抗tnfα单克隆抗体对大鼠蛛网膜下腔出血后不同脑区细胞caspase3、bax、bcl2的影响

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1、分类号:R 7 4 3 3 5 密级: 单位代码:1 0 4 2 2 学号:2 7 1 2 9 9 8 厶蒙另孥 硕士学位论文 U niv e r sit yM a s t er ,sT h e sis 论文题目:抗T N F - Q 单克隆抗体对大鼠蛛网膜下腔出 血后不同脑区细胞C a s p a s e - 3 、B a x 、B cI - 2 的影响 E f f e c to fa n t i T N F aa n t i b o d yo na p o p t o s i s r e l a t e dm o l e c u l e s ( C a s p a s e 3 B a x

2、B c l - 2 ) i nd i f f e r e n tb r a i na r e a so f r a t sa f t e r s u b a r a c h n o i dh e m o r r h a g e 专 指导教师姓名姜差 专业技术职务夔授 2 0 1 0 年5 月1 0 日 原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独 立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不 包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研 究作出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本声明 的法律责任由本人承担。 论文作者签名:立

3、L 埠 日 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学 校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论 文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存论文和汇编本学位论文。 ( 保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名:乏雠导师签名:型鎏:日期:坐:纠 目录 抗T N F - Q 单克隆抗体对大鼠蛛网膜下腔出血后不同脑区凋亡相关因子的影响 第一部分实验性蛛网膜下腔出血后海马在不同时间点凋亡相关因子 ( C a s p a s e 3 、B a x 、B

4、c l 一2 ) 的基因表达 材料与方法1 6 结果1 9 讨论2 0 结论2 3 参考文献2 3 第二部分抗T N F - Q 单克隆抗体对实验性蛛网膜下腔出血大鼠不同脑区细胞 C a s p a s e 3 、B a x 、B c l 一2 的影响 材料与方法2 5 结果3 4 讨论3 5 结论3 8 参考文献3 8 附图4 2 致谢5 6 攻读学位期间发表的学术论文目录5 7 O l 5 9 l 要要明言 摘摘说文文号 中英符前 C o N T E N T S E f f e c to fa n t i - T N F aa n t i b o d yo na p o p t o s i

5、 s r e l a t e dm o l e c u l e si nd i f f e r e n tb r a i n a r e a sa f t e rs u b a r a c h n o i dh e m o r r h a g e A b s t r a c ti nC h i n e s e 1 A b s t r a c ti nE n g l i s h 5 A b b r e v i a t i o n s 9 I n t r o d u c t i o n 1 ( ) P a r tI G e n ee x p r e s s i o no fa p o p t o

6、t i cm o l e c u l eC a s p a s e - 3a n dB a xa n dt h e a n t i a p o p t o t i cm o l e c u l eB c l - 2a td i f f e r e n tt i m ep o i n t so fS A Hi nh i p p o c a m p u s M a t e r i a l sa n dm e t h o d s 1 6 R e s u l t s 。1 9 D i s c u s s i o n :2 ( ) C o n c l u s i o n s 2 3 R e f e r

7、e n c e s :3 P a r t E f f e c to fa n t i T N F - oa n t i b o d yo nC a s p a s e 3 、B a x 、B c l - 2i nd i f f e r e n t b r a i na r e a so fr a t sa f t e rs u b a r a c h n o i dh e m o r r h a g e M a t e r i a l sa n dm e t h o d s 2 5 R e s u l t s 3 4 D i s c u s s i o n 3 5 C o n c l u s

8、i o n s 。:;8 R e f e r e n c e s 3 8 F i g u r e s 4 1 A c k n o w l e d g e m e n t 5 5 P u b l i s h e da r t i c l e s 5 6 山东大学硕士学位论文 抗T N F - Q 单克隆抗体对大鼠蛛网膜下腔出血后不同脑 区凋亡相关因子的影响 硕士研究生: 导 专 师: 刘殿玮 姜勇教授 业:神经外科学 中文摘要 第一部分:实验性蛛网膜下腔出血后海马在不同时间点凋亡 相关因子( C a s p a s e 3 、B a x 、B c I - 2 ) 的基因表达 目的: 探讨蛛网膜下

9、腔出血后海马在不同时间点凋亡相关因子( C a s p a s e 3 、B a x 、 B c l - 2 ) 的基因表达变化,找出变化明显的时间点,予以药物干预。 材料和方法: 1 实验材料成年雄性W i s t a r 大鼠4 8 只,年龄2 个月,体重2 5 0 3 0 0 9 , 由山东大学实验动物中心提供,实验动物单笼喂养,标准饲料喂养1 周后再行枕 大池二次注血。 2 实验方法实验用大鼠随机分成6 组,每组各8 只动物。选择体重 2 5 0 3 0 0 9 健康成年雄性W i s t a r 大鼠,采用枕大池内新鲜自体动脉血二次注入法 建立S A H 鼠模型。将大鼠称重后用1 0

10、 水合氯醛溶液4 0 0 m g k g 腹腔注射麻醉后, 仰卧位固定于鼠板上,沿右侧腹股沟切开皮肤皮下,钝性游离股动脉,抽取新鲜 的动脉血0 5 m L 备用,结扎止血,逐层缝合。然后将大鼠俯卧位固定于脑立体定 位仪,术区皮肤消毒,沿颈背部中线切开皮肤皮下,钝性分离肌层至显露寰枕膜, 穿刺寰枕膜并抽出0 1 m L 脑脊液,5 m i n 内将自体动脉血0 3 m L 缓慢注入枕大池。 山东大学硕士学位论文 头低位3 0 。维持3 0 m i n ,使血液均匀地分布于基底池,首次注血4 8h 后同样方法 第二次枕大池注血,制作大鼠S A H 模型。用R e a l - T i m eP C

11、R 技术检测凋亡分子 c a s p a s e 一3 和b a x 以及抗凋亡分子b c l 一2 在不同时间点的变化情况。 结果: 1 大鼠S A H 后有神经功能障碍,运动较前迟缓,触须反应减弱,进食量下降。 2 二次注血后,凋亡分子c a s p a s e - 3 表达量实验组较空白对照组均有所上 升,以1 d 、2 d 、3 d 上升明显,与空白对照组相比有统计学差异( 仄O 0 1 ) ;b a x 的 基因表达水平也均有所上升且在S A H 后2 d 变化最明显与空白对照组相比有统计学 差异( p 9一m,;毋面叱 山东大学硕士学位论文 图9S A H 后2 天海马c a s

12、p a s e - 3 、b a x 和b c l - 2 基因表达: c a s p a s e - 3 图9 - 1 空白对照组、P B S 组、T N F 组c a s p s s e - 3 岫:N A 表达 b a x 图9 _ 2 空白对照组、P B S 组、T N F 组b a z 氓N A 表达 2 丕1 1 O b c l - 2 图9 - 3 空白对照组、P E S 组、T N F 组b c l - 2 皿N A 表达 的 o 3 2 2 , 1 Z 芷c n。-ou-o一。,。一,一专一篮 的 的 硒 的 o 3 3 2 Z l l Z芷Ex-oJoI,1。I等;叱 ,c qu口Jo一。,。一。,一苫一。芷 山东大学硕士学位论文 图1 0S A H 后2 天下丘脑c a s p a s r 3 、b 默和1 呛1 - 2 基因表达: c a s p a s e 4 图1 0 - 1 空白对照组、阳S 组、肿组c 8 s 姐s e 一3m R N A 表达 2 7 D 2 2 1 0 5 0 2 0 3 0 O b a x 图1 0 - 2 空白对照组、P B S 组、T N F 组b u 氓N A 表达 b c l 2 图1 嗍空白对照组、P B S 组、T N F 组b c l 一2 氓N A 表达

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