 氢氧化钙组对上述实验菌株均未产生明显 的抑制作用 。 （2）通过液体二倍稀释法测得两组复方中药制剂对上述 5 种实验菌株的 MIC 和 MBC 值，而氢氧化钙组仅测得对 Pg 和 Fn 的 MIC 和 MBC 值。 结论结论：由冰片、雄黄、珍珠粉组成的纳米复方中药制剂与氢氧化钙 相比，具有较好的抗菌作用，用于根管内封药具有一定的应用前景。 关键词：根管消毒，雄黄，珍珠粉，冰片，纳米中药 上海交通大学硕士学位论文 III BASIC STUDY OF THE APPLICATION OF NANOMETRIC TRADITIONAL CHINESE HERBAL DRUGS IN ROOT
5、CANAL DISINFECTION ABSTRACT OBJECT：This study evaluated the feasibility of the application of nanometric traditional Chinese herbal drugs composed of borneol, realgar and pearl powder in root canal disinfection by observing the bacteriostasis of them to the primary bacteria from the infected root ca
6、nals in vitro. METHODS： Nanometric traditional Chinese herbal drugs were made into two kinds of grain size, one of which was 1.35m whose concentration was 166.67mg/ml and the other was 782 nm whose concentration was 250mg/ml. The proportion by weight of borneol, realgar and pearl powder was 3:1:1. F
7、ive kinds of standard strains were picked up as test germs. They are Actinomyces viscosus（Av） ATCC 19246, Streptococcus mutans（Sm） UA 159, Staphylococcus aureus（Sa） ATCC 25923, Porphyromonas gingivalis（Pg） ATCC 33277 and Fusobacterium nucleatum（Fn） ATCC 25286. Then，observing the bacteriostasic activ
8、ity as well as mensurating minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) of nanometric traditional Chinese herbal drugs to these 5 standard strains by the methods of Kirby-Bauer（K-B） and broth dilution technique. With the method of K-B，the control group was 500m
9、g/ml 上海交通大学硕士学位论文 IV Ca(OH)2. With the broth dilution technique, the control group was 250mg/ml Ca(OH)2. SAS6.12 was used in the data statisticses. RESULTS：(1) With the method of K-B，there was a significant bacteriostasis of nanometric traditional Chinese herbal drugs to Av， Sm and FnStatistically s
10、ignificant difference was existed between different kinds of bacteria in either group 1.35m or group 782nm（P=0.00060.01） In group Ca(OH)2，it was not effective in inhibiting the growth of all of those strains(2) In group 1.35m and group 782nm ,the values of MIC and MBC to every strains by using a bro
11、th dilution technique were observed in vitro,while in the control group, only the values of MIC and MBC to Pg and Fn were obtained in this experiment CONCLUSIONS：Results of this research showed that nanometric traditional Chinese herbal drugs composed of borneol, realgar and pearl powder，compared wi
12、th Ca(OH)2，had a more preferable bactericidal effect and it may be used for the medication of root canal KEY WORDS: root canal disinfection，realgar，pearl powder，borneol， nanometric traditional Chinese herbal drugs 上海交通大学硕士学位论文 VII 缩略语表 缩略语 英文全称 中文全称 Av Actinomyces viscosus 黏性放线菌 Sm Streptococcus mut
13、ans 变形链球菌 Sa Staphylococcus aureus 金黄色葡萄球菌 Pg Porphyromonas gingivalis 牙龈卟啉单胞菌 Fn Fusobacterium nucleatum 具核梭杆菌 MIC minimal inhibitory concentration 最小抑菌浓度 MBC minimal bactericidal concentration最小杀菌浓度 TSB trypticase soy yeast extract broth 胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤 TSA trypticase soy yeast agar 胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂 BHI br
14、ain heart infusion 牛心脑浸液 CFU colony forming unit 菌落形成单位 D diameter 直径 SD standard deviation 标准差 FC formocresol 甲醛甲酚 LPS lippolysaccharide 内毒素脂多糖 上海交通大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立 进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究 做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意 识到本声明的法律结果由本
15、人承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 上海交通大学 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同 意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许 论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或 部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制 手段保存和汇编本学位论文。 保密，在 年解密后适用本授权书。 本学位论文属于 不保密。 （请在以上方框内打“” ） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 上海交通大学硕士学位论文 - 1 - 1 前言 牙髓炎及根尖周炎主要
16、是由根管内以厌氧菌为主的多种微生物的混合感染所 致，尤其是专性厌氧菌是感染根管内的主要优势菌。目前治疗牙髓炎和根尖周炎的 最主要方法是根管治疗，但根管治疗术仍有 20 %30 %的失败率，其失败的主要原 因是根管内或根尖周微生物的再感染 1。 1.1 感染根管内的细菌及其与临床症状之间的关系 目前研究表明，在正常口腔环境中存在着大约 500 多种的细菌，其中只有少量 细菌能够定植在根管系统内，引起牙髓和根尖周组织的炎症。这些细菌包括：梭杆 菌属、普雷沃菌属、卟啉菌属、真杆菌属、消化链球菌属、丙酸菌属、放线菌属和 链球菌属等 2。细菌在根管内的定植并不是以单独游离的形式存在，而是类似于牙齿 表面的牙菌斑，是由基质包绕的多种细菌混合组成的生物膜形式定植在根管壁上 3。 以生物膜形式存在的细菌不仅对宿主防御机制的抵抗能力较强，对抗菌剂的耐受能 力也远高于以游离方式存在的细菌，有研究显示生物膜内的细菌对抗生素的抵抗能 力较游离细菌强 1000 倍，其确切机制尚未明了 4。 在未经治疗
